文献类型: 中文期刊
作者: 李凤 1 ; 张艳梅 2 ; 何金娇 2 ; 霍燕燕 3 ;
作者机构: 1.西安文理学院化学工程学院;上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所
2.;西安文理学院化学工程学院;上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所
3.;西安文理学院化学工程学院;上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所;
关键词: 新红细胞生成刺激蛋白;糖基化;质谱;亲水相互作用色谱
期刊名称: 中国医药工业杂志
ISSN: 1001-8255
年卷期: 2018 年 06 期
页码: 803-809
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 新红细胞生成刺激蛋白(NESP)是一种复杂的糖蛋白类药物,主要用于治疗慢性肾衰引起的贫血,含有5个N-连接和1个O-连接的糖基化位点。本研究建立了液相色谱-串联质谱法分析NESP的肽质量指纹图谱和糖肽结构。采用胰蛋白酶将所有糖基化位点酶解成肽段,分别采用高效液相色谱(HPLC)及两性离子亲水相互作用色谱(ZIC-HILIC)分析。与HPLC相比,ZIC-HILIC对O-糖肽的分离效果较理想,质谱信号响应也更强。在此基础上,尝试采用ZIC-HILIC对非特异性蛋白酶链霉蛋白酶E(Pronase E)酶解肽段进行分析。根据MS/MS碎片信息,一共鉴定了3种类型的O-糖肽,其糖链组成为GalNAcGal(Neu Ac)_2、GalNAcGal(NeuAc)_1和GalNAcGal。
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