文献类型： 中文期刊

作者： 蔡齐超 ¹ ; 侯玉泽 ¹ ; 邓瑞广 ² ; 胡骁飞 ² ; 王耀 ² ; 张小帆 ¹ ; 王方雨 ² ;

作者机构： 1.河南科技大学食品与生物工程学院

2.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

关键词： AFM1;人工抗原;合成;鉴定;多克隆抗体

期刊名称： 中国免疫学杂志

ISSN： 1000-484X

年卷期： 2014 年 06 期

页码： 789-793

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的:合成黄曲霉毒素M1(Aflatoxin M1,AFM1)免疫抗原和检测抗原,并对其进行鉴定。方法:采用肟化法改造AFM1,并用薄层色谱法监测肟化反应进程,对肟化物鉴定。将肟化物分别偶联于载体蛋白BSA和OVA上,得到免疫原AFM1-BSA和检测原AFM1-OVA,然后分别用紫外分光光度法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)对合成抗原进行鉴定。经动物免疫试验获得鼠源多抗血清,用酶联免疫吸附法(ELISA)对多抗血清进行检测,判断抗原是否偶联成功。结果:肟化改造后,肟化物在薄层板上的迁移距离缩短;偶联物AFM1-BSA在274 nm处出现最大吸收峰,且与BSA和AFM1的紫外吸收峰都不重合;AFM1-BSA的泳动速度明显小于BSA;免疫的3只小鼠效价均在1×10-4左右,其中3号小鼠多抗血清敏感性最好,半数抑制浓度IC50(50%inhibitive concentration,IC50)为359.9 ng/ml。结论:本试验成功制备出AFM1人工抗原,并得到了敏感性好的鼠源多抗血清。