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苦荞C4H基因的cDNA克隆及生物信息学分析

文献类型: 中文期刊

作者: 刘荣华 1 ; 王丽 1 ; 孙朝霞 1 ; 侯思宇 1 ; 李红英 1 ;

作者机构: 1.山西农业大学农学院;山西农业大学农业生物工程研究所;特色杂粮种质资源发掘与育种山西省重点实验室

关键词: 苦荞;肉桂酸-4-羟基化酶;电子克隆;生物信息学分析

期刊名称: 山西农业大学学报(自然科学版)

ISSN: 1671-8151

年卷期: 2017 年 37 卷 11 期

页码: 767-773

摘要: [目的]为了解植物苯丙烷类代谢途径中关键酶——肉桂酸-4-羟基化酶基因结构特征及系统进化,拟克隆苦荞肉桂酸-4-羟基化酶(Cinnamate-4-hydroxylase,C4H)基因并进行生物信息学分析。[方法 ]本研究通过RT-PCR技术,克隆2个苦荞C4H基因cDNA和DNA序列,并通过生物信息学分析其基因结构及蛋白理化性质,最大似然树法构建系统进化树。[结果]2个基因cDNA序列长度分别为1 812bp和1 476bp,各编码504和491个氨基酸残基。其DNA序列分别为2 774bp和2 364bp,均包含3个外显子和2个内含子,第1个外显子和2个内含子序列长度存在明显差异。蛋白分子量分别为58.002kDa和56.401kDa,等电点分别为9.18和9.09。2个基因编码氨基酸与苦荞肉桂酸-4-羟基化酶同源性分别为99%和86%,故暂且命名为FtC4H1和FtC4H2。FtC4H1和FtC4H2与其他物种直系同源蛋白聚为两类,FtC4H1和FtC4H2与莴苣和丹参同源蛋白亲缘关系较近,氨基酸序列同源性分别为88%和84%。[结论]本研究通过对苦荞2个C4H基因的核酸、氨基酸序列、蛋白结构及系统进化树进行分析,为后续苯丙烷代谢途径及荞麦基因挖掘利用提供理论基础。

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