科研产出
添加包被赖氨酸和蛋氨酸低蛋白质日粮对西门塔尔牛生产性能及氮排放的影响
《江苏农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为探索低蛋白质日粮中添加赖氨酸和蛋氨酸对西门塔尔牛生产性能及氮排放的影响，选择27头7月龄、体质量（200±10） kg的西门塔尔公牛，随机分为3组，每组9头。对照组饲喂基础日粮；试验Ⅰ组饲喂在基础日粮配方中粗蛋白质含量减少1.0个百分点，添加20 g/d包被赖氨酸+10 g/d包被蛋氨酸的日粮；试验Ⅱ组饲喂在基础日粮配方中粗蛋白质含量减少1.5个百分点，添加30 g/d包被赖氨酸+15 g/d包被蛋氨酸的日粮。预饲期7 d,正试期90 d。结果表明：饲喂添加包被赖氨酸和蛋氨酸低蛋白质日粮显著提高了西门塔尔牛的生长性能（P＜0.05）,降低了粪尿中的氮排放量（P＜0.05）;试验Ⅰ组和试验Ⅱ组饲喂添加包被赖氨酸和蛋氨酸低蛋白质日粮30 d、60 d和90 d,试验组外周血中Met和Lys含量均高于对照组（P＜0.05）;饲喂添加包被赖氨酸和蛋氨酸低蛋白质日粮30 d,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组外周血中仅苏氨酸含量低于对照组（P＜0.05）;随着饲喂时间的延长，外周血中多种氨基酸水平受到显著影响；饲喂90 d时，试验Ⅰ组和试验Ⅱ组除蛋氨酸和赖氨酸含量依然高于对照组以外，试验Ⅰ组和试验Ⅱ组亮氨酸含量和试验Ⅱ组的精氨酸含量也显著高于对照组（P＜0.05）,试验Ⅱ组的苏氨酸、异亮氨酸和酪氨酸含量显著低于对照组（P＜0.05）。饲喂添加包被赖氨酸和包被蛋氨酸的低蛋白质日粮90 d提高了西门塔尔公牛的生长性能，降低了饲料成本，尤其是试验Ⅰ组，养殖效益大幅增加。综上所述，饲喂添加包被赖氨酸和包被蛋氨酸的低蛋白质日粮，不仅促进了西门塔尔牛生长性能，而且提高了养殖效益。
关键词： 肉牛 低蛋白质日粮 过瘤胃氨基酸 生产性能 氮排放
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重离子辐照对小麦籽粒蛋白及加工品质的影响
《南方农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]探明重离子辐照对小麦籽粒蛋白及加工品质的影响,为小麦优质育种提供新思路和理论依据.[方法]以适宜江苏淮北地区种植的中强筋小麦品种连麦12和中筋小麦品种淮麦20为供试材料,设0(CK)、30、60和90 Gy 4个不同辐照剂量水平,分析不同处理下小麦籽粒蛋白质含量、磨粉品质、面团粉质特性和拉伸特性的变化规律.[结果]重离子辐照对小麦籽粒加工品质产生一定的负效应,随着辐照剂量的增加,连麦12和淮麦20籽粒总蛋白及各蛋白组分含量均明显降低,以总蛋白和谷蛋白含量下降较明显,同时湿面筋含量、容重、沉降值、硬度、粉质参数和拉伸参数也不断降低,在90 Gy辐照剂量下,小麦加工品质指标均降至最低值,连麦12和淮麦20籽粒总蛋白含量、湿面筋含量、稳定时间和拉伸面积分别为13.49%、31.1%、6.8 min、61 cm2和13.19%、28.1%、3.9 min、25 cm2.重离子辐照对小麦品质的影响在2个品种间存在一定差异,30 Gy辐照剂量下,连麦12籽粒总蛋白含量降幅为2.14%,高于淮麦20(1.43%),而磨粉品质降幅小于淮麦20;当辐照剂量增至60 Gy,连麦12籽粒总蛋白含量和磨粉品质较淮麦20下降明显.在30~90 Gy辐照剂量下,淮麦20面团粉质参数和拉伸参数降幅均高于连麦12,其中在90 Gy辐照剂量下,淮麦20面团吸水率、稳定时间、粉质质量指数、最大拉伸阻力、拉伸面积和延伸性降幅分别达5.18%、30.36%、44.29%、35.51%、45.65%和26.53%.[结论]重离子辐照对小麦诱变群体籽粒品质存在一定的负效应,且随辐照剂量的增加,负效应越大,低剂量重离子辐照对淮麦20磨粉品质影响较大,而中高剂量重离子辐照对连麦12磨粉品质影响较大,淮麦20面团流变学特性对重离子的敏感度相对较高.
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早熟砂梨‘苏翠1号’与其亲本‘翠冠’‘华酥’成熟果实差异代谢产物及差异基因比较分析
《园艺学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：‘苏翠1号’梨因其极早熟、汁多味甜、肉质细脆而深受广大消费者喜欢。为了解‘苏翠1号’成熟果实主要代谢产物及代谢通路相关基因表达情况，探究其果实优异性状形成的物质和分子基础，对‘苏翠1号’及其亲本‘翠冠’和‘华酥’成熟果实样本进行代谢组和转录组测序分析。代谢组分析发现，3个品种间，前25个差异代谢产物主要包括有机酸、碳水化合物、氨基酸、甘油磷酸脂、脂肪酸和绿原酸。HPLC测定表明，蔗糖含量在‘苏翠1号’中最高，葡萄糖含量在‘翠冠’中最高，果糖含量在‘苏翠1号’和‘翠冠’中相似，略高于‘华酥’，山梨醇含量在‘苏翠1号’和‘华酥’中均显著低于‘翠冠’；苹果酸含量在‘苏翠1号’中最高，柠檬酸含量在‘华酥’中最高，‘苏翠1号’和‘华酥’总酸含量相近，均高于‘翠冠’。氨基酸含量分析表明，‘苏翠1号’的氨基酸总含量及天冬氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸含量显著高于‘翠冠’和‘华酥’。转录组GO和KEGG分析表明，相较于‘翠冠’和‘华酥’，‘苏翠1号’有机底物分解过程、脂质代谢、有机酸生物合成、羧酸生物合成、多糖代谢等生物学过程及代谢途径显著富集。进一步挖掘差异基因发现，糖代谢中的SPS、山梨醇代谢中的S6PDH、SDH,TCA循环中的FUM1、ICDH、PDH、OGDHL，氨基酸代谢途径中的GAT、GLSN、LASPO、SAMS，以及脂肪酸代谢中的DGK1、ACCA、KASC2、ADH、PLDA等基因在‘苏翠1号’中显著高表达。这些基因可能与‘苏翠1号’更活跃的蔗糖、山梨醇、氨基酸、甘油磷酯代谢及TCA循环有关。
关键词： 砂梨 果实品质 差异代谢产物 差异基因 qRT-PCR
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超高温预处理对畜禽粪便持水特征和后续堆肥腐熟进程的影响
《生态与农村环境学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为探讨超高温预处理对畜禽粪便持水特征及后续堆肥腐熟进程的影响机制，以常规堆肥为对照，采用干燥法测定不同时间（2、4和6 h）高温（90℃）预处理后鸡粪和猪粪的水分分布特征，并对后续堆肥过程的脱水率和腐熟周期进行监测。结果表明：经过不同时间高温预处理后，猪粪和鸡粪中结合水（毛细管水+吸附水+内部结合水）含量均显著（P<0.05）低于对照。其中，猪粪和鸡粪经过高温预处理4 h的毛细管水占结合水的比例分别为72.0%和68.0%,显著（P<0.05）高于各自对照，而吸附水占结合水的比例分别为25.9%和30.9%,显著（P<0.05）低于各自对照。与对照相比，超高温预处理4 h可使后续堆肥过程提前升温、提高堆体温度并延长高温期，种子发芽指数达到80.1%。此外，经超高温预处理，后续堆肥的脱水率显著（P<0.05）高于对照，且脱水率与种子发芽指数呈极显著（P<0.01）正相关。因此，超高温预处理促进了畜禽粪便中高结合能形态水分向低结合能形态水分的转化，有助于提升后续堆肥过程的脱水效率，有利于缩短堆肥腐熟时间，为畜禽粪便的脱水技术研究提供新的方法和思路。
关键词： 超高温预处理 畜禽粪便堆肥 水分特征 脱水效率 腐熟效果
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芽胞杆菌工程菌株B9BD产表面活性素发酵培养基优化
《中国生物防治学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：生物农药“纹曲宁”的主要活性成分—枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis Bs916可产生多种脂肽类抗生素。前期研究发现，degU和bmyA基因的突变株B9?degU?bmyA（B9BD）可以高效合成表面活性素（Surfactin）。本研究通过对培养基主要成分的单因素筛选并利用Design expert软件优化了工程菌株B9BD高效发酵产生Surfactin的培养基组分。通过Plackett-Burman试验、中心组合试验（CCD）和响应曲面法（RSM）优化了发酵Surfactin的最优培养基配方：葡萄糖24.27 g/L，黄豆粉29.05 g/L，牛肉浸膏3 g/L,NH4NO3 4 g/L,L-亮氨酸2.36 g/L,KH2PO4 3 g/L,Na Cl 3 g/L,Fe SO4 0.02 g/L。在优化培养基中，B9BD产生Surfactin的量高达到（934.25±32.67）mg/L，是其在LB培养基产量的5.6倍。以上研究结果将为Surfactin的高效发酵和应用提供理论基础和技术支撑。
关键词： 枯草芽胞杆菌 表面活性素 Plackett-Burman试验 中心组合试验 响应曲面法
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非洲猪瘟病毒P30蛋白单克隆抗体制备、鉴定及阻断ELISA方法的建立
《中国农业科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[背景]非洲猪瘟(ASF)于2018年8月在中国首次出现,对养猪业造成了巨大危害,损失惨重.目前尚无安全有效的疫苗用来预防ASF,于是建立快速特异的检测方法对于防控ASF提供了有效的手段.[目的]制备非洲猪瘟病毒(ASFV)特异性单克隆抗体,建立ASF快速特异性的检测方法.为ASF的检测和防控提供借鉴技术手段.[方法]构建表达载体pET-28a-P30,通过原核表达系统获得ASFV P30重组蛋白,以纯化的P30蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,经过细胞融合和细胞亚克隆制备出ASFV P30蛋白特异性杂交瘤细胞株;对P30蛋白进行截短表达,利用Western Blot和间接酶联免疫吸附试验(iELISA)鉴定单克隆抗体所对应的抗原表位;并利用制备的单克隆抗体建立非洲猪瘟阻断ELISA抗体检测方法.[结果]通过双酶切和PCR验证,结果显示构建出重组载体pET-28a-P30,经测序其序列未发生突变;IPTG诱导后,P30重组蛋白主要表达在包涵体中,分子量约为33 kD.纯化的P30蛋白与弗氏佐剂1:1混合免疫小鼠,3次免疫后,小鼠血清效价达到1:102 400,说明表达的蛋白具有良好的免疫原性.经细胞融合和亚克隆,获得8株P30蛋白特异性杂交瘤细胞,Western Blot和间接免疫荧光试验(IFA)检测获得的8株单抗均具有良好的反应性.叠加试验显示8株单克隆抗体均针对相同的抗原位点;截短表达P30蛋白不同片段,选取制备的2-12B单克隆抗体与不同的截短P30蛋白反应,显示单克隆抗体的抗原表位区为187-194aa.利用2-12B单克隆抗体并经过条件优化,成功建立了 ASF阻断ELISA抗体检测方法,检测了 190份临床样品,并与商品化非洲猪瘟ELISA抗体检测试剂盒进行对比,两方法阳性符合率为90.91%,总符合率为96.32%.[结论]本研究成功获得ASFV P30蛋白,经过iELISA、Western Blot和IFA筛选出反应性良好的特异性单克隆抗体8株,抗原识别表位区为187-194aa.并利用制备的单克隆抗体建立了特异性高,敏感性好的ASFV阻断ELISA抗体检测方法,为ASF的检测及其防控提供了手段和支撑.
关键词： 非洲猪瘟病毒 P30蛋白 单克隆抗体 抗原表位 阻断ELISA
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2种鹅星状病毒一步法双重RT-PCR检测方法的建立与应用
《江苏农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为建立能同时快速鉴别新型鹅星状病毒和鹅星状病毒变异株的检测方法，根据新型鹅星状病毒的ORF2基因和鹅星状病毒变异株的ORF1a基因的保守区域序列，设计并合成2对特异性引物。通过优化反应体系及反应条件，建立了能同时检测2种鹅星状病毒的一步法双重RT-PCR检测方法。该方法可同时扩增出新型鹅星状病毒658 bp和鹅星状病毒变异株381 bp的特异性条带，对坦布苏病毒、鹅细小病毒、鹅副黏病毒、H9N2亚型禽流感病毒、大肠杆菌和沙门菌的扩增结果均为阴性，具有良好的特异性。对新型鹅星状病毒和鹅星状病毒变异株重组质粒的最低检测量分别是1μl 1.71×10~3拷贝和1μl 1.70×10~3拷贝，敏感性良好，并且具有良好的重复性。应用该方法对临床采集的雏鹅泄殖腔拭子进行检测，结果显示，124份样品中新型鹅星状病毒阳性率为45.16%,鹅星状病毒变异株阳性率为28.23%,2种鹅星状病毒均为阳性的占11.29%,与单一RT-PCR方法检测结果符合率为100.00%。本研究建立的一步法双重RT-PCR检测方法快速简便，特异性强、灵敏度高，可用于临床样品的鉴别诊断，该方法的建立对2种鹅星状病毒病的流行病学调查和有效防控以及混合感染的致病性研究具有重要意义。
关键词： 新型鹅星状病毒 鹅星状病毒变异株 一步法双重RT-PCR
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樟树加工剩余物育苗容器对黄瓜幼苗生长及生理特征的影响
《中国农学通报 》 2022 CSCD
摘要：为明确以樟树加工剩余物为原料制备的育苗容器对黄瓜幼苗生长及生理特征的影响,通过分析3种不同原材料制备育苗容器[未提取精油加工剩余物(TF-A)、提取精油后的加工剩余物(TF-B)和1:1共混物料(TF-C)]的理化特征、生物可降解性,测定育苗容器吸水特性变化与养分释放规律,以及对黄瓜种子发芽、幼苗生长生理指标及形貌结构的影响.结果表明,吸附平衡前,吸水率、吸水厚度膨胀率与浸渍时间呈线性相关(R2>0.8521),疏水性TF-A>TF-C>TF-B.育苗期间,容器总氮释放量最高达50.23%,总磷释放速率略低于总钾,有机碳矿化率差异不显著.与塑料容器(CK)相比,TF-B发芽率达74.81%,育苗容器发芽率最高达94%,无显著差异;TF-C茎基宽、叶绿素、地上鲜重、地下鲜重、地上干重和地下干重分别提高4.59%、12.18%、3.01%、6.80%、2.86%和15.79%,壮苗指数提高23.64%.总体上,樟树加工剩余物育苗容器对黄瓜幼苗生长表现出良好的育苗特性,与塑料容器育苗无显著差异.研究表明,以樟树加工剩余物作为基质载体在苗床育苗中具有较好的应用潜力,拓展了其剩余物资源高值加工利用途径.
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江苏省小麦参试品种(系)产量与产量构成因素分析
《中国农学通报 》 2022 CSCD
摘要：旨在明确江苏淮南和淮北麦区小麦产量构成因素对产量影响的相对重要性,采用相关和通径分析法,对江苏省2019-2020年度预备试验101个小麦品种(系)的产量及其构成因素进行分析.结果 表明,淮南和淮北小麦品种(系)的平均产量分别为7739.1 kg/hm2和8560.3 kg/hm2.相关分析表明,淮南小麦产量构成因素与产量均呈正相关,其中千粒重与产量呈极显著正相关;淮北小麦穗数与产量呈极显著正相关,穗粒数与产量呈显著负相关,千粒重与产量呈不显著正相关.偏相关分析表明,产量三因素与产量均呈极显著正相关,而三因素间均呈极显著负相关.通径分析表明,淮南以千粒重对产量的作用最大,淮北以穗数对产量的贡献最大.淮南小麦高产育种策略应重视稳重型品种选择,而淮北则应加强多穗型品种选择.
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江苏省域草莓灰霉病菌种群多药剂抗性检测
《中国农学通报 》 2022 CSCD
摘要：本研究旨在阐明江苏省草莓主产区草莓灰霉病菌种群对常用杀菌剂的敏感性.采用区分剂量法测定了 2019和2020年采集的236株草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea)对13种杀菌剂的抗性,并对菌株抗性频率和多药剂抗性进行了分析.结果表明:所有灰霉菌株对咯菌腈(fludioxonil,Flu)表现敏感,而对多菌灵(carbendazim,Car)、吡唑醚菌酯(pyraclostrobin,Pyra)、扑海因(iprodione,Ipr)、腐霉利(procymidone,Pro)、嘧霉胺(pyrimethanil,Pyr)产生了较高的抗药性,其抗性频率分别为58.05%、55.01%、51.44%、45.80%、33.94%;灰霉病菌种群在地区间对不同药剂的抗药性水平不同,溧水、昆山、姜堰、铜山田间以抗性菌株为优势种群,无锡和常州新北地区以敏感菌株为主;本研究在区分计量浓度下,根据各药剂抑菌率分布状况,将供试药剂分为敏感药剂、敏感性下降药剂和抗性药剂3种类型;本研究共检测到9种抗药性类型:PyraR(7.32%)、CarR(6.50%)、PyrR(0.81%)、CarR PyrR(3.25%)、CarRPyraR(14.63%)、CarRBosR(1.63%)、CarRPyraRPyrR(23.58%)、CarRBosRPyraR(7.31%)、CarRBosRPyraRPyrR(34.15%).江苏省草莓灰霉病菌种群对多菌灵和吡唑醚菌酯基本丧失了敏感性,对扑海因、腐霉利、啶酰菌胺、戊唑醇等敏感性下降,多药剂抗药性种群以CarRPyraRPyrR和CarRBosRPyraR PyrR为主,抗性治理措施中推荐使用不同类型药剂交替防治灰霉病.
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