文献类型： 中文期刊

作者： 桂彬彬 ¹ ; 曲梦 ¹ ; 张蔚然 ¹ ; 李明玉 ¹ ; 江艳华 ¹ ; 姚琳 ¹ ; 王联珠 ¹ ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所/农业农村部水产品质量安全检测与评价重点实验室

关键词： 太平洋牡蛎;CgFUT5基因;克隆;组织表达;原核表达

期刊名称： 南方水产科学

ISSN：

年卷期： 2023 年 006 期

页码： 150-157

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： Lewis抗原被认为是诺如病毒特异性结合受体，作为诺如病毒传播载体，牡蛎中也存在着类Lewis抗原，但牡蛎合成这种碳水化合物的途径尚未阐明。为解析牡蛎中诺如病毒受体类Lewis抗原的合成路径，利用cDNA末端快速扩增（Rapid amplification of cDNA ends, RACE）技术克隆得到太平洋牡蛎（Crassostrea gigas）的CgFUT5基因全序列并进行生物信息学分析，通过实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）分析其在5种组织中的表达情况。构建原核表达质粒转化大肠杆菌（Escherichia coli）实现异源表达，并通过免疫印迹法（Western blot）鉴定免疫原性。克隆得到了具有1 173 bp开放阅读区的CgFUT5基因cDNA序列，系统发育树显示CgFUT5基因与多个物种具有合成Lewis抗原功能的岩藻糖基转移酶基因遗传学关系较近。重组CgFUT5蛋白可在大肠杆菌中过量表达，且表达的重组CgFUT5蛋白与抗人FUT5抗体及抗6×His标签抗体均能特异性结合。研究发现CgFUT5基因在牡蛎鳃组织中大量表达，CgFUT5蛋白与人FUT5蛋白具有相似的免疫原性，推测牡蛎中存在着类Lewis抗原的合成通路，并且调控牡蛎类Lewis抗原合成的基因还具有组织表达差异性。