文献类型： 中文期刊
作者： 胡骁飞 1 ; 邢云瑞 1 ; 孙亚宁 1 ; 庞杏豪 2 ; 王耀 3 ;
作者机构： 1.河南省农业科学院
2.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室
3.河南科技大学食品与生物工程学院
关键词： 腐霉利;分子改造;人工抗原;动物免疫;血清
期刊名称： 中国农学通报
ISSN： 1000-6850
年卷期： 2021 年 033 期
页码： 142-147
收录情况： CSCD
摘要： 为了制备腐霉利（PCM）人工抗原,采用琥珀酸酐法改造PCM分子,利用碳二亚胺（EDC）法将改造后的PCM与牛血清白蛋白（BSA）及卵清蛋白（OVA）偶联制备PCM人工抗原PCM-BSA和PCM-OVA。采用凝胶电泳、紫外扫描及动物免疫法对人工抗原质量进行了鉴定。凝胶电泳及紫外扫描结果表明PCM与载体蛋白偶联成功;用PCM-BSA免疫小鼠的血清可以与PCM-OVA发生免疫反应,血清效价可以达到1:6400。用游离的PCM抑制酶标板上附着的PCM-OVA与小鼠血清反应时,即使游离PCM浓度达到256μg/mL时,也没有出现明显的抑制;而用本研究制备的PCM-OVA溶液替代PCM时,则可以抑制酶标板上附着的PCM-OVA与小鼠血清之间的反应,且半数抑制浓度（IC50）是在制备的PCM-OVA溶液稀释到320倍时。本研究将PCM成功地偶联到载体蛋白上,但免疫小鼠产生的针对PCM的抗体灵敏度比较低,这说明苯环可能是PCM分抗原决定簇的一部分,而琥珀酸酐改造PCM分子时破坏了抗原决定簇,因此该方法不适合用于PCM人工抗原制备。
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