科研产出
深绿木霉TA-9分生孢子固体发酵的响应曲面法优化
《农药学学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：前期研究中分离获得深绿木霉Trichoderma atroviride菌株TA-9,其在田间试验中具有较好生物防治效果.本研究通过Plackett-Burman试验设计及Box-Behnken设计-响应曲面法(response surface methodology,RSM)对影响深绿木霉TA-9菌株发酵的培养基和培养条件进行了优化.结果表明,固体发酵培养基3个主要影响因子分别为蔗糖、硫酸铵和磷酸二氢钾;培养条件中3个主要影响因子为培养温度、接种浓度和含水率.优化后的发酵培养基组成(质量分数)为:麦麸30%、谷壳20%、蔗糖24.65%,硫酸铵0.88%,磷酸二氢钾0.88%、黄豆粉1%,混合矿物质0.5%,酶水解酪蛋白0.3%.优化后的培养条件为:接种浓度每克基质含5.2×105个孢子,含水率48.1%,种子液菌龄6 d,24.1℃ 光照培养,接种60 h后搅拌,随后静置发酵至8 d.在此优化条件下发酵获得深绿木霉菌株TA-9的分生孢子产量为每克培养基含2.44×1010个孢子,略高于预测最高产量(每克培养基含2.24×1010个孢子).
关键词： 深绿木霉;分生孢子;固体发酵;响应曲面法
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减库对大豆叶片碳代谢的影响
《作物学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：植物的碳代谢过程与植株生长和产量形成密切相关,是受源库关系影响最明显的生理过程之一.研究减库对大豆叶片碳代谢的影响,可为明确源库关系失衡导致的减产机理研究提供理论依据.以早熟大豆品种苏豆13为材料,于2019年和2020年在江苏省农业科学院大豆试验站进行池栽试验,在大豆R4期设置减库处理(去除全部豆荚、去掉1/2豆荚和全部种子损伤处理),以正常植株为对照,研究减库对大豆碳代谢的影响.结果表明,减库处理延缓了叶片衰老和脱落,导致叶片持绿.减库处理显著抑制了短期内的净光合速率(Pn),但是未影响初始羧化速率(a).Pn降低主要受气孔限制,随时间延长,光合抑制作用逐渐减弱并转为促进作用,在生育后期,减库处理的叶片仍能保持相对较高的a、蔗糖磷酸合成酶(SPS)、蔗糖合成酶(SuSy)和酸性转化酶(SAI)活性及光合色素、可溶性糖、淀粉、蔗糖和果糖含量,利于维持相对较高的光合性能.减库处理导致更多的光合产物向营养器官分配,茎、叶片和叶柄在一定程度上成为新的库器官,利于生育后期的叶片光合产物输出并保持相对较高的碳代谢水平.去除全部豆荚和种子损伤处理延缓叶片衰老和脱落、光合性能和碳代谢水平降低的作用显著高于去除1/2豆荚.总之,在同等的源条件下,减小库容量可以诱导大豆出现持绿现象,减库程度越大,持绿现象越重,减库处理显著影响大豆叶片碳代谢,虽然短期内抑制了"源"叶片的光合性能,但是生育后期叶片仍能保持相对较高的光合活性和碳代谢关键酶活性利于合成较多的碳水化合物,且刺激茎、叶和叶柄转化为新的库器官.
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甘蓝型油菜黄化复绿突变体S28-y研究
《扬州大学学报(农业与生命科学版) 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：对甘蓝型油菜品种镇油7号衍生系中发现的自然突变叶色黄化材料S28-y进行田间表型、叶绿体超微结构观察、光合色素含量和光合作用参数测定以及叶色遗传分析，探讨甘蓝型油菜叶色黄化突变体叶色变化、光合特性、叶色遗传及黄化复绿进程与温度响应关系。结果表明：S28-y叶色黄化复绿受1对隐性核基因控制；新生叶片叶色黄化显著，随叶片发育逐渐复绿，这种黄化再复绿现象伴随叶片整个生长阶段；复绿进程快慢与温度呈正相关，高温可加快黄化叶复绿，提高叶绿素含量。与野生型相比，突变体S28-y植株矮化，产量相关性状变差，光合色素含量和净光合速率显著降低；黄化叶叶绿体形态发育异常，无完整基粒、基质片层，光合作用减弱。叶绿体结构发育异常引起总叶绿素缺乏是导致突变体S28-y光合效率降低和产量性状变差的主要原因，而适宜温度是加快突变体黄化叶复绿的重要影响因素。
关键词： 甘蓝型油菜 黄化复绿 光合色素含量 叶绿体超微结构 光合特性 温度
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花后低温条件下小麦颖果发育的显微结构观察
《西北植物学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：该研究以春性小麦品种'扬麦15'和半冬性小麦品种'烟农19'为实验材料,在小麦花后6~8 d进行低温处理,对花后不同发育阶段的小麦颖果进行取样,利用树脂切片技术观察了果皮、胚乳和养分运输组织的显微结构,以探明花后低温条件下小麦颖果发育的显微结构特征.结果表明:(1)花后低温延缓了两个小麦品种颖果早期和中期发育过程,推迟了'扬麦15'灌浆期,缩短了'烟农19'的灌浆期,最终降低了两小麦品种的粒重.(2)花后低温减缓了小麦颖果发育早期果皮细胞的凋亡以及中果皮细胞中淀粉体的降解速率.(3)花后低温明显降低了小麦胚乳发育早期和中期淀粉体和蛋白体的积累量,缩短了灌浆时期,降低了胚乳充实度.(4)花后低温条件下小麦颖果韧皮部发育缓慢,筛管分布范围缩小;同时胚乳传递细胞的发育变慢,细胞壁上壁内突数量明显减少.研究发现,花后低温使得两小麦品种颖果早期发育过程延缓,具体表现在果皮的凋亡推迟,贮藏物质积累量减少,养分运输组织变得不发达,胚乳充实度降低,单粒颖果干重下降;同时两小麦品种对低温的响应又存在差异,花后低温下春性小麦颖果灌浆期被延长,半冬性小麦灌浆期被缩短.
关键词： 小麦 低温 淀粉体 蛋白体 养分运输组织 显微结构
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青花菜花蕾转录组测序分析及蜡粉合成相关基因挖掘
《南方农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：【目的】对青花菜花蕾进行转录组测序分析，并挖掘与蜡粉合成相关基因，为探明青花菜花球表面蜡粉形成的分子机制提供理论参考。【方法】分别提取野生型和蜡粉缺失型青花菜花球总RNA，采用Illumina HiSeqTM 2500平台进行转录组测序，获得高质量Clean reads，采用Trinity进行序列组装后获得青花菜Unigene库，将获得的Unigene序列与Nr、Nt、KEGG、Pfam、KOG/COG、Swiss-Prot和GO数据库比对，获得基因功能注释信息；使用DESeq2进行差异表达分析。【结果】共获得44.68 Gb Clean data,De novo组装得到41244条Unigenes,N50长度为1847 bp。从所获得的Unigenes中筛选出8685个差异表达基因（DEGs）（上调基因5747个，下调基因2938个），共有8038个基因被注释到不同数据库，其中，5220个基因注释到Pfam数据库；2066个基因注释到COG数据库，3866个基因注释到KOG数据库；2580个差异表达基因被注释到75个转录因子家族中，注释最多的是MYB家族（235个）；GO数据库中6095个差异表达基因注释到细胞组分、分子功能和生物学过程三大类的52个功能分类；KEGG数据库中，1671个差异表达基因富集到138条代谢通路，其中13个差异表达基因与脂肪酸合成有关，7个差异表达基因与蜡粉生物合成途径有关。【结论】转录因子MYB家族在调控青花菜蜡粉合成中发挥重要作用。蜡粉合成过程中相关酶基因的差异表达是调控青花菜蜡粉合成的关键，尤其是野生型和蜡粉缺失突变体中特异性表达的差异表达基因，可作为后续研究青花菜花球表面蜡粉形成分子机制的对象。
关键词： 青花菜 花蕾 蜡粉缺失突变体 转录组 基因功能注释
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小麦隐性核不育保持系表达载体的构建及拟南芥遗传转化
《麦类作物学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：利用小麦杂种优势能够创制稳定的雄性不育系。相比于细胞质雄性不育系和光温敏雄性不育系,细胞核雄性不育具有育性稳定、易恢复、不受环境影响等特点。小麦隐性核不育基因ms1的克隆以及杂交制种技术（hybrid seed production technology,SPT）的开发,为雄性不育的保持和杂种优势利用奠定了基础。本研究将小麦花粉育性恢复基因Ms1、花粉致死基因ZmAA1、红色荧光蛋白基因DsRed2及其特异性启动子和终止子连接到表达载体pGEII上,转化野生型拟南芥,得到6株转基因拟南芥。通过荧光显微镜观察拟南芥种子,发现野生型拟南芥种子表面平滑,不能发出红色荧光;而转基因种子表面呈现颗粒状,能够发出红色荧光。这说明表达载体构建成功,并能够在拟南芥中成功表达。这为创制人工小麦隐性核不育系奠定了理论和材料基础。
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Pib、Pi9、Pi2、Pi54和 Pish 在粳稻品种(系)中的分布及对穗颈瘟的抗性
《西南农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]探明抗稻瘟病基因Pib、Pi9、Pi2、Pi54和Pish在粳稻品种(系)中的分布情况及不同基因型对稻瘟病的抗性水平.[方法]利用该5个基因的分子标记及人工接种稻瘟病的方法对93份材料进行研究.[结果]包含3个、2个和1个抗性基因的材料分别为19份(占20.4%)、25份(占26.9%)和28份(占30.1%),但这5个抗性基因在93份材料中均有分布.携带抗性基因Pib、Pi9、Pi2、Pi54和 Pish 的材料分别为49份(52.7%)、16份(17.2%)、8份(8.6%)、31 份(33.3%)、31 份(33.3%),抗性基因Pib的检出率最高;抗性较好的6个基因型或基因组合分别是Pi9、Pi54、Pib+Pi9、Pib+Pi2、Pib+Pish和Pi9+Pi54,但检出率均很低.[结论]本研究进行的抗稻瘟病基因检测和抗病性评价结果为稻瘟病抗性育种提供了可靠的理论依据.
关键词： 水稻;稻瘟病;抗性基因;分子标记
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苋菜AtrADH2基因克隆及表达分析
《中国农业大学学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：ADH基因在甜菜色素合成酪过程氨酸途径中发挥着重要作用,为探究苋菜酪氨酸途径的关键基因AtrADH2在苋菜中的功能,本研究以'苏苋1号''苏苋2号'苋菜品种为试验材料,利用RT-PCR技术等研究方法克隆获得1个AtrADH2基因(GenBank登录号:MT982371).结果表明:1)苋菜AtrADH2基因的ORF长为1 197 bp,编码398个氨基酸;2)AtrADH2蛋白属于NADB_Rossmann超级家族,含有1个NADB保守结构域;3)系统进化树分析表明,AtrADH2蛋白与甜菜BvADHα蛋白亲缘关系最近;4)'苏苋1号'中甜菜色素含量受到光周期的影响;与其它组织部位相比,叶中的甜菜色素含量最高;与幼苗期相比,开花期叶和茎的甜菜色素含量均有所下降;5)qRT-PCR分析表明,AtrADH2基因表达趋势与AtrCYP76AD1、AtrDODA和AtrMYB1基因表达趋势相反.综上,AtrADH2基因可能对苋菜甜菜色素合成具有负调控作用,为进一步研究AtrADH2基因的功能提供了参考依据.
关键词： 苋菜;AtrADH2基因;甜菜色素;光周期;表达分析
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灭菌唑与氰烯菌酯复配对水稻恶苗病菌的抑制活性
《农药学学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：采用菌丝生长速率法,测定了灭菌唑对水稻恶苗病菌的毒力,测得灭菌唑对10株水稻恶苗病菌的EC50值范围为0.0664~0.766 1 μg/mL.采用有效成分质量浓度分别为60、120和240μg/mL的25g/L灭菌唑种子处理悬浮剂处理水稻种子后,对水稻发芽率、株高、鲜重均无影响.表明灭菌唑对水稻恶苗病菌具有较好的抑制活性,且对水稻安全,可用于水稻恶苗病的化学防控.氰烯菌酯对10株水稻恶苗病菌的EC50值范围为0.0076~0.2629 μg/mL.将氰烯菌酯和灭菌唑分别按质量比4∶1、3∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶3和1∶4复配,测定了复配药剂对水稻恶苗病菌的联合毒力,所得增效系数在0.5~1.5之间,均为相加作用.研究表明,将氰烯菌酯与灭菌唑复配后施用,不仅能显著降低单剂的使用剂量,且能降低氰烯菌酯对病原菌群体的选择压力,延缓抗药性的发生和发展速度,保障病害防效和水稻生产安全.
关键词： 水稻恶苗病菌 灭菌唑 氰烯菌酯 联合毒力 安全 增效系数
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胞内劳森氏菌间接ELISA抗体检测方法的建立及应用
《中国预防兽医学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为建立胞内劳森氏菌(LI)抗体的间接ELISA检测方法,本研究构建了含有LI外膜蛋白基因的重组质粒pET32-LI1022并进行原核表达.结果显示LI1022基因在BL21(DE3)宿主菌内以可溶性表达重组LI1022蛋白(rLI1022),western blot结果显示rLI1022具有较好的反应原性,可作为建立间接ELISA检测方法的包被抗原.进一步经Ni柱纯化获得纯化rLI1102,以其为包被抗原,对ELISA条件进行优化,结果显示纯化的rLI1022以4.69 ng/孔4℃过夜包被最佳;血清最佳反应条件为1∶100稀释,37℃作用1h;羊抗猪IgG-HRP最佳反应条件为1∶10 000稀释,37℃作用1h;25℃TMB底物显色15 min.对建立的间接ELISA方法的特异性、敏感性、重复性进行分析,结果显示包被抗原与PRRSV、PRV、FMDV、PEDV等阳性血清均无交叉反应,仅可特异性检测LI抗体;当LI阳性血清稀释倍数为1∶400时仍为阳性,表明该方法敏感性较好;批内、批间重复性试验变异系数均小于10%.与国外商品化ELISA检测试剂盒对比,二者的符合率达94.44%;利用所建立的间接ELISA方法对江苏部分地区319份临床猪血清样品进行检测,其中LI阳性检出率为87.77%,表明LI在江苏猪群中普遍存在.本研究首次建立了检测LI的间接ELISA方法,为临床LI血清流行病学调查提供了可行技术手段.
关键词： 胞内劳森氏菌 间接ELISA 抗体检测 LI1022重组蛋白
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