文献类型： 中文期刊

作者： 刘博 ¹ ; 毕研丽 ¹ ; 杨丽梅 ² ; 冯宗玲 ³ ; 李佳 ³ ; 苏海歌 ² ; 孙红武 ⁴ ; 张艳 ¹ ; 王文秀 ² ;

作者机构： 1.海南省农业科学院畜牧兽医研究所海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室

2.山东省滨州畜牧兽医研究院

3.滨州市科技创新发展研究院

4.中国人民解放军陆军军医大学

关键词： 灰树花多糖;纳米乳;H9亚型禽流感病毒;抑菌效果

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2024 年 46 卷 008 期

页码： 856-862

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备灰树花多糖（GFP）纳米乳，并观察其理化及形态学特征，评估其对H9亚型禽流感病毒（AIV）及3种常见细菌的抑制效果，本研究采用低能乳化法制备GFP纳米乳，经不同方式处理后观察GFP纳米乳的稳定性，分别采用透射电镜和扫描电镜观察其形态特征，使用激光粒度仪测定GFP纳米乳的粒径与多分散系数（PDI），使用电位仪测定其Zeta电位。结果显示：该GFP纳米乳外观澄清、透明，8 000 r/min离心20 min和室温静止7 d后不分层、不破乳，表明制备的GFP纳米乳性状稳定。电镜观察可见许多单一分布的均匀圆球，其周围包裹着网格状凝胶基质；GFP纳米乳的粒径为10 nm～100 nm，平均粒径24.12 nm, PDI为0.096,Zeta电位为-18.6±4.3 m V，表明GFP纳米乳稳定性较好。将不同浓度的GFP纳米乳及免手洗凝胶消毒剂分别于MDCK细胞中与H9亚型AIV NJ02株作用，通过计算各药物对H9亚型AIV的抑制率比较GFP纳米乳对H9亚型AIV的抑制效果。将不同稀释度的GFP纳米乳、GFP溶液及免手洗凝胶和75%乙醇分别与AIV NJ02株作用后，采用荧光定量PCR(q PCR)检测H9亚型AIV基因的拷贝数，并计算各药物对H9亚型AIV的抑制率。采用药敏纸片法检测GFP纳米乳、GFP原液、免手洗凝胶对禽舍3种常见细菌的抑菌效果。对H9亚型AIV的抑制率检测结果显示，当浓度低于10μL/mL时，GFP纳米乳及免手洗凝胶消毒剂对H9亚型AIV的抑制率均小于55%，效果不明显；当浓度大于40μL/mL时，GFP纳米乳对H9亚型AIV的抑制率极显著高于同浓度的免手洗凝胶（P<0.01）；当浓度为80μL/mL时，GFP纳米乳可以100%抑制病毒增殖，且对细胞无毒性。qPCR结果显示，10倍稀释的各药物对H9亚型AIV的抑制率均明显高于100倍稀释的各药物，且10倍稀释的GFP纳米乳对H9亚型AIV的抑制率均极显著高于免手洗凝胶、GFP原液和75%乙醇（P<0.01）。纸片扩散法结果显示，GFP纳米乳对金黄色葡萄球菌的抑菌效果较差，对枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的抑菌效果较强，但总体GFP纳米乳的抑菌效果比免手洗凝胶稍差。上述结果表明，本研究制备的GFP纳米乳性状稳定，对体外培养的H9亚型AIV具有良好的抑制效果，对禽舍常见细菌具有一定的抑制效果，且安全无毒副作用，有望作为安全高效的纳米消毒剂用于畜禽和人类的消毒。本研究为开发新型抗病毒中草药纳米消毒剂奠定了实验基础。