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牛奶中AFM_1人工抗原的合成及多克隆抗体血清的制备

文献类型: 中文期刊

作者: 李秀梅 1 ; 蔡齐超 2 ; 刘玉宝 1 ; 谢彩华 1 ;

作者机构: 1.洛阳莱普生信息科技有限公司

2.河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室

关键词: AFM1;人工抗原;鉴定;多抗血清

期刊名称: 中国奶牛

ISSN: 1004-4264

年卷期: 2015 年 288 卷 Z1 期

页码: 1-5

摘要: 本研究合成并鉴定了黄曲霉毒素M1人工抗原,通过动物免疫制备出敏感性高、特异性好的鼠源黄曲霉毒素M1多克隆抗血清。采用琥珀酸酐改造黄曲霉毒素M1,并将其改造物按两种方法(DCC和EDC)分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)进行偶联,合成免疫抗原AFM1-BSA和检测抗原AFM1-OVA,经过薄层色谱、紫外扫描和凝胶电泳鉴定后,免疫BALB/c小鼠,共免疫3次,每次间隔3周,最后1次免疫10d后,断尾采血,制备多抗血清。经过测定,免疫的3只小鼠效价均达到了1:104以上,2号小鼠多抗血清的敏感性最好,半数抑制浓度IC50(50%inhibitive concentration,IC50)为37.61ng/m L,且具有良好的特异性。本研究成功合成了黄曲霉毒素M1人工抗原和多克隆抗体血清,为黄曲霉毒素M1单克隆抗体制备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。

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