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鸡马立克病疫苗株CVI988/Rispens meq基因编辑及缺失毒株的构建与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 杨森 1 ; 滕蔓 2 ; 刘金玲 2 ; 周子誉 1 ; 郑鹿平 2 ; 楚钰淑 2 ; 丁轲 1 ; 余祖华 1 ; 罗俊 2 ;

作者机构： 1.河南科技大学动物科技学院

2.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

关键词： 马立克病;CVI988/Rispens;meq基因;CRISPR/Cas9;基因编辑

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2020 年 51 卷 008 期

页码： 1970-1976

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： meq是鸡马立克病病毒(MDV)最重要的致瘤基因,在马立克病(MD)肿瘤发生中发挥关键作用.同时,它在疫苗株和强毒株之间具有明显的序列差异性.本文利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以MDV疫苗株CVI988/Rispens meq基因为靶点,设计合成gRNA,克隆构建pX459-gRNA质粒,转染CEF并感染CVI988/Rispens,然后对meq基因编辑的病毒噬斑进行克隆纯化,经过PCR扩增、测序分析及IFA鉴定,成功构建1株meq基因编辑的缺失毒株CVI988Δmeq-C7,为后续筛选和鉴定抗MD疫苗株MEQ单抗及鉴别诊断研究奠定了基础.

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