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副猪嗜血杆菌OMP5单克隆抗体的制备与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 秦翠丽 1 ; 高祥辉 2 ; 李春玲 3 ;

作者机构： 1.河南科技大学

2.广东省农业科学院兽医研究所

3.广东省兽医公共卫生公共实验室

关键词： 副猪嗜血杆菌;OMP5;单克隆抗体;杂交瘤技术

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2012 年 32 卷 10 期

页码： 1468-1472

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用副猪嗜血杆菌(HPS)血清5型灭活菌液免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,以HPS外膜蛋白5(OMP5)为抗原,经间接ELISA法筛选阳性融合孔,并用有限稀释法对筛选的阳性孔进行亚克隆,获得2株分泌抗HPS OMP5单克隆抗体的杂交瘤细胞株1E2和8D9;间接ELISA法效价检测,1E2和8D9细胞培养上清抗体效价均为1∶2 560,纯化后腹水抗体效价分别为1∶204 800和1∶51 200;抗体型别鉴定,1E2和8D9分别分泌IgG2b、IgG2a型抗体;特异性检测表明,2株单抗均能特异识别OMP5。将2株杂交瘤细胞反复冻融3次复苏后仍能稳定分泌抗体。2株抗HPS OMP5单克隆抗体的成功制备,将为HPS感染快速检测方法的建立以及检测试剂的研制奠定基础。

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