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应用实时荧光定量PCR研究BBTV DNA1在香蕉不同组织中的含量

文献类型: 中文期刊

作者: 周朋 1 ; 余乃通 2 ; 章绍延 2 ; 胡加谊 2 ; 刘志昕 2 ;

作者机构: 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词: 香蕉束顶病毒;实时荧光定量PCR;病毒含量

期刊名称: 热带作物学报

ISSN: 1000-2561

年卷期: 2014 年 35 卷 07 期

页码: 1388-1392

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为准确定量香蕉束顶病毒(Banana bunchy top virus,BBTV)DNA1组分在香蕉组织中的分布和含量,建立以SYBR Green-I荧光染料为标记的实时荧光定量PCR(Real Time Fluorescence Quantitative PCR)方法。利用B1-F/B1-R引物扩增海南BBTV DNA1组分并构建到pMD18T sample载体,再以B2-F/B2-R引物测定该质粒的标准曲线,其线性方程为Y=-3.247×LOG(X)+8.01,相关系数r2=0.997,扩增效率为103.2%,标准质粒检测灵敏度约为214 copies/μL。分别选取染病香蕉的嫩叶、叶鞘、假茎和球茎各100 mg,提取DNA并进行实时荧光定量PCR检测。结果表明:病株各部位均含BBTV病毒,但含量有明显差异,其中嫩叶(3.08×108 copies/mg)>叶鞘(2.50×108 copies/mg)>假茎(1.29×108 copies/mg)>球茎(1.67×107 copies/mg),呈依次递减。

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