科研产出
浙江省部分地区肉鸡和蛋鸡的粪便菌群结构差异分析
《家畜生态学报 》 2022 北大核心
摘要：为探究蛋鸡和肉鸡粪便中微生物的差异性,本试验采用高通量测序的方法,对浙江省部分地区蛋鸡和肉鸡53份粪便样品的16 S rDNA的V3-V4区进行菌群结构研究,在门和属水平上进行了菌群α多样性对比分析及组间差异对比分析.结果表明:微生物群落组成分析显示,在门水平上,厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacte-roidetes)为此次样品中的主要优势菌群;在属水平上,主要优势菌群为埃希氏菌-志贺氏菌(Escherichia-Shigella)、消化链球菌(Peptostreptococcus)、螺杆菌(Helicobacter)和拟杆菌(Bacteroides).α多样性结果表明,蛋鸡粪便的菌群多样性大于肉鸡.在门水平上,变形菌门、梭杆菌门(Fusobacterium)、互养菌门(Synergistetes)、黏胶球形菌门(Lentisphaerae),在属水平上,埃希氏菌-志贺氏菌、螺杆菌属的相对丰度在两组样品之间的差异极显著(P<0.01).说明基于16S rDNA扩增子测序对蛋鸡和肉鸡粪便的微生物菌群进行对比分析,结合饲养环境和饲养方式等因素,可以阐释蛋鸡和肉鸡粪便菌群的差异性.
关键词： 肉鸡 蛋鸡 粪便 高通量测序 菌群结构 16 S核糖体DNA
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番茄枯萎病菌和颈腐根腐病菌KASP-SNP检测技术的建立
《植物保护学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为快速、准确地对番茄枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.lycopersici(FOL)和番茄颈腐根腐病菌F.oxysporum f.sp.radicis-lycopersici(FORL)进行检测,基于尖孢镰刀菌F.oxysporum多聚半乳糖醛酸外切酶基因pgx4的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,设计FORL、FOL生理小种1(FOL-R1)、2(FOL-R2)和3(FOL-R3)的竞争性等位基因特异性PCR-SNP(kompetitive allele specific PCR-SNP,KASP-SNP)引物,建立番茄颈腐根腐病菌和番茄枯萎病菌KASP-SNP检测技术,并通过与常规PCR比对及ITS与pgx4序列分析对该检测技术的可靠性进行验证.结果显示,在FORL、FOL-R1、FOL-R2和FOL-R3中存在35个变异SNP位点,设计出18对KASP-SNP 引物,筛 选出 FORL KASP、FOLrace1_KASP、FOLrace2_KASP 和 FOLrace3_KASP 共4对分型清晰的引物.KASP-SNP技术对FORL、FOL-R1和FOL-R2的检测阳性率达100.00%,对FOL-R3的检测阳性率为92.68%;常规PCR方法对FOL-R1和FOL-R3的检测阳性率也达100.00%,而对FORL的检测阳性率只有59.09%.表明所建立的KASP-SNP技术可用于FOL-R1、FOL-R2、FOL-R3和FORL的快速、准确检测.
关键词： 番茄 尖孢镰刀菌 KASP-SNP标记 分子鉴定 生理小种
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杨梅核多酚提取优化及体外抗氧化和降血糖活性研究
《食品科技 》 2022 北大核心
摘要：为提高杨梅核的开发利用价值,利用超声辅助法提取杨梅核多酚,采用单因素和响应面方法优化提取条件,并对杨梅核多酚的抗氧化和体外降血糖活性进行研究.结果 表明:杨梅核的最佳提取工艺为:超声功率180 W、乙醇浓度57.4%、提取时间74.7 min、固液比1∶30.6,在此条件下获得的杨梅核多酚的提取量为8.50 mg/g.1,1-二苯基-2-三-硝基苯肼(DPPH)自由基清除试验和羟基自由基清除试验结果表明,杨梅核多酚具有较强的体外抗氧化活性.杨梅核多酚粗提物对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用,其IC50值为78.91 mg/L,优于阿卡波糖的IC50值(238.03 mg/L),表明杨梅核多酚具有很强的体外降血糖活性,可以作为降糖因子进行开发利用.研究结果为杨梅核的高值化利用提供了参考.
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"强桑1号"的叶片、茎段愈伤组织诱导增殖研究
《蚕桑通报 》 2022
摘要：探究不同激素调节剂对"强桑1号"叶片和茎段愈伤组织诱导与增殖的影响,为建立高效、系统的组培快繁体系奠定良好的基础.以"强桑1号"的叶片、茎段为外植体进行愈伤组织的诱导增殖培养.实验结果表明:在单一激素6-苄氨基嘌呤(6-BA)、吲哚丁酸(IBA)和噻苯隆(TDZ)培养基配方中,2.41 mg/L WPM+1.62 mg/L或4.86 mg/L IBA+25 g/L蔗糖+8 g/L琼脂(pH=5.2)培养基中叶片和茎段的愈伤组织诱导效果最好,诱导率为100%;多激素培养基中,2.41 mg/L WPM+0.02 mg/L IBA+0.001 mg/L TDZ+0 mg/L 6-BA或0.075 mg/L 6-BA+25 g/L蔗糖+8 g/L琼脂(pH=5.2)中愈伤组织的诱导率为100%.在2.41 mg/L WPM+4.86 mg/L IBA+25 g/L蔗糖+8 g/L琼脂(pH=5.2)培养基中,叶片和茎段的愈伤组织生根效果最好,诱导率为97.22%.
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甘草甜素对铜绿假单胞菌生物被膜形成的抑制作用
《农业生物技术学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)具有多重耐药特性,生物被膜的形成是其重要的耐药机制之一.甘草甜素(glycyrrhizin,GLY)具有抗菌功效.为了探讨GLY对多重耐药铜绿假单胞菌临床分离株的抗菌活性及生物膜形成的作用效果,本研究从角膜炎病兔(浙江嵊州'白中王'长毛兔)(Leporidae angora)眼分泌物中分离获得铜绿假单胞菌G1株(GenBank No.MZ683158)和G2株(GenBank No.MZ683159),进一步采用微量稀释法测定GLY对G1株和G2株的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),利用结晶紫法定量生物被膜,利用扫描电子显微镜初步观察GLY对铜绿假单胞菌生物被膜形态的影响,采用qPCR方法检测GLY对铜绿假单胞菌生物被膜合成相关调控基因pelA、algA、rhlI、rhlR和pslA表达的影响.结果显示,GLY对G1株和G2株的MIC分别为40和20 mg/mL;G1株和G2株都能形成生物被膜,G1株的形成能力较强;结晶紫染色显示,20 mg/mL GLY处理使G1株和G2株生物被膜的形成量显著减少(P<0.01).扫描电子显微镜观察发现,5 mg/mL GLY处理使生物被膜的形成显著减少,10 mg/mL GLY处理使菌体分散且未见明显生物被膜结构.qPCR检测结果显示,5 mg/mL GLY处理后,pelA基因表达量升高,但差异不显著;algA、rhlI、pslA和rhlR的基因表达量均显著降低(P<0.01);10 mg/mL GLY处理后,pelA、algA、rhlI、rhlR和pslA的基因表达量均显著降低(P<0.01).上述结果提示,GLY对铜绿假单胞菌有抗菌活性,对生物被膜的合成具有负调控作用,呈剂量依赖关系,可能通过下调相关基因表达来抑制生物被膜的形成.本研究为深入探讨GLY对铜绿假单胞菌生物被膜的影响和兔铜绿假单胞菌角膜炎治疗提供参考.
关键词： 铜绿假单胞菌;甘草甜素(GLY);生物被膜;长毛兔;分离鉴定
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不同土壤调理剂对红黄壤黄桃园土壤及黄桃品质的影响
《浙江农业科学 》 2022
摘要：本研究针对我国南方典型的红黄壤黄桃的耕地酸化状况,以常规施肥为对照,比较了生石灰、 含硅钾土壤调理剂和含腐植酸的土壤调理剂的3种土壤酸化改良剂对葡萄园土壤酸化,养分质量状况以及对果实品质的影响.结果表明,较对照,3种土壤酸化改良剂都可以显著改善土壤酸化,生石灰、 含腐植酸的土壤调理剂和含硅钾土壤调理剂处理后,土壤pH由5.28分别上升为5.98、5.85和5.75.与对照相比,生石灰、 含腐植酸和含硅钾的土壤调理剂处理后土壤中的交换性H+、 交换性酸总量及交换态铝都显著下降;含腐植酸和含硅钾的土壤调理剂显著提高土壤的有机质、 有效磷和速效钾含量.与其他两种土壤调理剂相比,施用含腐植酸的土壤调理剂后土壤的交换态钙离子和交换态镁离子含量显著上升.较对照,生石灰、 含腐植酸土壤调理剂以及硅钾型土壤调理剂显著提高了土壤中阳离子交换量,提高效果依次是生石灰<含腐植酸土壤调理剂<硅钾型土壤调理剂,较对照,施用生石灰、 含腐植酸土壤调理剂以及硅钾型调理剂均可提高黄桃的维生素C含量,分别提升11.1%、32.8%、19.3%,可溶性固形物含量分别提升8.7%、23.8%、9.7%,表明了土壤酸化改良后可显著提高黄桃品质,其中含腐植酸的土壤调理剂的效果最好.
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基于重测序的杨梅InDel标记开发与果实性状关联分析
《分子植物育种 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：基于杨梅(Myrica rubar Sieb.et Zucc.)重测序数据,开发了覆盖基因组的InDel标记,以10份种质资源为试验材料进行了果实性状统计分析、群体结构与聚类分析、关联分析与基因预测.结果显示:10个果实外观性状中变异系数在0.64%~7.13%之间,13个果实品质性状中变异系数在2.05%~12.09%之间,总酸变异系数最大,试材表型变异范围较大;92个InDel标记在10份种质中均具有多态性,共扩增出293个位点,平均每个标记检测到等位变异位点3.18个;群体结构与聚类分析表明,试材可分为2个亚群,分别是以'荸荠种'和'东魁'为代表材料的亚群,并且3个优株均与代表材料间存在核苷酸差异;关联分析发现,24个InDel标记关联到22个性状和77个位点,其中2个标记与6个性状关联,5个标记与4个性状关联,说明在杨梅中也普遍存在不同性状的连锁遗传现象;通过对关联基因预测,共检测到5个相关功能的候选基因.本研究中开发的高质量InDel标记为杨梅种质遗传多样性分析提供鉴定基础,筛选到的候选基因为分子辅助育种提供了理论依据.
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浙江地区鹅星状病毒分离鉴定及其衣壳蛋白多克隆抗体的制备
《浙江农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：鹅星状病毒(GAstV)是当前鹅养殖业的重要病原,易引起雏鹅内脏痛风症状和死亡,造成巨大经济损失.于浙江省内采集30份病料,进行核酸检测、病原分离和测序,并克隆其ORF2序列至pET-28 a原核表达载体,转化BL21菌株后经诱导获得衣壳蛋白,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.结果显示,临床死亡雏鹅剖检均发现典型内脏痛风症状,核酸检测鉴定为鹅星状病毒阳性,且出现不同基因型鹅星状病毒混合感染情况.共分离得到ZJC14和ZJLD20两个毒株,其中,ZJLD20在鹅胚和LMH细胞中均稳定增殖,但ZJC14并不能适应LMH细胞.病毒基因组测序显示,ZJC14与ZJLD20亲缘关系较远,ZJC14属于GAstV-Ⅰ基因型,而ZJLD20为GAstV-Ⅱ基因型.重组表达载体pET28a-ORF2诱导后获得纯化目的蛋白,经免疫成功制备兔源多克隆抗体,该抗体可与目的蛋白结合.此外,间接免疫荧光和Western-blot试验结果显示,ZJLD20衣壳蛋白制备的多克隆抗体可与病毒结合反应.研究成果有利于后续对该病原致病能力的研究,同时,试验制备的ORF2衣壳蛋白与多克隆抗体为鹅源星状病毒感染的诊断试剂开发奠定了基础.
关键词： 鹅星状病毒 分离鉴定 衣壳蛋白 原核表达 多克隆抗体
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浙江省山区县乡村"三生"功能耦合协调时空格局变化特征分析
《江西农业学报 》 2022
摘要：以浙江省27个山区县为研究区,采用熵值法和耦合协调模型,测算2010、2020年浙江省山区县乡村"三生"功能发展水平,评估各功能之间的耦合度、耦合协调度.结果表明:研究期浙江省27个山区县"三生"功能发展水平均值由0.88提升至1.34,增长贡献度由高到低依次为生活、生态、生产,空间分布呈现西北高东南低的态势;浙江省山区县的生产、生活、生态功能子系统发展水平均值由"低低中"进入"中中高"阶段;浙江省山区县"三生"耦合度由磨合时期进入高耦合时期,但生产—生态功能的耦合度有待加强;浙江省山区县乡村"三生"功能耦合协调度由基本协调进入中度协调时期.
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