文献类型： 中文期刊

作者： 魏春豪 ¹ ; 杨光昕 ¹ ; 迟海 ¹ ; 陶乐仁 ² ; 孔聪 ¹ ; 蔡友琼 ¹ ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院东海水产研究所

2.上海理工大学医疗器械与食品学院

关键词： 孔雀石绿;荧光;内滤效应;金纳米簇;酶联免疫分析

期刊名称： 分析化学

ISSN： 0253-3820

年卷期： 2022 年 50 卷 001 期

页码： 73-81

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 建立了一种基于金纳米簇(BSA-AuNCs)和荧光内滤效应(IFE)检测孔雀石绿(MG)的免疫分析方法.以牛血清蛋白(BSA)为稳定剂,快速合成了荧光性能好、超小尺寸的双发射峰BSA-AuNCs,合成过程仅需7 min,其最大激发波长(390 nm)与对硝基苯酚(PNP)的吸收峰(400 nm)重叠,两者之间产生IFE效应,使BSA-AuNCs的荧光被强烈猝灭.基于此,以BSA-AuNCs为荧光探针,以碱性磷酸酶(ALP)替代传统ELISA中的辣根过氧化物酶(HRP),通过ALP分解对硝基苯磷酸二钠(PNPP)产生的PNP猝灭荧光信号,根据BSA-AuNCs的荧光强度变化实现MG的间接检测.优化了包被原、抗体浓度、二抗浓度、底物浓度、反应温度和反应时间等因素.在最佳实验条件下,本方法检测MG的线性范围为0.1~100 ng/mL,线性回归方程为y=181.53lgCMG+241.3(R2=0.995),检出限为0.089 ng/mL,回收率为84.0% ~110.2%,相对标准偏差为4.6% ~11.2%.本方法具有较高的灵敏度和准确度,可用于实际环境样品中痕量MG的快速高通量检测.