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微小毛霉凝乳酶基因在毕赤酵母中的表达条件及其酶学特性研究

文献类型： 中文期刊

作者： 张丽红 1 ; 王景会 2 ; 王昕 3 ; 郑丽 4 ; 杨贞耐 5 ;

作者机构： 1.吉林大学

2.吉林省农业科学院

3.吉林大学生物与农业工程学院

4.中国农业科技东北创新中心农产品加工研究中心

5.吉林省农业科学院农产品加工研究中心

关键词： 微小毛霉;重组凝乳酶;优化;酶学特性

期刊名称： 食品科技

ISSN： 1005-9989

年卷期： 2010 年 11 期

页码： 2-6

收录情况： 北大核心

摘要： 在实验室成功构建的表达凝乳酶的重组巴斯德毕赤酵母GSl15/pPIC9KG4-3-35的基础上,对其表达外源蛋白的发酵条件进行了研究。经过单因素实验研究表明,培养基发酵产酶的最佳条件为:每隔12 h补加一次浓度为1.3%的甲醇、诱导时间为96 h;诱导过程中是否更换培养基对外源蛋白表达影响不大,重组菌的最佳初始诱导菌浓度为2.0 OD600/mL。对酶的酶学特性的研究结果表明,该酶作用的最适温度和最适pH分别为55℃和5.5。在50℃处理30 min和55℃处理10 min的条件下酶的活性完全丧失,重组凝乳酶的对热不稳定性的特性有利于干酪生产工艺中对乳清处理的要求。该酶在pH6.0时最稳定。金属离子中,Ca2+和Na+对酶凝乳有促进作用,而Mg2+、K+和Cu+则对酶凝乳有抑制作用。

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