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大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子单克隆抗体的制备与鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 王耀 1 ; 李燕虹 1 ; 吴佳蓓 1 ; 邢云瑞 2 ; 曹金博 1 ; 陈秀金 1 ; 李兆周 1 ; 邓瑞广 2 ; 胡骁飞 2 ;

作者机构: 1.河南科技大学食品与生物工程学院

2.河南省农业科学院

关键词: 大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子;单克隆抗体;免疫学特性

期刊名称: 中国食品学报

ISSN: 1009-7848

年卷期: 2020 年 20 卷 007 期

页码: 216-221

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为制备免疫学特性良好的大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子(BBI)单克隆抗体(mAb),以50μg/只的免疫剂量将BBI免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA和间接竞争ELISA试验鉴定多抗血清效价和敏感性.选择血清效价和敏感性较优的小鼠进行细胞融合,多次筛选得到分泌BBI mAb的稳定杂交瘤细胞株.采用体内诱生腹水法制备BBI mAb并对其免疫学特性进行鉴定.结果表明:1号小鼠经免疫后效价最高且敏感性最好,半数抑制浓度(IC50)为868.58 ng/mL.经细胞融合筛选得到5株杂交瘤细胞,其中3B7-B10 mAb效价达到1:4.096×105以上,亚型为IgG1型,IC50为83.07 ng/mL,具有亲和力较高且特异性强的优点,表明所制备的mAb免疫学特性良好,能够为建立大豆及其制品中BBI的免疫学检测方法提供良好的抗体基础.

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