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鱼致病性舒伯特气单胞菌双重PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 刘春 1 ; 李凯彬 1 ; 王庆 1 ; 王芳 1 ; 曾伟伟 1 ; 石存斌 1 ; 吴淑勤 1 ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部渔药创制重点实验室/广东省水产动物免疫技术重点实验室

关键词： 舒伯特气单胞菌;gyrB基因;hlyA基因;双重PCR

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2014 年 36 卷 01 期

页码： 54-57

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为快速准确鉴别检测鳢源致病性舒伯特气单胞菌(A.schubertii),本实验根据该菌的促旋酶B亚单位基因(gyrB)、溶血素基因(hlyA)的保守序列设计引物,建立了检测致病性A.schubertii的双重PCR方法。结果显示gyrB和hlyA基因扩增产物分别为601 bp和375 bp;其最低检出菌体DNA量为2.3×10-2ng,最低检出菌数为3×102cfu。特异性试验结果显示,该方法对温和气单胞菌、嗜水气单胞菌、无乳链球菌、诺卡氏菌、迟缓爱德华氏菌、荧光假单胞菌、柱状黄杆菌、哈氏弧菌以及类志贺邻单胞菌扩增结果均为阴性。应用该方法对37份临床病料样品的检测结果与传统细菌分离鉴定结果的符合率为100%,表明该方法具有良好的特异性和敏感性,可以应用于A.schubertii的快速检测和流行病学研究。

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