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利用噬菌体随机肽库筛选可结合猪繁殖与呼吸综合症病毒的多肽序列

文献类型： 中文期刊

作者： 徐海 1 ; 王继春 1 ; 于辙 1 ; 吕芳 1 ; 侯继波 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心

关键词： 猪繁殖与呼吸综合症病毒;噬菌体展示肽库;序列;免疫荧光

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2011 年 51 卷 01 期

页码： 127-133

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】采用完整的猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)颗粒筛选噬菌体肽库,以获得能高亲和力结合并能抑制该病毒复制的特异性多肽。【方法】用纯化的病毒粒子包被ELISA板,再用M13噬菌体随机12肽库进行筛选。经过3轮淘筛,ELISA鉴定噬菌体单克隆与PRRSV的亲和力,选取与PRRSV具有高亲和力的噬菌体单克隆进行DNA测序,据此推导多肽的氨基酸序列。通过TCID50检测其抗病毒复制能力,同时人工合成FITC标记的展示肽用于PRRSV的检测。【结果】经筛选和鉴定得到17个阳性噬菌体克隆能与PRRSV呈高亲和力结合,DNA测序发现各克隆之间有部分共有基序,其中2个克隆体外能明显抑制PRRSV的复制,使TCID50由10-7.3/0.1mL分别降至10-3.2、10-3.6/0.1mL,而FITC标记该展示肽能够在5mg/L工作浓度检测PRRSV。【结论】通过噬菌体肽库能够筛选到具有抗病毒作用的阳性噬菌体克隆,为进一步开发高效PRRSV的诊断和治疗试剂奠定基础。

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[2]小鼠原始生殖细胞迁移过程中macroH2A的表达. 时小艳,于建宁,吴宝江,马雪山,刘红林. 2013

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[4]中国杏自交不亲和花粉特异SFB基因的鉴定与序列分析. 吴俊,谷超,张绍铃,张树军,宋宏峰,赵习平. 2010

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