文献类型： 中文期刊

作者： 王金斌 ¹ ; 白蓝 ² ; 李文 ² ; 张俊沛 ² ; 王荣谈 ² ; 吴文慧 ² ; 唐雪明 ³ ;

作者机构： 1.上海市农业科学院生物技术研究所;上海海洋大学食品学院;上海市农业遗传育种重点实验室;上海瑞丰农业科技有限公司

2.;上海市农业科学院生物技术研究所;上海海洋大学食品学院;上海市农业遗传育种重点实验室;上海瑞丰农业科技有限公司

3.;上海市农业科学院生物技术研究所;上海海洋大学食品学院;上海市农业遗传育种重点实验室;上海瑞丰农业科技有限公司;

关键词： 动物源性成分;五重PCR;优化;检出限

期刊名称： 核农学报

ISSN： 1000-8551

年卷期： 2018 年 03 期

页码： 506-514

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得肉制品中牛、羊、猪、鸡、鸭等动物源性成分的快速高效多重PCR检测方法,利用5对牛、羊、猪、鸭和鸡等动物源性成分特异性PCR引物(靶基因序列来源于线粒体基因组),对多重PCR反应条件引物浓度和退火温度进行优化,并确定该检测方法的检出限。结果表明,多重PCR方法最佳反应条件为鸭源特异性引物浓度0.12μmol·L~(-1),鸡源特异性引物浓度0.16μmol·L~(-1),猪源特异性引物浓度0.16μmol·L~(-1),羊源特异性引物浓度0.32μmol·L~(-1),牛源特异性引物浓度0.24μmol·L~(-1),退火温度58℃,d NTPs浓度0.20 mmol·L~(-1),Taq DNA聚合酶添加量5 U,循环次数40。在最佳反应条件下,所建立的牛、羊、猪、鸡和鸭等5种动物源性成分多重PCR的g DNA检出限达到20 pg。应用优化后的多重PCR方法对21份市售肉制品样本进行盲样检测,验证鉴别方法的准确性,结果与现行标准的检测结果一致,掺假率达42.86%。本试验结果为肉制品中该5种动物源性成分的快速检测提供了技术支撑。