文献类型： 中文期刊

作者： 马艳平 ¹ ; 郝乐 ¹ ; 冯国清 ¹ ; 梁志凌 ¹ ; 马江耀 ¹ ; 柯浩 ¹ ; 刘振兴 ¹ ;

作者机构： 1.广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站

关键词： 罗非鱼;无乳链球菌;Ⅶ型分泌系统膜蛋白;敲除菌株构建;生物学特性分析

期刊名称： 南方水产科学

ISSN： 2095-0780

年卷期： 2022 年 18 卷 004 期

页码： 76-86

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： Ⅶ型分泌系统存在于无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)中,其组成膜蛋白对底物蛋白的分泌转运至关重要.为此利用热敏型自杀质粒,构建了含氯霉素筛选标签的膜蛋白重组敲除载体pSET4s-ΔessA、pSET4s-ΔessB、pSET4s-ΔessC,经同源重组后,利用PCR技术筛选到了其缺失突变株-无乳链球菌ΔessA、ΔessB、ΔessC.通过菌株生长曲线分析,ΔessA、ΔessB、ΔessC敲除株均较野生株(WT)生长过程变慢,其中ΔessA、ΔessB敲除株在生长早期有显著性差异(P<0.01).对ESAT6蛋白分泌影响分析显示,与WT株相比,ΔessA、ΔessB、ΔessC敲除株ESAT6的表达量均显著下调(P<0.01).结果显示,ΔessA、ΔessB、ΔessC敲除株均较WT株毒力显著降低(P<0.01).研究表明,essA、essB、essC为无乳链球菌Ⅶ型分泌系统重要的膜蛋白,其基因缺失造成了分泌蛋白ESAT6mRNA表达水平下降,影响了菌株毒力.