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PEG介导的黑附球菌遗传转化体系的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 张雷刚 1 ; 罗淑芬 2 ; 周宏胜 2 ; 胡花丽 2 ; 李鹏霞 3 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院农产品加工研究所;江苏省农业科学院园艺产品产后处理工程实验室

2.;江苏省农业科学院农产品加工研究所;江苏省农业科学院园艺产品产后处理工程实验室

3.;江苏省农业科学院农产品加工研究所;江苏省农业科学院园艺产品产后处理工程实验室;

关键词： PEG介导;黑附球菌;遗传转化;原生质体;工程菌株

期刊名称： 菌物学报

ISSN： 1672-6472

年卷期： 2018 年 02 期

页码： 205-214

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以生防真菌黑附球菌原生质体为受体、潮霉素抗性基因(hph)为筛选标记,应用PEG介导法进行了遗传转化体系的研究。潮霉素敏感性测试结果表明,黑附球菌对潮霉素的耐受浓度为50mg/L。PEG介导的黑附球菌原生质体最佳遗传转化体系为:30℃下用2%裂解酶酶解黑附球菌菌丝2h,过滤收集原生质体,经MTC清洗重悬后将质粒p YF11-hph转化黑附球菌原生质体,在RM培养基中混匀再生;经潮霉素药剂筛选和PCR验证,表明外源基因hph已转入到黑附球菌中并获得稳定表达。本实验成功地建立了稳定的PEG介导的黑附球菌遗传转化体系,为研究其代谢途径、生防机制及构建工程菌株提供了技术保障。

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