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人工合成的黑曲霉NRRL3135菌株植酸酶基因在毕赤酵母系统中的高效表达

文献类型： 中文期刊

作者： 贝锦龙 1 ; 陈庄 2 ; 杨林 3 ; 廖玲 2 ; 王珣章 3 ; 蒋宗勇 4 ;

作者机构： 1.中山大学生物防治国家重点实验室生物医药中心

2.广东省农业科学院畜牧研究所

3.中山大学生物防治国家重点实验室生物医药中心！广州510275

4.广东省农业科学

关键词： 基因人工合成;植酸酶基因phyAas;基因克隆;毕赤酵母表达系统

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2001 年 17 卷 03 期

页码： 254-258

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本文以黑曲霉 (Aspergillusniger)NRRL3135菌株植酸酶基因为对象 ,通过基因人工合成的方法去除了该基因的内含子与信号肽编码序列 ,换用在毕赤酵母 (Pichiapastoris)中使用频率较高的密码子以优化其表达。该人工合成植酸酶基因 (PhyA as)以N端融合的方式正确插入到毕赤酵母表达载体pPICZαA。通过电击将重组表达载体整合入酵母染色体DNA中得到重组转化子。SDS PAGE结果与表达产物酶学性质研究表明植酸酶得到分泌表达 ,且与天然产物性质基本一致。筛选得若干株高产基因工程菌 ,其中SPAN Ⅲ菌株达到了在摇床培养条件下 ,每毫升发酵液产生 16 5 0 0 0u植酸酶的水平 ,基本满足工业化生产的要求

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