科研产出
鸭短喙矮小综合征病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与初步应用
《福建农业学报 》 2025 CSCD
摘要：[目的]建立一种快速检测鸭短喙矮小综合征病毒(Short beak and dwarfism syndrome virus,SBDSV)抗体的血清学方法.[方法]以蔗糖密度梯度离心纯化的SBDSV流行株M15,以此灭活全病毒作为固相包被抗原,通过系统性优化反应参数,构建一种高特异性的间接ELISA检测方法,用于鸭短喙矮小综合征病毒(SBDSV)血清抗体的定性分析.[结果]建立的间接ELISA检测方法的最佳反应条件为:抗原包被浓度 0.1 mg·mL-1,37℃孵育 2h后再 4℃过夜包被;1%BSA 37℃封闭 2h;血清样本 1∶200稀释;阴阳性临界值为 0.3214.该检测方法特异性好,与其他常见水禽病毒阳性血清均无交叉反应;敏感性高,阳性高免血清(LPAI效价 28)1∶204 800倍稀释时检测结果仍为阳性;批内、批间重复性好,变异系数均小于 6%;利用所建立的ELISA方法对 70份SBDSV疑似感染病鸭的血清样品进行检测,检测结果与LPAI检测结果符合率为 90%.对福建省 648份临床送检 1日龄雏鸭血清样品进行检测,抗体阳性率约为 48.30%,显示福建省养鸭场存在不同程度的SBDSV感染.[结论]本研究建立的SBDSV血清抗体间接ELISA检测方法,该方法特异性高,适合大规模血清学检测,可为监测SBDSV在我国的流行情况以及雏鸭母源抗体水平评价提供技术支撑.
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不同解冻方式对滩羊肋排冷藏期肉色的影响
《福建农业学报 》 2025 CSCD
摘要：[目的]解冻后的羊排在冷藏货架过程中易发生肉色褐变等品质劣变.本研究以冷冻滩羊肋排为对象,研究不同解冻方式对羊排在冷藏期间肉色变化的影响及其作用机制.[方法]分别采用包膜及高湿喷雾(反渗透水、NaOH溶液和pH 10碱性电解水)构建不同解冻环境,探究包膜解冻及高湿解冻对羊排冷藏期间(0~6 d)肉色、氧化水平及水分分布的影响.[结果]包膜解冻和高湿解冻(反渗透水及碱性电解水)能显著增加肉样在解冻结束时(贮藏 0d)的红度值.4℃贮藏至第 6天,包膜解冻和电解水喷雾处理相比于对照组(空气解冻)可显著抑制脂质氧化和蛋白质氧化,且肉色红度值(a*)分别提升 1.40倍和 1.54倍.低场核磁共振分析结果表明,包膜解冻和高湿解冻处理能减少肉样中结合水在总水分含量(结合水、不易流动水和自由水)中的占比,增加肌肉组织中不易流动水占比.[结论]包膜及碱性电解水喷雾高湿解冻显著延缓羊排肌肉组织的褐变并抑制氧化水平的升高.
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145份普通丝瓜种质资源农艺性状特征鉴定与评价
《江苏农业学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为鉴定与评价普通丝瓜种质资源的农艺性状特征,本研究以福建省蔬菜遗传育种重点实验室保存的145 份普通丝瓜种质资源为试验材料,对其 15 个农艺性状进行遗传多样性分析、相关性分析、主成分分析和聚类分析.结果表明,145 份普通丝瓜种质资源 15 个农艺性状的Shannon-Wiener指数为0~2.289,平均值为 1.322;变异系数0~54.224%,平均值为 26.298%.12 对农艺性状指标呈极显著正相关,11 对农艺性状指标呈极显著负相关.13 个相关性好的农艺性状共有 6 个主成分,主要影响因素分别为瓜形、瓜面特征、瓜皮色、瓜斑纹类型、近瓜蒂端形状、瓜顶形状,累计贡献率达到 71.569%.145 份普通丝瓜种质资源可分为 3 类,其中,第Ⅰ类包括 55 份种质资源,果实重量和长度均为中等,如LP-205、LP-213、LP-218 等;第Ⅱ类包括 72 份种质资源,果实呈圆筒状且较小、较轻,如LP-58、LP-123、LP-138 等;第Ⅲ类包括 18 份种质资源,果实成熟度较高且果实较长、较重,如LP-29、LP-39、LP-45等.综上,参试的 145 份普通丝瓜种质资源农艺性状多样性丰富,可为普通丝瓜种质资源的遗传改良、种质创新、新品种选育提供参考.
关键词： 普通丝瓜 农艺性状 多样性分析 主成分分析 聚类分析
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鲤疱疹病毒2型和3型双重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用
《海洋渔业 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为快速、高效鉴别鲤疱疹病毒2型（cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2）和3型（cyprinid herpesvirus 3,CyHV-3）,针对鲤疱疹病毒基因组的保守序列，设计了2对特异性引物，通过优化反应条件，建立了检测CyHV-2和CyHV-3的双重TaqMan qPCR方法，并对该方法特异性、灵敏度和重复性进行了评价。同时利用该方法对实验室保存的金鱼（Carassius auratus var.）和锦鲤（Cryprinus carpiod haematopterus）临床样品进行检测。结果显示，该方法能特异性检测CyHV-2和CyHV-3,而对水产养殖中其他常见DNA或RNA病毒无交叉反应；敏感性实验显示，该方法的最低检测量为10 copies·μL-1,表明该方法具有较高的灵敏度；测定结果在组内和组间重复变异系数均小于3%,重复性良好。使用该方法对实验室保存的37份金鱼和78份锦鲤临床样品进行检测，病毒检出结果与用国家标准（GB/T 36194-2018）和行业标准（SC/T 7212.1-2011）方法检测的结果一致。对5份CyHV-2（金鱼样品）和5份CyHV-3（锦鲤样品）阳性的临床样品进行混合后检测，结果均为CyHV-2和CyHV-3双阳性。研究表明，本研究建立的双重TaqMan qPCR检测方法具有特异性强、灵敏度高和重复性好等优点，可以为临床上CyHV-2和CyHV-3的快速定量检测和鉴别诊断提供新的工具和方法。
关键词： 鲤疱疹病毒2型 鲤疱疹病毒3型 双重TaqMan qPCR
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藏猪雌激素受体基因、促性腺激素β基因多态性及其对产仔性状的影响
《福建农业学报 》 2025 CSCD
摘要：[目的]分析藏猪雌激素受体(estrogen receptor,ESR)和促性腺激素β(follicle-stimulating hormone β,FSHβ)基因的多态性及其对产仔性能的影响,为分子标记辅助提升藏猪繁殖性能提供参考.[方法]应用PCR和PCR-RFLP方法检测66头藏猪FSHβ和ESR基因的多态性,并结合藏猪产仔性状相关数据分析FSHβ和ESR基因与繁殖性能的相关性.[结果]藏猪ESR和FSHβ基因存在多态性.在藏猪的ESR基因中,AA基因型的频率为 0.152,AB基因型的频率为 0.288,而BB基因型的频率则高达 0.560.进一步分析,ESR基因中等位基因A的频率为 0.296,而等位基因B的频率为 0.704,说明BB基因型在该群体中占据优势地位,B等位基因为优势等位基因.FSHβ基因中,AA基因型频率为 0.379、AB基因型频率为 0.288,BB的基因型频率为 0.333;等位基因A的频率为 0.523,等位基因B的频率为 0.477,其中AA基因型为优势基因型,A为优势等位基因.ESR、FSHβ基因型与藏猪产仔数性状的关联分析显示,ESR-BB、FSHβ-AA基因型对藏猪产仔数量影响显著(P<0.05),产仔数量显著高于其他基因型.[结论]藏猪ESR基因的B等位基因与FSHβ基因的A等位基因对藏猪产仔性状影响明显,可作为其标记辅助选择的潜在遗传标记,为后期藏猪繁殖性状的研究提供重要依据.
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改进的固相萃取-气相色谱-串联质谱法测定茶叶中44种农药残留
《农药 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：[目的]建立固相萃取-气相色谱-质谱联用法(SPE-GC-MS/MS)测定茶叶中44种农药残留的检测方法。[方法]用水浸泡茶叶样品30 min后，用乙腈溶液提取，通过液液分配去除咖啡因，后经PSA/Carb固相萃取柱净化后，采用气相色谱-质谱法和多反应监测(MRM)模式检测，外标法对茶叶中的农药残留进行定量分析。[结果]在优化的条件下，44种农药的残留量在10～1000μg/L范围内具有良好的线性关系(相关系数均大于0.99)，在0.05、0.1、0.5 mg/kg 3个加标水平下，44种化合物在绿茶中的平均回收率为62.3%～98.5%，相对标准偏差区间为1.9%～9.7%，在乌龙茶中的平均回收率为73.5%～108.7%，相对标准偏差区间为1.2%～10.3%，绿茶和乌龙茶的检出限(LODs)分别为0.001～0.025、0.001～0.03 mg/kg，定量限(LOQs)为0.05 mg/kg。[结论]方法适用于茶叶中44种农药残留的同时检测。
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西藏墨脱地区番茄青枯菌的分离鉴定及生防菌剂效果评价
《福建农业学报 》 2025 CSCD
摘要：[目的]分离鉴定西藏墨脱番茄青枯病菌,明确其遗传多样性,评价筛选适用于墨脱地区青枯菌的生防菌剂.[方法]对采自西藏墨脱地区的番茄青枯病病株通过组织分离法进行病原菌的分离纯化,通过形态观察结合分子鉴定明确其种类;通过演化型多重PCR(phylotype-specific multiplex polymerase chain reaction,Pmx-PCR)、生理小种和生化型鉴定确定分离菌株的类型;利用PCR扩增获得egl基因部分序列进行系统发育分析,明确分离菌株的序列变种;采用平板抑菌圈法测定 5种生防菌剂对病原菌的抑制效果.[结果]从墨脱地区采集的 6株番茄青枯病病株中分离获得 8株病菌,经鉴定为青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum),所分离菌株均属于演化型Ⅰ、生化型Ⅲ和序列变种 48.室内药剂抑菌结果表明,所测试的 5种生防菌剂对墨脱番茄青枯菌均具有良好的抑菌效果,其中昶百润微生物菌剂的效果最好,抑菌直径达 19 mm以上.[结论]本研究分离鉴定了西藏墨脱地区的番茄青枯菌菌株,明确了其群体遗传结构;筛选出可适用于墨脱地区的生防菌剂,为青枯病的高效绿色防控提供技术支持.
关键词： 墨脱地区 青枯劳尔氏菌 番茄青枯病 遗传多样性 生防菌剂
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大黄鱼虹彩病毒灭活疫苗对斑马鱼的注射免疫效果
《应用海洋学学报 》 2025 CSCD
摘要：为了研究大黄鱼虹彩病毒(large yellow croaker iridovirus,LYCIV)灭活疫苗注射免疫效果,将斑马鱼(Danio rerio)分为 4组(对照组、灭活病毒组、佐剂组、疫苗组),分别注射细胞培养液、灭活LYCIV、佐剂、灭活疫苗.免疫后第 21天,每尾斑马鱼腹腔注射LYCIV(5×107 copies/尾),采用荧光定量PCR法测定免疫后第 10、21、35天脾、肾组织免疫相关基因ifng、il1b、il12a、il2、mx、irf1、tlr9、myd88、tnfa的表达水平.结果表明,对照组、灭活病毒组、佐剂组和疫苗组攻毒后的存活率分别为14.29%、28.57%、28.57%和 42.86%,疫苗组存活率显著高于对照组(P<0.05),相对免疫保护率为33.33%;疫苗组中脾组织ifng、il1b、il12a、mx、irf1、tlr9、myd88、tnfa在第 21天的表达水平极显著高于对照组、灭活病毒组和佐剂组(P<0.01);疫苗组中肾组织ifng、il1b、il12a、mx、irf1、tlr9、tnfa在第21天的表达水平极显著高于对照组、灭活病毒组和佐剂组(P<0.01).研究表明,以Montanide TM GEL 02 PR为佐剂制备的LYCIV灭活疫苗能提高斑马鱼IFN-γ、IRF1、TLR9、MyD88等干扰素相关信号分子和IL-1β等炎症因子的表达水平,提高斑马鱼感染LYCIV后的存活率.
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低温下苦瓜种子萌发差异评价及相关基因鉴定分析
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：[目的]评价低温下苦瓜种子的发芽能力,鉴定芽期低温响应基因并分析其表达模式,为探明苦瓜种子低温发芽分子调控机制提供理论指导.[方法]以6份苦瓜种质种子为材料,设置15 ℃的发芽温度,调查发芽率、发芽势、发芽指数、胚根长度、活力指数、平均发芽时间、平均发芽速度和种子萌发指数的变化,利用隶属函数法和聚类分析进行发芽能力综合评价及分类,选取发芽能力强和弱的种质进行转录组测序,获得差异基因后进行GO功能注释和KEGG富集分析,从中挖掘低温响应相关候选基因,利用荧光定量PCR进行验证,同时分析候选基因在苦瓜不同组织(芽、根、茎、叶)和不同发芽时期(0,7,14 d)的表达差异,探讨低温对苦瓜发芽的影响及相关基因的调控作用.[结果]低温处理下,不同种质苦瓜种子发芽指标出现差异,且各指标受影响程度不同;利用综合隶属函数值和聚类分析发现,苦瓜种质MC15和CH02发芽能力较强,ZK54和ZK90发芽能力中等,BG19和YW1发芽能力较弱.对MC15和BG19进行转录组测序,共获得3 062个差异基因,GO功能注释发现参与基因较多的有与胁迫、应激与防御响应,质膜和胞外区,DNA结合以及酶和蛋白活性相关的条目等;KEGG富集分析发现"植物激素信号转导""淀粉和蔗糖代谢""光合作用-天线蛋白""二萜生物合成"等途径的差异基因数较多,富集因子较高;结合转录组测序、基因克隆、序列比对和荧光定量PCR分析得出,基因McLEAL和McDOG1L-3可能参与芽期低温响应,两者编码的氨基酸序列与葫芦科作物的序列相似性较高,且均在芽中特异性表达,表达趋势与转录组结果一致.在发芽0,7和14 d 3个时期中,2个基因的表达量在发芽能力较强的苦瓜种质MC15和CH02中呈下降趋势,在发芽能力较弱的苦瓜种质BG19和YW1中呈先降后升趋势.[结论]低温导致苦瓜种子发芽出现种质间及指标间差异,MC15和CH02的发芽能力较强,可用于后续种质创新和生产利用;2个低温响应相关基因McLEAL和McDOG1L-3的表达存在组织特异性,且随发芽进程出现种质间差异和时间效应,推测两者可能协同调控低温下苦瓜的延迟发芽.
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基于气相色谱-离子迁移谱比较分析不同干燥方式下海鲜菇副产物干品的风味特征
《核农学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为探究不同干燥方式下海鲜菇副产物干品的风味特征,基于热风干燥、热泵干燥、加热冻干和不加热冻干4种方式干燥海鲜菇副产物,利用气相色谱-离子迁移谱(GC-IMS)技术鉴定分析海鲜菇副产物干品的挥发性有机化合物(VOCs),通过相对气味活度值(ROAV)分析关键风味化合物,结合主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)筛选风味差异化合物.结果表明,GC-IMS鉴定出116种挥发性成分,包括25种酯类、24种醛类、23种醇类、13种酮类、10种杂环类、8种羧酸类、7种萜类、3种含硫化合物、2种含氮化合物和1种芳香烃;差异性分析结果显示,羧酸类、醇类、醛类、酯类和含氮化合物是主要的挥发性化合物,且杂环类、羧酸类在热风干燥中表达量突出,酯类、醇类在不加热冻干中表达量突出;基于ROAV≥ 1筛选出4种干燥方式下共有的16种关键特征风味化合物,其贡献了海鲜菇副产物干品的基础气味,气味表现包含酸、可可、水果、鱼腥、清新、蘑菇、洋葱和草青味;此外,筛选了对"海鲜"特征气味有贡献的6种化合物,包括三甲胺、3-辛酮、(E)-2-辛烯醛、二甲基二硫醚、cis-4-庚烯醛和2-甲基丙醛,确定了热泵干燥和加热冻干中的"海鲜"气味最强烈.研究结果揭示了海鲜菇副产物干品的风味特征,为利用其开发高值化产品以提升资源利用率提供了理论依据.
关键词： 海鲜菇副产物 干燥方式 气相色谱-离子迁移谱 挥发性化合物
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