文献类型： 中文期刊

作者： 杨兴东 ¹ ; 曲扬 ¹ ; 王趁趁 ¹ ; 毋丽华 ¹ ; 何贝贝 ¹ ; 王小慧 ¹ ; 胡骁飞 ² ;

作者机构： 1.周口师范学院生命科学与农学学院

2.河南省农业科学院

关键词： 双氯芬酸;合成抗原;单克隆抗体;酶联免疫吸附测定法;药酒

期刊名称： 食品安全质量检测学报

ISSN： 2095-0381

年卷期： 2024 年 15 卷 016 期

页码： 39-44

摘要： 目的 建立间接竞争酶联免疫吸附测定法快速筛查药酒中双氯芬酸(diclofenac,DCF)。方法 采用活性酯法和混合酸酐法分别将DCF与载体蛋白耦合,得到DCF的免疫原和检测抗原。采用DCF-牛血清白蛋白免疫BALB/c小鼠,随后用杂交瘤等技术制备抗DCF单克隆抗体(monoclon alantibody,mAb),基于DCFmAb建立了间接竞争酶联免疫吸附测定法,对该检测方法的性能(准确度、精密度和特异性)进行鉴定。结果 紫外扫描结果表明DCF已成功与载体蛋白偶联;获得最优株抗DCF的杂交瘤细胞株(4B9),其IC50值为0.61ng/mL;该检测方法在药酒中的DCF平均添加回收率为85.9%,其批间变异系数(coefficient of variation, CV)(5.3%～9.7%)均大于批内CV (4.9%～9.1%),与类似物(酮洛芬、阿司匹林、吲哚美辛、布洛芬、舒林酸、萘普生、罗非昔布)没有交叉反应。结论 本研究建立的间接竞争ELISA法为DCF在药酒中的残留提供了一种新的筛查手段。