文献类型: 中文期刊
作者: 苏芮 1 ; 滕蔓 2 ; 李会珍 1 ; 郑鹿平 2 ; 刘豪丽 2 ; 刘金玲 2 ; 朱志坚 2 ; 罗俊 2 ; 张改平 1 ;
作者机构: 1.河南农业大学牧医工程学院
2.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室
关键词: MDV;miRNA;宿主靶基因;肿瘤发生;hybrid-PCR
期刊名称: 畜牧兽医学报
ISSN: 0366-6964
年卷期: 2020 年 51 卷 008 期
页码: 1956-1969
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 血清1型马立克病病毒(MDV-1)感染引起的鸡马立克病(MD)一直以来被认为是研究病毒诱导肿瘤发生机制的理想模型.此前研究发现,MDV-1编码的miR-M4-5p是宿主癌基因miR-155的病毒同源物,从基因组中敲除miR-M4-5p可显著降低MDV-1的致病性和致瘤性,表明miR-M4-5p可能是MDV-1诱导肿瘤发生的重要调控因子.为进一步揭示miR-M4-5p的调控机制,以CEF细胞总RNA反转录产物cDNA为模板,利用hybrid-PCR技术构建了miR-M4-5p的候选靶基因文库.通过基因克隆、PCR鉴定及序列比对分析,获得128个候选基因序列,有73个基因的3′-UTR存在miR-M4-5p的潜在结合靶点,其中23个3′-UTR结合靶点与miR-M4-5p完全互补配对.通过双荧光素酶报告试验和qRT-PCR分析,对miR-M4-5p与3′-UTR的体内外相互作用以及候选靶基因的表达水平进行分析和验证,最终鉴定DPT、TMEM230和DCLK1为miR-M4-5p调控的宿主靶基因.本研究为后续进一步阐明miR-M4-5p在MD肿瘤发生中的调控机制奠定了重要基础.
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