文献类型： 中文期刊
作者： 曹宗喜 1 ; 焦培荣 2 ; 谭树义 1 ; 叶保国 1 ; 亓文宝 2 ; 张桂红 2 ;
作者机构： 1.海南省农业科学院畜牧兽医研究所
2.华南农业大学兽医学院
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;反向遗传操作系统;构建
期刊名称： 动物医学进展
ISSN： 1007-5038
年卷期： 2016 年 37 卷 11 期
页码： 1-8
收录情况： 北大核心
摘要： 为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)反向遗传操作系统,将PRRSV全基因组分6段克隆,构建获得6个重组质粒,先由A1和A2片段或B1和B2片段连接构成A片段或B片段,然后D、C、B和A片段依次亚克隆入pOKq载体。在基因组5′端和3′端分别加上CMV启动子序列和BGH终止信号肽,全基因组510位核苷酸突变引入遗传标记位点FseⅠ。测序正确的全基因组质粒命名为pOK-A2BCD。再将pOK-A2BCD质粒转染BHK-21细胞,拯救病毒通过PCR、酶切、测序和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定,结果表明拯救病毒成功,为进一步研究PRRSV致病性等相关分子机制奠定了基础。
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