大棚菜用大豆—水芹水旱轮作栽培技术

张红梅; 顾和平; 曹庆穗; 褚芳; 陈华涛; 崔晓艳; 袁星星; 陈新; 《中国蔬菜 》 2014 北大核心

摘要：江苏省菜用大豆栽培面积5.3万hm2(79.5万亩)左右,早春在塑料大棚内种植菜用大豆,之后接茬种植夏豇豆或者菜用大豆,常年豆类蔬菜连作导致土壤连作障碍发生。为解决这一问题,江苏省农业科学院蔬菜研究所利用早春菜用大豆7月收获后直至翌年4月的空闲时段,探索栽培水芹的可行性,通过保护地的水旱轮作,较好地解决了大棚豆类生产中的连作障碍,土壤得到了有效修复,并充分利用了地力,单位面积的产量和效益明显提高,

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耐低钾和钾高效型甘薯品种(系)的筛选及评价指标

唐忠厚; 张允刚; 魏猛; 陈晓光; 史新敏; 张爱君; 李洪民; 丁艳锋; 《作物学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：甘薯植株生长和块根形成与钾营养吸收利用密切相关。本研究以31份不同类型优质甘薯品种(系)为材料,利用长期肥料定位试验田2个钾肥水平处理(氮磷处理与氮磷钾处理),探讨耐低钾与钾高效型甘薯材料的筛选及评价指标。`结果表明,该试验条件下,不同甘薯品种(系)块根产量差异达显著水平(P<0.05);供试材料的钾敏感指数变幅在0.40～0.98之间,差异达显著水平(P<0.05),经聚类分析,可分为低敏感型、适度敏感型、敏感型和高度敏感型;品种(系)两处理下钾累计量与钾浓度差异均达显著或极显著水平;氮磷钾处理下,块根钾利用效率与整株钾利用效率变幅分别为58.92～384.9 g g–1和42.03～165.52 g g–1,品种(系)差异均达显著水平(P<0.05);相关性分析显示,不同甘薯材料间整株总钾累积量、钾浓度、产量性状指标、钾利用效率与钾敏感性间均有一定相关性。长期肥料定位试验田可用于不同钾营养效率甘薯品种(系)的筛选,块根钾利用效率与钾敏感性可作为筛选耐低钾与钾高效利用型甘薯材料的2个主要指标。

关键词： 甘薯品种(系) 耐低钾 钾高效 筛选

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抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备

祭芳; 曹欢; 徐剑宏; 史建荣; 《江苏农业学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：为建立快速、简单、灵敏、有效的玉米赤霉烯酮的检测方法,将玉米赤霉烯酮与羧甲氧基胺半盐酸盐反应,合成半抗原ZEN-oxime,通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备玉米赤霉烯酮人工抗原,以人工抗原ZENBSA免疫BALB/C小鼠,取该鼠脾细胞与SP 2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和克隆,得到了1株能稳定分泌抗玉米赤霉烯酮抗体的单克隆细胞株3D10。3D10的抗体类型及亚类均为IgM,其轻链为Kappa链。制备的单克隆抗体腹水通过间接酶联免疫吸附测定,效价在1×10-6以上。该单克隆抗体对玉米赤霉烯酮的IC50为225 ng/ml,除与玉米赤霉烯酮结构类似物有一定的交叉反应外,与其他参试真菌毒素均无交叉反应。所制备的单克隆抗体可用于玉米赤霉烯酮毒素初筛和定性检测。

关键词： 玉米赤霉烯酮 单克隆抗体 酶联免疫吸附法

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紫外线照射对鲜切鸡毛菜品质的影响

闫帅; 刘贤金; 梁颖; 寇莉萍; 《江苏农业学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：用短波紫外线(UV-C)分别照射鲜切鸡毛菜0 min、3 min、6 min、9 min,定期测定鸡毛菜失重率、黄化指数、叶绿素含量、可溶性蛋白含量、维生素C含量、可溶性糖含量、过氧化物酶(POD)活性以及细菌菌落总数,研究紫外线照射对鲜切鸡毛菜品质的影响。结果表明:紫外线照射鸡毛菜9 min,可使4℃下贮藏时间由6 d延长至10~12 d;与对照相比,贮藏末期失重率、黄化指数降低,维生素C含量、可溶性糖含量、POD活性提高,可溶性蛋白含量无明显影响;菌落总数未超过1×105CFU/g,符合鲜切菜的卫生要求。UV-C处理对鲜切鸡毛菜具有较好的保鲜效果。

关键词： 紫外线 鲜切鸡毛菜 品质

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适于解淀粉芽孢杆菌BGP20菌体生长的培养基响应面优化

赵延存; 李鹏霞; 黄开红; 王毓宁; 孙娅; 胡花丽; 《食品科学 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：为获得解淀粉芽孢杆菌BGP20的低成本高效菌体生长培养基配方,利用响应面试验设计和摇瓶发酵对培养基各组分进行优化。根据单因素试验和Plackett-Burman设计试验结果确定了豆粕和玉米淀粉为主要因素。以发酵培养液菌体密度为响应值,利用Design-Expert软件的中心组合试验设计进行优化,并对预测值进行验证。结果表明:回归方程具有很好的拟合性,培养基最优配比为豆粕16.03 g/L、玉米淀粉6.30 g/L、MgSO4·7H2O 0.75 g/L、NaCl1.25 g/L、KH2PO40.75 g/L、痕量元素15 mL/L,获得BGP20发酵液菌体密度为1.86×109 CFU/mL,模型预测最高值为1.985×109 CFU/mL,验证实验结果为预测值的93.72%,说明该模型对实际生产具有指导意义。

关键词： 解淀粉芽孢杆菌 发酵培养基 菌体密度 响应面设计 回归模型

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引发小麦赤霉病和茎基腐病禾谷镰孢菌的生物防治初探

王路遥; 王超; 申成美; 陈怀谷; 郭坚华; 《麦类作物学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)是小麦上的重要病原真菌。通过致病性测定从江苏小麦茎基腐病病害样本分离菌中筛选到了对小麦赤霉病和茎基腐病都有强致病力的F.graminearum菌株GF1117。为了对F.graminearum进行生物防治,利用稀释涂布平板法和平板对峙法从小麦不同生境中分离筛选到35株对GF1117具有明显拮抗效果的细菌菌株,分别在田间和温室进行了小麦赤霉病和茎基腐病的生物防治试验。结果表明,35株拮抗细菌对小麦赤霉病均有一定的防治效果,且在小麦感病品种和中抗品种上对茎基腐病的防效不同;菌株1-8对两种病害的防效都在45%以上。

关键词： 禾谷镰孢菌 赤霉病 镰孢菌茎基腐病 拮抗细菌 防治效果

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不同平菇菌糠施用量对辣椒长势及生理指标的影响

侯立娟; 姚方杰; 《浙江农业学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：以线辣椒‘8819’为试验材料,以菌糠为有机肥,采用5个不同施用量梯度,研究其对辣椒株高、茎粗、土壤微生物数量、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性、叶绿素和丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明:除对照外,施用菌糠的各处理均能促进辣椒的长势,以菌糠施用量为800 kg·667 m-2时对茎粗的生长促进作用最为显著;不同菌糠施用量对不同生长阶段辣椒叶绿素含量的影响不同,与对照相比,施用菌糠的各处理均能显著提高叶绿素的含量,综合整个生长阶段,菌糠施用量为800 kg·667m-2时比其他处理提高幅度为1.0%~29.2%;施用菌糠的各处理均能增加土壤中细菌、放线菌和真菌的数量,提高土壤的肥力,进而促进辣椒的生长;不同菌糠施用量对保护酶系的影响表明,施用菌糠的各处理均能不同程度降低POD和CAT活性,但下降程度与菌糠的施用量不呈线性关系;除处理A外,其他处理均能显著降低MDA含量;本试验证明,适宜的菌糠施用量(400~1 600 kg·667 m-2)可以提高辣椒的光合作用并提高辣椒的抗逆能力。综合各检测指标,建议在生产上选用的菌糠施用量为800 kg·667m-2。

关键词： 菌糠 辣椒 叶绿素 土壤微生物 过氧化物酶 过氧化氢酶 丙二醛

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芋头软腐病拮抗菌的筛选及生防效果研究

赵江涛; 赵延存; 黄开红; 李鹏霞; 王毓宁; 胡花丽; 《食品科学 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：分别从蔬菜田土壤和采后芋头表面黏附土壤中分离纯化到267和244株菌株,通过平板拮抗实验,发现其中6个菌株对胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora subsp.carotovora,Ecc)产生了清晰且明显的拮抗圈(直径>10 mm)。利用芋头对它们的生物防控效果进行复筛,结果发现BGP14菌株发酵液处理芋头的发病率仅为6.7%,显著低于其他5个菌株(P<0.05)。根据BGP14的形态学特征、芽孢产生及16S rRNA和gyrB基因的部分核酸序列,该菌株被鉴定为解淀粉芽孢杆菌BGP14(Bacillus amyloliquefaciens)。BGP14在芋头伤口上具有较强的定殖能力,并将病原菌Ecc的群体数量压制在一个较低水平。BGP14与病原菌Ecc联合处理芋头的苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)活性显著高于其他处理。以上结果表明,解淀粉芽孢杆菌BGP14对病原菌E.carotovora具有强大的拮抗活性,能够有效防治贮藏期芋头软腐病,具有潜在的应用开发前景。

关键词： 胡萝卜软腐欧文氏菌 解淀粉芽孢杆菌 进化树 群体动态 系统诱导抗病性

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草甘膦诱导抗草甘膦棉花花药中激素和游离氨基酸含量的变化

刘吉焘; 狄佳春; 陈旭升; 《分子植物育种 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：转基因抗草甘膦棉花喷施草甘膦可引起花药败育,但关于草甘膦诱导抗草甘膦棉花花药败育过程中的生化变化尚未见报道。本文以转基因抗草甘膦棉花新品系N95为试验材料,用0.2%草甘膦喷洒棉株为处理,以不喷为对照。试验结果表明:(1)草甘膦处理的植株其花粉活力很低,平均只有3%;而未经处理的植株花粉活力则平均高达86%,两者差异达极显著水平,显示抗草甘膦棉花喷施草甘膦后,可导致其花粉雄性不育。(2)分期取样,测定花粉4个发育时期内源激素含量,结果显示处理株花药中生长素含量始终低于对照,平均只有对照株中的43.8%~64.3%;脱落酸的含量始终高于对照,平均为对照株含量的1.33~1.87倍;玉米素的含量始终低于对照,平均只有对照株的39.6%~57.1%;赤霉素含量也始终低于对照,平均只有对照株的50.5%~64.9%。(3)处理株与对照株花药中氨基酸含量的检测结果发现:苯丙氨酸极显著低于对照,赖氨酸、组氨酸、缬氨酸和蛋氨酸的含量显著低于对照,谷氨酸含量则显著高于对照。根据以上研究结果推断:花药中生长素的降低、脱落酸的增加、细胞分裂素及赤霉素含量的不足是导致花药败育的基本生化因子。另外,苯丙氨酸含量极显著偏低,赖氨酸、组氨酸、缬氨酸的含量显著偏低以及谷氨酸含量显著偏高,也与棉花花药的败育存在不同程度的关联。

关键词： 转基因棉花 抗草甘膦 花药败育 激素 氨基酸

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基于磁珠和双抗夹心免疫分析的Bt Cry1Ac毒素单链抗体筛选与鉴定

张留圈; 张霄; 刘媛; 徐重新; 张存政; 谢雅晶; 寇莉萍; 刘贤金; 《中国农业科学 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：【目的】通过设计并优化生物素-亲和素标记磁珠筛选策略,建立针对Cry1Ac毒素的新型双抗夹心ELISA检测方法,为研究灵敏、快速的Bt毒素的检测方法建立一种新的检测模式。【方法】采用磁珠液相正负筛选方法,经过4轮筛选后,对每轮筛选后抗Cry1Ac毒素特异性结合噬菌体抗体的富集效果进行鉴定,通过单克隆ELISA方法从第4轮筛选得到的次级库中获得特异性结合Cry1Ac的阳性克隆,并对其进行PCR鉴定和DNA测序,确定有完整插入的scFv片段后进行后期相关试验。将相对结合活性最好的阳性克隆scFv-A12替换宿主菌HB2151中进行可溶性诱导表达并纯化。利用纯化后的scFv-A12作为"捕获抗体",Anti-Cry1Ac兔多克隆抗体作为"检测抗体",建立针对Cry1Ac的双抗夹心ELISA检测方法。【结果】以生物素化的Cry1Ac蛋白为包被原,利用噬菌体抗体库对其进行了4轮液相筛选。结果显示,相对产出率随着筛选轮数的增加而提高,第4轮较第1轮提高了42倍;单克隆噬菌体ELISA鉴定抗Cry1Ac噬菌体抗体,以试验孔OD450/阴性孔OD450大于2.1为阳性标准,从第4轮筛选后的培养皿中随机挑选了300个菌落,经单克隆ELISA鉴定出6个阳性克隆,分别命名为hsCry1Ac-C5、hsCry1Ac-D8、hsCry1Ac-C12、hsCry1Ac-A12、hsCry1Ac-F9和hsCry1Ac-F4。其中,hsCry1Ac-A12具有相对较高的亲和力。对上述6个阳性克隆进行菌液PCR检测发现,在935 bp处均有明显的目的条带,通过对其进行测序和氨基酸序列比对,最终得到4株不同氨基酸序列的阳性克隆。hsCry1Ac-A12在成功替换宿主菌HB2151后,经1 mmol·L-1 IPTG诱导表达,于30℃条件下培养过夜。其表达产物经His Trap HP镍亲和柱纯化后SDS-PAGE检测,hsCry1Ac-A12蛋白分子量约为30 kD。通过方阵滴定对抗体浓度进行优化后,利用单链抗体为"捕获抗体",多抗为"检测抗体",建立了Cry1Ac双抗夹心ELISA检测方法。在1.25—2.43μg·mL-1线性检测范围内,线性回归方程为Y=0.2522X+1.2832(R2=0.9564),检测限为1.08 ng·mL-1。【结论】利用磁珠液相筛选方法,建立了针对Cry1Ac毒素的双抗夹心ELISA检测方法,为快速、准确检测转基因食品中Cry1Ac提供了一种新的检测模式。

关键词： 磁珠 Cry1Ac毒素 单链抗体 双抗夹心ELISA

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