文献类型： 中文期刊

作者： 王金斌 ¹ ; 李文 ¹ ; 蒋玮 ¹ ; 白蓝 ¹ ; 刘华 ¹ ; 李正鹏 ¹ ; 吴文惠 ¹ ; 唐雪明 ¹ ;

作者机构： 1.上海市农业科学院/上海市农业遗传育种重点实验室;上海海洋大学食品学院

关键词： 褐色双孢蘑菇;原生质体;再生;响应面分析法;诱变

期刊名称： 核农学报

ISSN： 1000-8551

年卷期： 2019 年 02 期

页码： 278-289

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了提高褐色双孢蘑菇原生质体产量和再生率,本研究以褐色双孢蘑菇棕秀一号为材料,利用Design-Expert 8.0.6软件进行二次回归分析对褐色双孢蘑菇制备原生质体的条件进行优化。结果表明,原生质体最佳制备条件为溶壁酶1.35%、蜗牛酶7.01%、酶解温度30.4℃、褐色双孢蘑菇菌丝体菌龄8.36 d、酶解时间3.00 h,在此条件下原生质体产量高达4.39×10~7个·mL~(-1);当溶壁酶含量为1.32%、蜗牛酶含量为6.96%、褐色双孢蘑菇菌丝体菌龄9.00 d、酶解时间2.97 h、酶解温度31.0℃时,原生质体的再生率最高(15.1%)。利用紫外诱变和化学诱变技术对褐色双孢蘑菇原生质体进行生长特性诱变,筛选获得了18株生长速率提高的突变菌株。本研究为褐色双孢蘑菇在遗传转化、基因组重排、基因编辑技术等后续分子遗传学研究提供了理论基础。