科研产出
基于地标点法的不同黄河鲤群体形态鉴别
《扬州大学学报(农业与生命科学版) 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为了解黄河鲤谱系进化过程中不同群体形态差异，利用地标点法对20世纪70年代标本黄河鲤和现有山东、河南黄河鲤群体形态进行比较。选取19个地标点，通过最小平方和法进行回归分析，回归系数为0.998,证明地标点选取有效。通过地标点的重叠效果以及对平均形进行矢量化、网格化处理，形态差异主要体现在背鳍基部和腹鳍。相对扭曲主成分分析在不同黄河鲤群体中共提取34个主成分，通过第1、2主成分绘制散点图，标本黄河鲤群体与其他2个群体无重叠且较集中，河南和山东黄河鲤群体重叠且分散。聚类分析表明，河南、山东群体聚为一支，标本黄河鲤为单独一支。前5个主成分累积贡献率为93.03%,解释了主要形态变异，对前5个相对扭曲主成分得分建立Bayes判别函数，结果显示100%的标本黄河鲤能准确识别。背鳍基部和腹鳍2个位置靠近鱼类传统测量中体高特征值，标本黄河鲤与河南、山东黄河鲤形态差异极显著。综上，标本黄河鲤与河南、山东黄河鲤形态差异较大，主要体现在体高/体长比，而河南和山东黄河鲤形态无明显差异，为探究不同群体黄河鲤谱系在种质利用过程中分化和遗传渐渗时间奠定了基础。
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长期超低温冷冻保存对鞍带石斑鱼精子超微结构及酶活性的影响
《水产学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为探究长期超低温冷冻保存中鞍带石斑鱼精子质膜、活力、超微结构及酶活性的变化,阐明影响鞍带石斑鱼精子冷冻保存质量的相关机制.实验采集 2022 年鞍带石斑鱼鲜精及储存时间分别为 23、49 和 61 个月的冷冻保存精液,用伊红-苯胺黑染色方法检测精子质膜完整性;用计算机辅助精子分析仪(CASA)检测精子运动参数;测量精浆和精子中琥珀酸脱氢酶(SDH)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和肌酸激酶(CK)共 6 种酶活性的变化及三磷酸腺苷(ATP)浓度变化;用扫描电镜和透射电镜观察鲜精和冻精超微结构.结果显示,伊红-苯胺黑染色后,鲜精质膜完整性最高,为 83.43%±2.73%,经过超低温冷冻后,精子质膜完整性显著降低,且随着冷冻保存时间的延长而逐渐降低.CASA结果显示,鲜精活力最高,为 90.47%±3.34%,经过超低温冷冻后精子活力显著降低,但长期保存 23~61 个月的精子活力无显著差异,精子活力保持在(63.95%±3.66%)~(68.58%±2.73%),具有稳定的活力,且鲜精与冻精之间精子平均直线运动速度(VSL)、平均曲线运动速度(VCL)和平均路径速度(VAP)均没有显著差异.精子超微结构显示,鲜精形态结构正常、线粒体排列结构规则、形态大小正常.经过超低温冷冻保存后,精子形态结构损伤明显,表现为精子头部质膜破损、细胞质外漏、细胞核膜破损、尾部鞭毛断裂或脱落等.鞍带石斑鱼精浆和精子超低温冷冻前后 6 种酶活性的变化及ATP含量结果显示,经过超低温冷冻后,精子内SOD、GSH-Px和CAT及ATP含量均显著降低.精浆中酶活性升高,除GR和CAT外,其余酶活性均差异显著.研究表明,长期超低温冷冻对鞍带石斑鱼精浆和精子酶活性、精子活力及精子超微结构均具有较显著的影响.本研究结果为鱼类精子冷冻损伤机理研究积累了丰富的数据,为鱼类精子长期冷冻保存提供了技术参考和评价指标.
关键词： 鞍带石斑鱼 精子 超低温冷冻 超微结构 酶活性 计算机辅助精子分析系统
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硫酸亚铁和蛋氨酸螯合铁在草鱼实用膨化饲料中应用效果比较研究
《动物营养学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为探究草鱼实用膨化饲料中硫酸亚铁和蛋氨酸螯合铁的应用效果,采用草鱼实用配方配制4种试验饲料,对照饲料(T1组)不补充外源铁,另在对照饲料中补充不同来源的铁元素(112 mg/kg),分别为370 mg/kg硫酸亚铁(T2组)、1120 mg/kg蛋氨酸螯合铁(T3组)以及190 mg/kg硫酸亚铁+560 mg/kg蛋氨酸螯合铁(2种铁源分别提供56 mg/kg铁元素,T4组).选用初始体重为(4.30±0.20)g的草鱼幼鱼480尾,随机分配于16个养殖桶中,每桶30尾,每种饲料随机饲喂4桶试验鱼,在室内循环水养殖系统中养殖8周.结果显示:1)T3组的终末均重、增重率和特定生长率显著高于T1组(P<0.05),而T2、T4组与T1组差异不显著(P>0.05).2)全鱼粗蛋白质、水分和粗灰分含量各组之间无显著差异(P>0.05);T1组的全鱼铁元素含量显著低于其他各组(P<0.05),T3组的全鱼铁元素含量显著高于T2组(P<0.05),与T4组无显著差异(P>0.05).3)T3组的血清总蛋白和白蛋白含量显著高于T4和T1组(P<0.05);T1组的血清天门冬氨酸氨基转移酶活性显著高于其他各组(P<0.05),同时T4和T2组显著高于T3组(P<0.05).4)T1组的肝脏细胞出现空泡、膜边界模糊、细胞核偏移,其他组的肝脏形态较T1组有明显改善.5)T3和T4组的红细胞数目和红细胞比容显著高于T2和T1组(P<0.05);T3和T4组的血红蛋白浓度显著高于T1组(P<0.05).综上所述,在本试验条件下,在实用膨化饲料中添加112 mg/kg(以铁元素计)的蛋氨酸螯合铁更有利于草鱼对铁元素的吸收和利用,有利于血液健康,从而提高草鱼的生长性能和健康水平.
关键词： 硫酸亚铁 蛋氨酸螯合铁 草鱼 生长性能 血清生化指标
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海水养殖尾水总磷测定方法的比较与优化
《南方水产科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为提高海水养殖尾水中总磷（Total phosphorus, TP）的检测效率，使用酶标仪代替分光光度计进行海水养殖尾水TP的测定，并对TP的消解方法、酶标板类型与加样量等进行优化。结果表明，使用控温加热板消解60 min与高压灭菌器消解30 min的效果无显著差异（P＞0.05）；使用48孔板加样1 mL，检测的灵敏度优于其他实验组（96孔板200μL,96孔石英板200μL,48孔板200和500μL,24孔板500μL和1 mL）,48孔板加样1 mL与96孔板加样200μL，磷酸盐浓度与吸光度的线性相关性最高（R2=0.999 9）；对养殖尾水TP测定的精确度和准确度验证结果显示，48孔板加样1 mL的相对误差（Relative error, RE）和相对标准偏差（Relative standard deviation, RSD）分别介于-2.97%～1.59%和0.42%～4.06%，对甘油磷酸二钠（β-GLP）和六偏磷酸钠（SHMP）的回收率分别介于98.2%～99.6%和93.4%～97.1%,TP的测定限（Limit of quantification, LOQ）为0.25μmol·L-1;96孔板加样200μL的RE和RSD分别介于-14.03%～0.21%和2.63%～14.23%，对β-GLP和SHMP的回收率分别介于94.7%～99.0%和88.9%～97.3%,TP的LOQ为0.55μmol·L-1。在TP浓度介于0.55～6.4μmol·L-1内，两种优化法的准确度和精密度均符合测定要求，可用于海水养殖尾水TP的测定。
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饲料蛋白质水平和加工工艺对克氏原螯虾生长性能、消化力和抗氧化性能的影响
《渔业科学进展 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为研究不同蛋白质水平和加工工艺饲料对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)生长性能、消化力和抗氧化能力的影响，本研究采用4个蛋白质水平(28%、30%、32%和36%)和2种加工工艺即膨化饲料(EF)和硬颗粒饲料(PF)的4×2双因素实验设计，进行为期13周的养殖实验。结果显示，蛋白质水平和加工工艺对克氏原螯虾增重率和肝体比有显著的交互作用(P<0.05)。主效应结果显示，28%蛋白质可显著提高增重率和特定生长率，EF组的末重和增重率显著高于PF组(P<0.05)。蛋白质水平和加工工艺对肝胰脏的胰蛋白酶和淀粉酶活性有交互作用(P<0.05)。主效应结果显示，肝胰脏的胰蛋白酶、淀粉酶和肠道胰蛋白酶、淀粉酶均在28%蛋白质水平时最高，EF组肝胰脏胰蛋白酶、淀粉酶和肠道胰蛋白酶活力高于PF组(P<0.05)。蛋白质水平和加工工艺对肝胰脏的丙二醛和碱性磷酸酶活性有显著的交互作用(P<0.05)。主效应结果显示，肝胰脏碱性磷酸酶活性以及血清的碱性磷酸酶和酸性磷酸酶均在28%蛋白质水平时最低。PF组肝胰脏丙二醛含量显著低于EF组(P<0.05)，碱性磷酸酶活性显著低于EF组(P<0.05)。4种模型(Logistic、Gompertz、Von Bertalanffy和Brody)均能很好地模拟克氏原螯虾体重和体长的生长曲线，拟合度均大于0.97，其中，以Logistic模型拟合克氏原螯虾体重和体长最优，且幂函数可以反映体重和体长之间的关系。综上所述，28%蛋白质水平和膨化加工工艺使克氏原螯虾具有最优的生长性能和消化力，28%蛋白质水平的硬颗粒饲料可提高克氏原螯虾的抗氧化能力。
关键词： 克氏原螯虾 蛋白水平 加工工艺 生长曲线 消化力 抗氧化
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基于转录组学解析铜驯化缓解高温胁迫对大黄鱼的氧化损伤
《海洋渔业 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为探讨铜驯化对高温胁迫下大黄鱼(Larimichthys crocea)氧化损伤和基因表达水平的影响,将体质量为(48.92±3.62)g的大黄鱼暴露在铜离子浓度为0 和 10μg·L-1 的水体中 14 d,再暴露在温度为 32℃的水体中24 h.结果显示,高温胁迫显著增加了大黄鱼肝脏中活性氧(ROS)和脂质过氧化物(LPO)含量(P<0.05).铜驯化对常温下ROS和LPO含量不产生影响,而显著降低了高温胁迫下大黄鱼ROS 和LPO含量(P<0.05),表明铜驯化缓解了高温胁迫对大黄鱼的氧化损伤.从高温胁迫组vs对照组、铜驯化组vs对照组和(铜驯化+高温胁迫)组vs高温胁迫组中分别筛选到 828 个、2 311 个和 1 084 个差异基因.GO和KEGG分析发现,差异基因主要富集在与TCA循环、氧化磷酸化、谷胱甘肽代谢、内质网蛋白加工、吞噬体和MAPK信号通路等相关功能上.聚类分析表明,高温胁迫下调了TCA循环、氧化磷酸化、谷胱甘肽代谢、吞噬体和MAPK信号等通路中的大部分基因表达,上调了内质网蛋白加工通路中的大部分基因表达,而铜驯化则对高温胁迫下大黄鱼的这些基因表达调控产生了拮抗效应,表明铜驯化通过改善有氧代谢、抗氧化、自噬和凋亡来提高大黄鱼的高温胁迫耐受性.研究结果可为深入研究铜污染物对大黄鱼高温胁迫耐受性的影响及其分子机制提供基础资料.
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近缘新对虾PCNA基因的克隆及表达分析
《南方水产科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen, PCNA)作为DNA聚合酶δ的辅助蛋白，在DNA复制过程中发挥重要作用。近缘新对虾(Metapenaeus affinis)卵巢发育过程中存在细胞增殖活动旺盛的阶段，但目前关于其卵巢发育的分子机制研究较少。利用RACE (Rapid amplification of cDNA ends)技术获得近缘新对虾PCNA (MaPCNA)基因的cDNA序列全长，并通过实时荧光定量PCR (qRT-PCR)对其进行卵巢发育相关的表达分析。MaPCNA全长为1 144 bp，包含140 bp的5'非编码区，221 bp的3'非编码区，开放阅读框(ORF)为783 bp，编码260个氨基酸。MaPCNA蛋白的相对分子质量为28.82 kD，理论等电点为4.5。多重比对分析表明，PCNA氨基酸序列在甲壳动物中较为保守。组织表达结果显示，MaPCNA基因在检测的组织中均有表达，其中在卵巢中的表达量最为显著(P<0.05)。在不同发育阶段的卵巢中，MaPCNA基因的表达出现变化(P<0.05)，从Ⅰ期开始逐渐上升，到Ⅲ期表达量最高，之后显著降低并趋于平稳。MaPCNA基因在幼体发育不同时期的表达呈现出一定的规律性趋势，在受精卵时期的表达量最高，之后呈下降趋势，从无节幼体Ⅵ期开始表达平稳。研究结果提示PCNA基因可能在近缘新对虾的卵巢发育过程中发挥重要作用。
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罗非鱼皮胶原肽的酪氨酸酶抑制活性与铜离子结合活性研究
《南方水产科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为探明罗非鱼（Oreochromis）鱼皮胶原蛋白肽能否有效抑制黑色素的生成，采用酶解法制备出罗非鱼皮酪氨酸酶抑制肽（Tilapia skin tyrosinase inhibitory peptides,TSTIP），并开展其酪氨酸酶（Tyrosinase,TYR）抑制活性与铜离子(Cu2+)结合活性的相关性研究。结果显示，罗非鱼皮经碱性蛋白酶酶解4 h后的产物具有最高的TYR抑制活性和Cu2+结合活性，且两者呈极显著正相关（R=0.856）。荧光光谱分析显示，TSTIP与TYR或Cu2+结合后其内源荧光吸收强度的下降趋势一致，同时紫外吸收增强，且最大吸收波长发生红移。傅里叶变换红外光谱分析显示，TYR与Cu2+主要通过羰基及氨基与TSTIP结合。圆二色谱分析显示，两种结合物中β-转角及无规则卷曲含量相对减少，β-折叠含量相对增多，该现象在TSTIP-Cu2+结合物中更加明显。结果表明，TSTIP结合TYR产生的结构变化与结合Cu2+相似，TSTIP可通过螯合TYR的活性中心Cu+2来抑制其活性。
关键词： 罗非鱼皮 胶原蛋白肽 酪氨酸酶 肽-Cu2+结合物 结构特征
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高通量测序分析鉴定东星斑溃烂病主要致病菌
《农业生物技术学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：东星斑(Plectropomus leopardus)是一种新兴的经济型养殖鱼类,近年来溃烂症已成为其主要病害,严重影响幼鱼和成鱼,造成极大的经济损失,分离鉴定溃烂症主要致病菌是开展抗病选育的前提.本研究利用PacBio三代高通量测序方法对东星斑病鱼溃烂部位和正常鱼皮肤进行了微生物测序和聚类分析.结果显示,正常组中特有的OTUs(operational taxonomic units)为403个,而病鱼组有72个特有的OTUs,两组共有OTUs数是74个.正常组平均识别出16个门、30个纲、63个目、96个科、145个属、168个种,然而在病鱼皮肤平均识别出9个门、12个纲、27个目、38个科、55个属、67个种.这种差异说明致病菌抑制了正常菌群的生长,导致病鱼皮肤中的菌群结构多样性明显降低.正常组和病鱼组优势菌群组成存在较大差异,正常鱼中以变形菌门(Proteobacteria)和厚壁菌门(Firmicutes)为主;病鱼中以拟杆菌门(Bacteroidetes)和ε变形菌门(Epsilonbacteraeota)为主.ANOVA方差分析显示病鱼皮肤中弧菌属(Vibrio)的含量显著升高,通过KRONA分析注释出哈维氏弧菌(V.harveyi)、塔式弧菌(V.tubiashii)和不可培养弧菌(uncultured-Vibrio).经细菌分离实验鉴定1株哈维氏弧菌,命名为V.harveyi stain Dx21.通过腹腔注射法进行回归感染实验,发现V.harveyi stain Dx21能够导致东星斑幼鱼体表溃烂,随后导致死亡,症状与自然感染相似.该菌株对体重为100 g东星斑鱼苗的半致死浓度为1.0×105 cfu/mL.综上所述,本研究揭示了东星斑病鱼皮肤的菌群特征,提示哈维氏弧菌是主要致病菌之一.本研究对于东星斑溃烂病的病害防控以及疫苗的研制具有一定的指导意义.
关键词： 东星斑 溃烂病 16S rRNA 高通量测序 哈维氏弧菌
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稻虾轮作模式面源污染排放特征及其能值评估
《湖泊科学 》 2023 EI 北大核心 CSCD
摘要：为探明稻虾轮作模式面源污染排放特征并合理评价该模式的环境可持续性,通过对江汉平原稻虾轮作模式小龙虾养殖排放尾水中总氮(TN)、总磷(TP)、COD和氨氮(NH3-N)浓度进行监测,对稻虾轮作模式稻田养殖小龙虾的排污系数进行了估算,并采用等标污染负荷法进行了主要污染物解析.运用能值分析方法对稻虾轮作模式进行了包含面源污染的能值评估,对比单季稻模式,对其可持续发展能力进行了定量评价.结果表明:江汉平原稻虾轮作模式小龙虾养殖排放尾水中 TN、TP、COD 和 NH3-N 的浓度范围分别为 0.53~5.36、0.12~0.70、6.60~78.39 和 0.34~1.75 mg/L,TN、TP 和COD平均排放浓度高于《地表水环境质量标准》(GB 3838-2002)Ⅲ类水质标准.等标污染负荷法分析结果表明TN的等标负荷比最高,是稻虾轮作模式面源污染控制的关键污染物.稻虾轮作模式小龙虾养殖排放尾水中TN、TP、COD和NH3-N的排污系数分别为2.994、0.458、35.132和1.405 kg/t,表明稻虾轮作模式面源污染排放系数较低,对环境污染程度总体较小,但也应引起重视,并纳入农业面源污染源排放监测网络当中.包含面源污染的能值分析结果表明,与单季稻模式相比,稻虾轮作模式的可更新资源投入占比、能值产出率和可持续指数更高,环境负载率更低,表明当前的稻虾轮作模式虽然存在一定面源污染风险,但仍具有可持续发展竞争优势.研究结果为估算稻虾轮作模式的面源污染负荷提供了基础数据,为农业面源污染防治和稻虾轮作模式的可持续发展提供了参考依据.
关键词： 稻虾轮作 面源污染 能值分析 等标污染负荷 排污系数
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