文献类型： 中文期刊

作者： 陈素贞 ¹ ; 马佳镁 ¹ ; 黄春媛 ² ; 范悦轩 ¹ ; 郑佳馨 ² ; 刘光亮 ² ; 曹宗喜 ² ;

作者机构： 1.新疆农业大学动物医学学院

2.海南省农业科学院畜牧兽医研究所海南省热带繁育与疫病研究重点实验室

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;ORF2a;侧流层析试纸条;重组酶介导扩增法（RAA）;临床检测

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2023 年 010 期

页码： 1249-1253

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究针对猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF2a基因序列，设计特异性RAA引物和标记探针，通过反转录酶与重组酶扩增结合，旨在建立一种高效检测PRRSV的基于侧流层析试纸条的可视化RT-RAA方法。结果，建立的RT-RAA-LF方法的最佳反应条件是39℃恒温扩增10 min，可在2 min内实现对检测结果的可视化判定；该方法特异性强，仅对PRRSV出现阳性扩增，对本研究中其他病原均无交叉反应；以含PRRSV ORF2a基因全段序列的重组质粒作为模板，RT-RAA-LF的检出限为160 copies/μL。应用建立的RT-RAA-LF方法对临床采集的160份样本进行检测，与PCR方法进行比较，两种方法的符合率为96.8%（65/68），一致性检验为χ~2＜3.84，在95%的置信区间内没有显著性差异，当中3份临床样品在PCR检测中为阴性。综上，基于PRRSV ORF2a建立的RT-RAA-LF方法操作简单，对仪器设备要求不高，能够高效且直观的实现临床检测，满足现场检测的要求，对猪养殖场快速诊断和防控PRRSV具有重要意义。