文献类型： 中文期刊

作者： 钟石 ¹ ; 吴伟杰 ¹ ; 霍进喜 ¹ ; 陈慧芝 ¹ ; 孙雨晴 ¹ ; 牛犇 ¹ ; 马焕艳 ¹ ; 潘美良 ¹ ; 李有贵 ¹ ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院;浙江省农业技术推广中心

关键词： 桑叶;DNJ含量;HPLC;方法学

期刊名称： 蚕桑通报

ISSN： 0258-4069

年卷期： 2022 年 53 卷 003 期

页码： 15-20

摘要： 为优化桑叶DNJ含量的测定方法,本研究采用单因素试验,分别考察了桑叶的粉碎粒度、提取溶剂、提取液pH、提取液体积、超声提取时间等因素对桑叶1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,DNJ)提取率的影响,在确定最优提取条件后,进一步考察该提取条件下用HPLC法测定桑叶DNJ的精密度、重复性、回收率、中间精密度等参数,最后利用该提取测定方法测定不同品种桑叶DNJ含量.结果显示,桑叶DNJ的最优提取测定方法为:桑叶粉碎过50目筛,0.2 g样品加200 mL pH=2.0缓冲液,超声提取20 min,10000 rpm离心10 min,保留上清液,精密吸取样品溶液10 μL,置1.5 mL离心管中,与10 μL 0.2 mol/L(pH=7)硼酸钾缓冲液在1.5 mL试管中混合,加入20 μL 5 mmol/L FMOC-CL(溶解于乙腈中),迅速混匀并在室温条件下反应10 min,加10 μL 0.1 mol/L甘氨酸液终止反应.该条件下用HPLC法测定同批次桑叶样品的精密度、重复性、回收率、中间精密度均良好,RSD均小于3%.用该方法测定的不同品种桑叶DNJ含量为0.8 g/kg~5.7 g/kg.以上研究结果为桑叶DNJ开发利用提供参考依据.