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红色亚栖热菌海藻糖合酶在大肠杆菌中的表达及其酶学性质分析

文献类型: 中文期刊

作者: 王文文 1 ; 张峻 2 ; 王宇凡 3 ; 朱玥明 3 ; 张娟 4 ;

作者机构: 1.南开大学

2.天津市园艺工程研究所

3.天津市林业果树研究所

4.南开大学微生物学系分子微生物学与技术教育部重点实验室

关键词: 红色亚栖热菌;海藻糖合酶(TreS);表达;酶学性质

期刊名称: 南开大学学报(自然科学版)

ISSN: 0465-7942

年卷期: 2011 年 03 期

页码: 92-99

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 利用前期克隆得到的红色亚栖热菌CBS-01(Meiothermus ruber CBS-01)的海藻糖合酶基因(TreS),构建天然蛋白异源宿主表达载体并在大肠杆菌中获得较高的表达量.经纯化后测定该酶在pH 6.5,反应温度为50℃时活性最高.酶学性质的研究表明,TreS的最适底物为麦芽糖,其对麦芽糖的转化效率约是海藻糖的2.5倍;该酶在30~60℃、pH 3.5~9.0范围内都保留较高的酶活;2 mmol/L的一价阳离子Na~+、K~+对TreS有激活作用;低温有利于反应向海藻糖方向进行,并能减少葡萄糖副产物的生成;20℃时,几乎没有葡萄糖生成,麦芽糖至海藻糖的转化率可达65%.为工业化大规模生产海藻糖奠定了理论基础.

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