文献类型： 中文期刊

作者： 王耀 ¹ ; 曹金博 ² ; 胡骁飞 ³ ; 段张秀 ⁴ ; 庞杏豪 ¹ ; 孟继秋 ¹ ; 孙亚宁 ³ ; 曹夕丹 ¹ ; 陈秀金 ¹ ; 李兆周 ¹ ;

作者机构： 1.河南科技大学食品与生物工程学院

2.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

3.河南省农业科学院

4.河南省新乡市动物卫生监督所

关键词： 巴氯芬;人工抗原;多克隆抗体;ELISA

期刊名称： 西北农林科技大学学报(自然科学版)

ISSN： 1671-9387

年卷期： 2021 年 49 卷 011 期

页码： 46-52

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]合成巴氯芬(baclofen,BA)人工抗原并制备其多克隆抗体,为巴氯芬免疫学快速检测方法的建立奠定基础.[方法]采用碳二亚胺(EDC)法将BA分别与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,合成免疫抗原BA-BSA和包被抗原BA-OVA,通过紫外扫描和SDS-PAGE凝胶电泳鉴定其偶联效果.将免疫抗原BA-BSA免疫BALB/c小鼠,利用间接ELISA、间接竞争ELISA及交叉反应试验分别对所获多克隆抗体的效价、敏感性、特异性等免疫学特性进行鉴定.[结果]紫外扫描和SDS-PAGE凝胶电泳结果表明人工抗原偶联效果良好.ELISA结果表明,多克隆抗体的效价达到1∶25600,半数抑制浓度(ICso)为22.33 ng/mL,且与巴氯芬结构类似物及其他瘦肉精类药物(γ-氨基丁酸、氯丙那林、可乐定、赛庚啶、克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺)交叉反应率均小于0.3%,具有良好的敏感性和特异性.[结论]成功合成了巴氯芬人工抗原,并制备了免疫学特性良好的巴氯芬鼠源多克隆抗体.