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抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 祭芳 1 ; 曹欢 2 ; 徐剑宏 1 ; 史建荣 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室——省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室/农产品质量安全风险评估实验室〈南京〉

2.南京师范大学生命科学学院

关键词： 玉米赤霉烯酮;单克隆抗体;酶联免疫吸附法

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2014 年 30 卷 02 期

页码： 417-422

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立快速、简单、灵敏、有效的玉米赤霉烯酮的检测方法,将玉米赤霉烯酮与羧甲氧基胺半盐酸盐反应,合成半抗原ZEN-oxime,通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备玉米赤霉烯酮人工抗原,以人工抗原ZENBSA免疫BALB/C小鼠,取该鼠脾细胞与SP 2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和克隆,得到了1株能稳定分泌抗玉米赤霉烯酮抗体的单克隆细胞株3D10。3D10的抗体类型及亚类均为IgM,其轻链为Kappa链。制备的单克隆抗体腹水通过间接酶联免疫吸附测定,效价在1×10-6以上。该单克隆抗体对玉米赤霉烯酮的IC50为225 ng/ml,除与玉米赤霉烯酮结构类似物有一定的交叉反应外,与其他参试真菌毒素均无交叉反应。所制备的单克隆抗体可用于玉米赤霉烯酮毒素初筛和定性检测。

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