文献类型： 中文期刊
作者： 罗玄 1 ; 张海涛 2 ; 尹秀凤 2 ; 黄显明 2 ; 靳宇田 1 ; 张小飞 2 ; 潘玲 1 ;
作者机构： 1.安徽农业大学动物科技学院
2.南京天邦生物科技有限公司
关键词： I型鸭肝炎病毒;vp3基因;截短;克隆表达
期刊名称： 中国动物传染病学报
ISSN： 1674-6422
年卷期： 2012 年 20 卷 03 期
页码： 17-21
摘要： 根据I型鸭肝炎病毒(Duck hepatitis virus type 1,DHV-1)A66株vp3基因序列,设计了一对扩增vp3截短基因(-468bp)的特异性引物,将vp3截短基因与表达载体pET-32a(+)连接,构建了vp3截短基因的重组表达质粒pET-VP468。pET-VP468转入表达菌E.Coli Rosetta-gami(DE3)pLysS中,使用IPTG诱导表达融合蛋白Trx-VP468。Trx-VP468经过Ni-NTA亲和层析柱和DEAE-Sepharose阴离子柱纯化,SDS-PAGE电泳结果表明,pET-VP468在大肠杆菌中表达了一个相对分子量约为36kDa的蛋白,免疫印迹试验表明Trx-VP468得到了正确表达。该结果为VP3蛋白的免疫学功能研究奠定了基础。
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