科研产出
检测miRNA活性的双荧光素酶单载体
《中国生物化学与分子生物学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：本研究报道了微小RNA靶分子鉴定及其活性分析的内参内置型双荧光素酶单载体与其应用.利用非连接酶依赖的基因克隆技术,借助一步式二元搭桥耦联长距离PCR及大肠杆菌体内同源重组方法,将萤火虫荧光素酶基因(Firefly luc)融合到pRL-TK载体的海肾荧光素酶基因(Renillaluc)和氨苄青霉素抗性基因之间,构建为两种荧光素酶基因表达框并置的单载体报告系统,命名为pMiSensor.在海肾荧光素酶基因的3'非翻译区引入多克隆位点Xba I和Apa I,便于克隆目的基因的3'UTR.海肾荧光素酶为报告基因,萤火虫荧光素酶为内参基因.多种哺乳动物细胞系的转染实验证实,pMiSensor可同时有效表达两种报告基因,其酶活显示出宽广的线性范围.通过构建pMiSensor-CCNE1报告载体,证明pMiSensor能够重现miR16对细胞周期蛋白CCNE1的调控作用.通过转染miR16抑制剂,证明pMiSensor-CCNE1可作为一种灵敏的生物感应器,探测细胞内微小RNA的活性变化.该双荧光素酶单载体具有重复性高、操作简便、定量准确的优点,适用于微小RNA靶分子的筛选、鉴定和确认,也适用于在细胞水平定量分析微小RNA的活性变化.
关键词： 微小RNA 荧光素酶 非连接酶依赖 mRNA靶分子 单载体
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间歇式加压技术快速腌制皮蛋工艺研究
《食品科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为缩短皮蛋的生产周期,按照U10(108)均匀试验设计,采用间歇式加压技术进行腌制,利用压力控制程序调控腌制罐中的加压及卸压过程,利用高压加快腌制液中碱向蛋内渗透,低压时,蛋内压力小于蛋外环境的压力,从而加速蛋内产生的水分和H2S、NH3及CO2等气体向外逸出,有利于碱进一步向蛋内渗透,起到加快皮蛋成熟的作用。通过对皮蛋蛋清、外层蛋黄及内层蛋黄的游离碱度、蛋黄硬化率和感官等指标进行综合评分,选出最优工艺条件组合为:碱(食品级氢氧化钠)质量分数5%,高压180kPa保持40min,低压保持12min,腌制206h;用此法腌制皮蛋最多可将生产周期缩短到传统工艺的78%,可以大幅提高生产效率;各因素对皮蛋品质的影响均具有显著性(P<0.05),影响作用按大小顺序排列为腌制时长>低压保持时间>高压保持时间>碱质量分数>高压压力,综合品质与高压值呈负相关关系,在腌制时长一定的条件下,高低压分配对皮蛋品质具有重要作用,其中低压保持时间对内层蛋黄游离碱度影响最显著。
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旱莲草对水稻产量性状的影响及其防治经济阈值
《植物保护学报 》 2012 CSCD
摘要：为明确大田条件下旱莲草对水稻生长和产量的影响和为其防治提供有效经济参数,采用添加系列试验和模型拟合的方法研究不同旱莲草密度下水稻田间透光率、水稻株高和产量性状的变化。当旱莲草密度≥2株/m2时,田间透光率显著降低,且随着旱莲草密度增加,水稻有效穗数、穗长、穗粒数等显著降低,空粒率显著增加,导致产量显著下降。二次曲线模型y=-0.0189x2+2.3546x+2.0819能很好地拟合旱莲草密度与水稻产量损失间的关系。人工拔除方法和10%苄嘧磺隆WP防除旱莲草,其经济危害允许水平分别为22.22%和4.67%,经济阈值分别为9.3株/m2和1.1株/m2。
套袋和外源5-氨基乙酰丙酸处理对‘云红梨2号’果皮着色的影响
《南京农业大学学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：以‘云红梨2号’为试材,研究套袋、外源5-氨基乙酰丙酸(ALA)处理对果皮花色素苷含量、花色苷合成关键酶活性、可溶性总糖含量以及内源ALA含量变化的影响,并探讨果皮花色素苷含量与酶活性及可溶性总糖含量的关系。结果表明:在果实着色初期,套袋和外源ALA处理均有明显的促进果皮着色的效果,且两者共同处理促进作用更为显著;随着果实接近成熟,花色素苷含量有所下降。在正常光照情况下,果实摘袋后5 d左右对促进着色效果较好。相关性分析表明,套袋处理的果皮花色素苷含量与苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性显著相关;不同处理及对照果皮花色素苷含量均与类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶(UFGT)活性显著相关,但与果实可溶性总糖含量无显著相关性。
关键词： ‘云红梨2号’ 套袋 5-氨基乙酰丙酸(ALA) 果皮着色
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EMA-LAMP方法快速检测食源性副溶血性弧菌活细胞
《江苏农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：将一种DNA染料叠氮溴化乙锭(EMA)与环介导等温扩增技术(LAMP)相结合,建立一种能快速检测食品中食源性副溶血性弧菌活细胞的新方法。结果表明,EMA-LAMP方法最低检测限为1×10 CFU/mL,PCR方法最低检测限为1×103CFU/mL。与PCR方法相比较,EMA-LAMP检测方法具有快速、灵敏度高、操作简便等优点,并能检测鉴定副溶血性弧菌病原活细胞。
关键词： 环介导等温扩增技术(LAMP) 叠氮溴化乙锭(EMA) 副溶血性弧菌 活细胞
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浅析狼尾草作为观赏草在园林中的应用
《中国农学通报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：为进一步探讨狼尾草的观赏应用价值,通过查阅大量国内外资料文献,从狼尾草的分布、品种多样性及生态适应性等方面阐述其在园林中的作用,分析了存在的问题和对策,展望了狼尾草的开发前景。
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18个紫花苜蓿品种苗期抗旱性综合评价
《江苏农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：以国外引进的18个紫花苜蓿品种为研究材料,在温室内利用反复干旱法开展了苗期抗旱性研究;以植株存活率、叶片质膜透性、叶片水分饱和亏缺、株高胁迫指数、根系胁迫指数、干物质胁迫指数以及根冠比作为苜蓿抗旱性鉴定的指标,并运用隶属函数法对紫花苜蓿品种抗旱性进行了综合评价。结果表明,通过适宜的指标和方法能够比较客观地评价苜蓿品种的抗旱性强弱;18个苜蓿品种可归分为5个抗旱等级,多数品种抗旱性中等。建议在干旱地区选择抗旱性较强的苜蓿品种游客、盛世推广利用。
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不同类型纸袋套袋处理对梨果实品质的影响
《浙江农业学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：以‘鄂梨2号’为试材,研究不同套袋处理对其果实品质的影响。结果表明,套袋处理显著改善果实商品外观,果点变小、变少,锈斑指数降低;纸袋透光率与果实大小之间的线性回归方程为YW=159.61+0.99x,与果面亮度指标L值、色度坐标A,B的线性回归方程分别为YL=74.45-0.71x,YA=-16.68-0.77x,YB=52.52+1.86x;套袋处理果实Vc含量高于对照,果实可溶性固形物、可溶性糖、可滴定酸含量降低,但SSC/TA,SS/TA增加。‘鄂梨2号’直接套袋最适宜的纸袋为1-KK小林双层袋、韩国双层袋及台果双层袋;二次套袋能显著提高‘鄂梨2号’的外观品质,生产高档果品推荐使用。
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早熟猕猴桃新品种‘金怡’
《园艺学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要：‘金怡’猕猴桃是由中华猕猴桃实生选育而成的早熟新品种。果实短圆柱形,果皮暗绿色,果面绒毛稀少,有小而密的果点,平均单果质量70g,最大110g。果肉黄绿色,肉质细腻,风味浓郁,含可溶性固形物17.0%～20.0%,可溶性总糖12.1%,可滴定酸1.28%,维生素C1 322 mg·kg-1。在武汉地区9月上旬成熟,盛果期树产量22 500kg·hm-2。
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