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青枯菌诱导的桑树根部酵母双杂交文库构建和MaTGA1互作蛋白的筛选及鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 戴凡炜 1 ; 王振江 1 ; 罗国庆 1 ; 钟建武 1 ; 李智毅 1 ; 唐翠明 1 ;

作者机构: 1.广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所

关键词: 桑树;青枯病;MaTGA1;酵母双杂交;互作蛋白

期刊名称: 植物生理学报

ISSN: 2095-1108

年卷期: 2023 年 011 期

页码: 2126-2134

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: TGA (TGACG-binding)是一类碱性亮氨酸拉链转录因子,在SA介导的植物系统获得性抗性中发挥重要的调节作用。为探究TGA转录因子MaTGA1在桑树应答青枯菌胁迫的信号通路,本研究利用青枯菌侵染的桑树根部构建了均一化的酵母双杂交c DNA文库,库容量3.2×106 cfu·m L-1,插入片段长度500~2 000bp,重组率100%。构建了pGBKT7-MaTGA1诱饵载体,经检测在酵母中无自激活和毒性活性。将诱饵载体与酵母双杂交文库共转酵母菌株,获得35个阳性克隆, Blastx比对确定包含11个候选互作蛋白,其中候选蛋白——高迁移率族蛋白MaHMGB10 (High mobility group B protein 10)有13个克隆。通过酵母回转验证、双分子荧光互补和免疫共沉淀验证,确定MaHMGB10可与MaTGA1发生体内互作。

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