文献类型: 中文期刊
作者: 廖俊伟 1 ; 张小飞 2 ; 黄显明 1 ; 毛火云 1 ; 尹秀凤 2 ; 刘大伟 1 ; 魏建忠 1 ;
作者机构: 1.安徽农业大学动物科技学院
2.南京天邦生物科技有限公司
关键词: Ⅰ型鸭肝炎病毒;VP3基因;克隆与表达
期刊名称: 动物医学进展
ISSN: 1007-5038
年卷期: 2009 年 30 卷 07 期
页码: 49-52
收录情况: 北大核心
摘要: 根据GenBank上登录的Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)基因组序列,设计一对特异性引物。通过RT-PCR的方法扩增DHV-Ⅰ(A66株)VP3基因并将其5′端起始处稀有密码子同义突变。用限制性内切酶BamHⅠ/SalⅠ消化VP3基因片段和表达载体pGEX-6p-1后构建重组表达质粒pGEX-VP3,转化E.coliBL21(DE3)。经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析表明,VP3基因在大肠埃希菌中大量表达,表达产物的分子质量约为52 ku。Western blot检测表明,表达产物能与DHV-Ⅰ阳性血清发生反应,具有反应原性。
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