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黄曲霉毒素M_1酶联免疫吸附检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 卢晓霞 1 ; 谢海军 2 ; 宋崴 2 ; 赵邑 2 ; 何永吉 3 ;

作者机构： 1.山西省生物研究所;山西省农业科学院农产品加工研究所

2.;山西省生物研究所;山西省农业科学院农产品加工研究所

3.;山西省生物研究所;山西省农业科学院农产品加工研究所;

关键词： AFM1;抗体;ELISA

期刊名称： 食品工程

ISSN： 1673-6044

年卷期： 2017 年 02 期

页码： 58-60

摘要： 建立单抗-多抗夹心酶联免疫吸附(ELISA)检测方法,为黄曲霉毒素M_1(AFM_1)的快速检测及研究奠定基础。采用有机合成法将AFM_1转化成半抗原AFM1肟化物(AFM1O),进一步与载体蛋白钥孔血蓝蛋白(KLH)和卵清蛋白(OVA)偶联合成完全抗原AFM_1-KLH和AFM_1-OVA;以AFM_1-KLH为免疫抗原、AFM_1-OVA为筛选抗原,采用杂交瘤技术制备AFM1单克隆抗体,以AFM_1-KLH免疫新西兰大白兔制备兔多克隆抗体;以AFM_1-OVA为标准蛋白,制备的单克隆抗体为捕获抗体,纯化的兔多克隆抗体为检测抗体,商品化HRP标记的山羊抗兔Ig G作为检测二抗,采用方阵滴定法优化各步检测条件,得到最佳试验条件,建立AFM1夹心ELISA检测方法。标准曲线方程为y=0.004 4x+0.002 1(R2=0.992 2),检测范围0.5 ng/m L~128 ng/m L;最低检测限为0.5 ng/m L,批内和批间差均小于10%,重复性良好。

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[4]马铃薯病毒检测技术中NCM—ELISA的应用. 张国柱. 1991

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