文献类型： 中文期刊

作者： 郝晓燕 ¹ ; 张毓露 ² ; 足木热木 ¹ ; 危晓薇 ¹ ; 邵琳 ¹ ; 陈果 ¹ ; 黄全生 ¹ ;

作者机构： 1.新疆农业科学院核技术生物技术研究所

2.新疆农业大学农学院

关键词： 盐穗木;GKR基因;绿色荧光蛋白(GFP);载体构建;亚细胞定位

期刊名称： 新疆农业科学

ISSN： 1001-4330

年卷期： 2012 年 49 卷 02 期

页码： 285-289

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】以GFP基因为报告基因,构建HcGKR基因的亚细胞定位表达载体。【方法】采用PCR方法和基因枪法。【结果】用PCR法,以pGEM-T-HcGKR质粒为模板,获得HcGKR基因的目的片段。然后将其克隆到亚细胞定位表达载体35S:GFP中,获得由CaMV35S启动子调控目的基因的35S-GFP-HcGKR融合表达载体,使目的基因能够和GFP融合同时表达。采用基因枪法将35S-GFP-HcGKR转化到洋葱表皮细胞中,暗培养24 h后,经共聚焦显微镜观察确定发出绿色荧光的位置,对HcGKR基因进行亚细胞定位。【结论】构建的亚细胞定位表达载体可在植物细胞中表达,通过洋葱细胞中绿色荧光的位置确定目的基因定位在细胞膜上,为进一步盐穗木HcGKR基因的功能奠定了理论基础。