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杜鹃花属植物SRAP-PCR反应体系的优化及其应用

江苏农业学报 2010 北大核心 CSCD

摘要:采用改良CTAB法提取杜鹃花属植物基因组DNA,对影响SRAP-PCR反应体系中的Mg2+、dNTPs和引物浓度进行优化,建立了杜鹃花属植物SRAP分子标记的扩增体系:20μl的PCR体系中含有模板DNA50 ng、10×PCR buffer(不含Mg2+)、Mg2+2.50 mmol/L、dNTPs 0.20 mmol/L、引物0.40μmol/L、TaqDNA聚合酶1.0 U。并对10种杜鹃花属植物群体进行扩增验证,共获得261条扩增条带,251个多态性位点,多态性位点比率为96.17%,结果表明供试材料间差异明显、多态性较高,该体系适合杜鹃花属植物种间差异性分析,为今后杜鹃花属植物分子生物学的深入研究奠定了基础。

关键词: 杜鹃花属 SRAP 体系优化 聚类分析

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中草药防治奶牛乳房炎研究进展

江苏农业科学 2010 北大核心 CSCD

摘要:乳房炎影响奶牛泌乳机能,使产奶量减少,甚至使乳房丧失机能,饮用患病牛的奶对人体有害。近年来,牛奶中抗生素的残留备受关注。中药具有低毒性、低残留及安全性好等优势,人们在防治奶牛乳房炎中开始把注意力转向中草药,以期替代抗生素类药物。应用中草药防治乳房炎正日益被国内外专家所关注。笔者概述了中草药饲料添加剂对提高奶牛产奶性能的研究近况以及中草药防治奶牛乳房炎临床试验研究与应用,同时进行了中草药防治乳房炎作用效果的试验研究,对疗效的作用机理做了初步探讨,并且取得了新的进展。

关键词: 奶牛 放心奶 中草药 乳房炎 治愈率 作用机理

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脱氧雪腐镰刀菌烯醇降解菌的分离和鉴定

中国农业科学 2010 北大核心 CSCD

摘要:【目的】分离筛选能够降解脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的细菌,以期能在该毒素的生物解毒处理中得到应用。【方法】用高产毒禾谷镰刀菌F-25接种灭菌的小麦籽粒,培养后获得DON毒素;然后以DON毒素为唯一碳源进行DON毒素降解菌的驯化富集培养,得到能够降解DON毒素的混合菌群,逐一对分离到的细菌进行DON毒素降解能力检测,得到能够降解DON毒素的菌株。【结果】筛选得到的菌株DDS-1对液体培养基中的DON毒素的降解能力达95%以上,显著高于其它菌株;从形态、生理生化特性以及16S rDNA序列进行分析,DDS-1菌株初步鉴定为徳沃斯氏菌Devosia sp.;把DDS-1添加到小麦饲料中后,饲料中的DON毒素降解率达到75.47%。【结论】选出的DON高效降解菌株徳沃斯氏菌,不但对液体培养基中的DON毒素具有很好的降解作用,对饲料中DON毒素也有很好的降解效果。这为真菌毒素的生物脱毒处理提供了可行的方法。

关键词: 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 降解 徳沃斯氏菌 生物解毒

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高强度脉冲电场对牛乳货架期及风味的影响

江苏农业科学 2010 北大核心 CSCD

摘要:研究了高压脉冲电场(PEF)应用于牛乳的可行性杀菌工艺,结果表明,30 kV/cm、600μs、200 Hz PEF处理可延长牛乳在4℃下冷藏的货架期到24 d。采用固相微萃取(SPME)法提取鲜牛乳和PEF处理牛乳中的挥发性风味物质,气质联用法对其进行对比分析,结果鲜牛乳和PEF处理牛乳中分别检出28种和31种挥发性化合物。进一步采用SPME法提取2种牛乳中的挥发性风味物质,用时间-强度(OSME)的GC/O法鉴定其中的特征挥发性风味物质,发现了鲜牛乳中9种带有明显风味特征的物质,PEF处理牛乳中检出13种特征风味物质。

关键词: 高压脉冲电场 牛乳 杀菌 风味 货架期

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γ辐照对低温火腿肉制品感官及微生物指标的影响

江苏农业科学 2010 北大核心 CSCD

摘要:以低温牛肉火腿和烟熏火腿为材料,进行了60Coγ射线杀灭肉制品中的微生物试验。当辐照剂量为1.0 kGy时,产品贮存60 d后其微生物指标仍符合GB 2726—2005熟肉制品卫生标准要求,色泽、质构和风味变化不显著,因而货架期可从1个月延长至2个月。

关键词: 辐照 火腿 低温 肉制品 货架期 微生物指标

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禽流感病毒M2e特异性多肽ELISA检测方法的建立

畜牧与兽医 2010 北大核心

摘要:本研究人工合成禽流感病毒H5N1亚型M2蛋白的膜外区(M2e),并偶联至半抗原载体血蓝蛋白(KLH),免疫SPF鸡,共免疫3次,每次间隔两周。所获得的阴阳性血清用于ELISA方法的建立,通过方阵滴定确定了人工合成的23肽包被96孔ELISA板的最佳浓度为5μg/mL;1%BSA为封闭液,37℃封闭3 h;被检测血清的最佳稀释度为1∶400,一抗反应时间为37℃,45 min;二抗反应时间为37℃30 min;选用TMB为底物,显色15 min,用2 mol/L H2SO4为终止液为检测血清中抗M2e抗体滴度奠定基础。根据建立的ELISA方法,检测3次免疫2周后的SPF鸡血清中抗M2e抗体,血清开始1∶100倍稀释之后做倍比稀释,测得平均滴度分别为1∶13 500和1∶20 500。

关键词: 禽流感病毒 M2e 多肽 间接ELISA

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出血性大肠杆菌O157:H7的Tir与Hly融合基因的构建和表达

中国兽医学报 2010 北大核心 CSCD

摘要:构建表达Tir和Hly的融合基因,将Tir基因的C端414个氨基酸残基(Tir414)基因部分与Hly基因的C端300个氨基酸残基(Hly300)基因部分串联构建pET28a-Tir414-Hly300重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融合蛋白获得了高效表达。薄层扫描分析表明,目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30%左右。由于该融合蛋白由Tir和Hly2部分抗原组成,可刺激机体产生针对转位紧密素受体(Tir)和溶血素(Hly)的抗体,在EHECO157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。

关键词: EHECO157:H7 转位紧密素受体 溶血素 融合基因

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咪鲜·甲硫灵对水稻稻瘟病的室内抑菌活性和田间防治试验

江苏农业科学 2009 北大核心 CSCD

摘要:室内毒力测定结果显示,甲基硫菌灵和咪鲜胺按1∶5比例混配,对水稻稻瘟病病菌的共毒系数达233,增效极明显。用42%咪鲜.甲硫灵可湿性粉剂40g/667m2、60g/667m2、80g/667m2在水稻稻瘟病发病初期施药,可同时防治稻曲病,效果均显著,且大大降低施药工本;在水稻破口时用药,防治效果好于常规使用的井冈霉素、三环唑;且随用药量的增加其防治效果上升,但经济有效的用药量以40~60g/667m2为宜。

关键词: 咪鲜·甲硫灵 稻瘟病 室内抑菌活性 防治效果

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一个携有Bt基因的芽黄突变体初报

中国棉花 2009 北大核心

摘要:2005年在徐州农业科学研究所试验地发现1个陆地棉芽黄突变体。经研究证明:芽黄性状遗传稳定,属单基因隐性遗传;经卡那霉素检测,此芽黄突变体携有Bt基因。Bt基因与芽黄基因是否在一条染色体上以及控制此芽黄性状的基因与国内外诸多芽黄材料的基因是否是等位的,尚待进一步研究。

关键词: 芽黄突变体 Bt基因

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H9N2亚型禽流感病毒华东分离株的生物学特性及遗传进化分析

中国兽医科学 2009 北大核心 CSCD

摘要:对从华东地区分离的6株鸡源H9N2亚型禽流感病毒进行了生物学特性及血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因的分子遗传进化分析。发现这6株病毒对SPF鸡无致病性,IVPI均为0,可被单克隆抗体4E7分为2个亚群。序列分析表明,这6株病毒的HA基因裂解位点处的氨基酸序列均为RSSR↓GLF,Ck/HD/16/07和Ck/HD/112/05的潜在糖基化位点与其他4株不一致;NA基因为N2亚型,其中4个毒株的茎部缺失3个氨基酸,而另2个毒株无缺失。

关键词: H9N2亚型禽流感病毒 抗原性 血凝素 神经氨酸酶

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