文献类型： 中文期刊
作者： 于莹 1 ; 宿小杰 2 ; 周德庆 2 ; 刘楠 2 ; 孙永 2 ; 王珊珊 2 ;
作者机构： 1.中国海洋大学食品科学与工程学院
2.中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室
关键词： 紫贻贝;免疫活性肽;响应面法;RAW264.7巨噬细胞
期刊名称： 中国海洋药物
ISSN： 1002-3461
年卷期： 2021 年 006 期
页码： 21-29
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 目的探讨紫贻贝免疫活性肽的酶解制备工艺。方法本研究以紫贻贝（Mytilus edulis）为原料,选用5种不同的蛋白酶对其进行酶解,以小鼠RAW264.7巨噬细胞的相对增殖率和酶解液中活性肽的浓度为指标,在单因素实验基础上通过响应面法优化制备紫贻贝免疫活性肽（Mytilus edulis immunomodulatory peptides, MIP）,同时采用CCK-8和中性红吞噬实验对其免疫活性进行初步研究。结果实验数据表明,胰蛋白酶为最适蛋白酶,最佳酶解条件为:酶解温度43.7℃,p H 8.9,时间3.2 h,加酶量3 000 U/g。在此条件下,100μg/mL MIP对RAW264.7巨噬细胞的相对增殖率为92.4%。CCK-8结果显示,MIP对RAW264.7细胞无毒性作用且能显著促进细胞增殖。当MIP浓度为100μg/mL时,中性红吞噬指数可提高至1.22。同时,形态学观察结果显示MIP可以刺激细胞分化形成伪足,细胞形态以不规则多边形为主。结论 MIP对RAW264.7细胞具有较好的免疫调节活性。
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