文献类型: 中文期刊
作者: 王相生 1 ; 孙亚宁 1 ; 阮崇美 1 ; 张全伟 1 ; 张勇 1 ; 胡骁飞 1 ;
作者机构: 1.甘肃农业大学动物医学院;河南省农业科学院农业部动物免疫学重点实验室;甘肃农业大学生命科学技术学院
关键词: 玉米赤霉烯酮;ZEN-jjm基因;枯草芽孢杆菌;母猪
期刊名称: 动物营养学报
ISSN: 1006-267X
年卷期: 2017 年 29 卷 11 期
页码: 4019-4025
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 本试验旨在建立玉米赤霉烯酮(ZEN)降解酶基因ZEN-jjm在枯草芽孢杆菌中的表达体系,确定其产物的生物降解活性及对母猪繁殖性能的作用。克隆ZEN-jjm基因,经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切后连接至p HT01表达载体中,构建重组质粒;转化枯草芽孢杆菌,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析ZEN-jjm蛋白表达水平。高效液相色谱法(HPLC)检测表达的ZEN-jjm蛋白降解ZEN的活性。通过对母猪的繁殖性能的评价,确定ZEN降解酶降解ZEN对母猪繁殖性能的影响。双酶切和测序结果表明:ZEN-jjm成功插入p HT01中,SDSPAGE表明获得1株高效表达目的蛋白的重组枯草芽孢杆菌,其大小约为29 ku。HPLC结果表明表达的ZEN-jjm蛋白能有效地降解ZEN;表达的ZEN-jjm蛋白能显著缓解ZEN对繁殖母猪的毒害作用(P<0.05)。综上:1)本研究成功构建了表达ZEN-jjm在枯草芽孢杆菌中的表达载体,并在枯草芽孢杆菌中得到了表达。2)表达的ZEN-jjm蛋白具有降解ZEN的生物活性。3)在饲粮中添加ZEN-jjm蛋白能显著降低ZEN对母猪能繁殖性能的危害。
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