科研产出
东北野生大豆核心种质单核苷酸多样性分析
《大豆科学 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：对196个东北野生大豆核心种质的NRT2、Asp AT2和CPK13三个基因片段进行单核苷酸扫描,共检测到94个SNPs位点及10个插入/缺失位点(Indel),碱基转换和颠换平均比例约2∶1。稀有SNPs位点(<10%)39个,比率约为41.5%。196份核心种质平均多态性位点比例约为74%,Shannon's指数是0.366,多样性指数为0.241;不同纬度群体的平均多样性指数随纬度下降逐渐升高,在44°N时达到峰值,然后随纬度降低缓慢下降,多样性指数变化呈近似正态曲线模式。初步推测N 42°~N45°区域为东北野生大豆的多样性中心。
关键词： 野生大豆 核心种质 SNP Indel 遗传多样性
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玉米幼胚再生体系的建立
《华北农学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为建立高效稳定的玉米再生体系,以玉米幼胚为受体材料,研究了基因型对胚性愈伤组织诱导率的影响以及适宜玉米幼胚生长的诱导培养基、继代培养基、分化培养基及生根培养基。结果表明,基因型可显著影响胚性愈伤组织诱导率,H99×A188的诱导率最高(45.28%);N6培养基适合用于胚性愈伤组织的诱导同时也适合继代培养;激素组合为MS+6-BA 1.0 mg/L+KT 2.0 mg/L的分化培养基出苗率和转化率最高,易成活;1/2MS培养基附加IBA1.0 mg/L和1.0 g/L活性炭适合于生根培养。
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适用于分子育种的玉米种子无损基因型鉴定技术优化
《分子植物育种 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：随着分子标记技术的快速发展,分子标记辅助育种已被广泛应用于玉米育种,迫切需要高通量、高效的技术方法。基于单粒种子苗前的分子生物学分析来预测表型性状是提高分子标记辅助选择效率的方法,但还需要发展一种切实有效的方法来保证苗前的分子生物学分析和种子播种后的正常发芽及生长。本研究通过对玉米单粒种子进行切取部分胚乳取样,对样品进行CTAB和碱煮法DNA提取的比较,而后对切去部分胚乳的种子进行包衣处理,然后对正常种子(T1)、只切除部分胚乳的种子(T2)、只包衣的种子(T3)以及既切除部分胚乳又包衣的种子(T4)进行室内沙盘发芽试验和田间种植试验分析,结果表明通过包衣的方法可以提高切除部分胚乳种子的发芽率,室内和田间试验中T4处理和T1处理的发芽率、株高及简易活力指数基本相近,差异均不显著。T4处理在室内和田间试验中的发芽率比T2处理分别提高了3.35%和14.90%,差异分别达到显著和极显著水平;T4处理的株高和简易活力指数均比T2处理的高,差异均达到了极显著水平。切除部分胚乳又包衣种子的发芽率高于国家标准发芽率,十天后的株高、简易活力指数基本达到正常种子的水平。对切除部分胚乳的种子包衣的方法可以解决播种前的分子生物学方面的检测又能使种子正常的发芽及生长,大大提高了玉米分子育种效率。
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玉米AGPase-bt2与GPN1蛋白互作的双分子荧光互补技术研究
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：【目的】解析玉米淀粉合成限速酶ADP-葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase-bt2)与糖酵解关键酶甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GPN1)在植物体内是否存在相互作用。【方法】首先克隆获得AGPase-bt2和GPN1基因,然后采用双分子荧光互补技术(BiFC),构建326-CYCHA-AGPase-bt2和326-CYNEE-GPN1双分子荧光表达载体,转化农杆菌EHA105,并用2种载体共同瞬时侵染烟草叶肉细胞,48h后在激光共聚焦显微镜下观察AGPase-bt2与GPN1的相互作用。【结果】AGPase-bt2基因长1 428bp,GPN1基因长1 497bp。双酶切鉴定结果表明,326-CYCHA-AGPasebt2、326-CYNEE-GPN1载体构建正确;PCR结果证实,植物表达载体成功转化到农杆菌EHA105中;携带有共转化基因的烟草叶肉细胞在激光共聚焦显微镜下观察到明显的黄色荧光现象,且黄色荧光与叶绿体自发的红色荧光位置重合。【结论】AGPase-bt2与GPN1在植物细胞中真实地存在蛋白互作。
关键词： AGPase-bt2 GPN1 双分子荧光互补技术 蛋白质互作
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miR-141-3P和miR-346在对靶基因FSHR的识别与验证
《中国兽医学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为探索miRNA-141-3P和miRNA-346在大鼠腺垂体中的靶基因,并对其进行识别与验证。本研究利用PCR方法,根据Fshr(Rattus)3′UTR野生型载体序列信息设计突变引物将靶序列CAGTGTT(78-85)突变为GTCACAA和GGCAGAC(127-133)突变为CCGTCTG,以野生型载体为模板PCR扩增Fshr基因的3′UTR突变序列,将其克隆到pmiR-RB-REPORTTM双荧光素酶报告载体中。由于miRNA是通过3′UTR区作用于靶基因,因此将miRNA与构建好的报告基因载体共转,通过报告基因相对荧光值的下调来印证miRNA与靶基因的相互作用。双荧光素酶报告基因表达分析显示,rno-miR-141-3p mimic对Fshr野生型载体的报告荧光没有明显下调作用;rnomiR-346mimic对Fshr野生型载体的报告荧光有明显下调作用,相应结合位点突变后,突变型载体中的报告荧光与野生型相比有所恢复;rno-miR-141-3p mimic和rno-miR-346mimic同时处理,对野生型载体的报告荧光有一定的下调作用。在体外,rno-miR-141-3p可能不能通过Fshr上相应的3UTR位点调控报告基因的表达;rno-miR-346有可能通过Fshr上相应的3′UTR位点调控报告基因的表达。本试验为FSHR的转录后调控研究提供了理论依据。
关键词： 大鼠 腺垂体 微小RNA 繁殖调控 促卵泡素受体基因
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益生元低聚糖对发酵乳杆菌CH4的促生长作用
《吉林农业科学 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：内蒙古奶豆腐中分离的一株优良益生特性的乳杆菌菌株CH4经API 50 CHL和16S r DNA序列分析鉴定为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)。本研究分析了益生元对CH4生长的促进作用。单因子试验表明,棉籽糖对CH4的促生长能力最强,添加量为1.5%,培养时间为10 h有利于菌株CH4的生长。利用正交试验进行验证,最终确定发酵乳杆菌CH4的生长条件为:培养基中添加1.5%棉籽糖,培养11 h,发酵乳杆菌CH4的活菌数达到8.65×1010CFU/m L,与未添加低聚糖培养时相比提高40倍。
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链霉菌769胆固醇氧化酶基因克隆、表达及生物学活性分析
《中国生物防治学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：胆固醇氧化酶(cholesterol oxidase,EC 1.1.3.6)是胆固醇降解代谢过程中的关键酶,在食品开发、医疗保健、临床检测、生物农药等方面具有广泛的应用价值。通过PCR方法从链霉菌Streptomyces ahygroscopicus 769的基因组中扩增得到769_Ch OA基因(Gen Bank accession No.KF290994)。该基因全长为1578 bp,编码一个由525 aa组成的蛋白质,蛋白理论分子量为57 k Da,等电点为6.29。769_Ch OA与来源于S.natalensis的胆固醇氧化酶基因的同源性为91%。构建了硫氧还蛋白-769_Ch OA融合的表达载体p ET32a::769_Ch OA,以Escherichia coli Origami B(DE3)为表达宿主,获得了能可溶性表达的胆固醇氧化酶重组菌。经Ni亲和层析纯化得到的酶蛋白比活力为5.90 U/mg。酶学性质分析表明,该酶对胆固醇的催化活性最高,对测定的7种胆固醇类似物也都具有一定的催化能力。酶的最适温度和p H范围为20~40℃和p H 6.0~8.5,其活性均高于80%,且在30℃和p H 7.0时表现出最大的活性,酶活分别达到6.83和6.44 U/mg。酶在低于40℃和弱碱性条件下具有很好的稳定性。该酶对鳞翅目害虫亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guenée)和水稻二化螟Chilo suppressalis(Walker)幼虫具有很强的杀虫活性,半致死浓度分别为27.4和17.1μg/m L。
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农田不同耕层构造对玉米生长发育及产量的影响
《干旱地区农业研究 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：在公主岭市吉林省农科院长期定位试验田(1983年)4种耕层构造(上虚下实、全虚耕层、全实耕层和虚实并存)上,通过对玉米出苗率、株高、茎粗、叶片数、叶面积、根系及产量指标测定,探讨不同耕层构造对玉米生长发育及产量的影响。结果表明,虚实并存耕层玉米出苗率为94.90%,明显高于其他耕层,增加苗期玉米株高和茎粗,叶片数较全虚耕层和上虚下实耕层分别增加0.8和1.2片,但与全实耕层相比差异不明显。从玉米生育中后期来看,虚实并存耕层促进玉米生长发育,增加叶面积,改善根系性状,与上虚下实耕层比较,根条数增加16.80条,气生根和地下根干重分别增加4.60 g和20.50 g,且气生根层数增加0.80层。同时,虚实并存耕层玉米产量显著高于其他耕层,增产幅度为8.17%~15.02%,上虚下实耕层产量最低。可见,虚实并存耕层"既发小苗,又发老苗",稳产高产,是较为理想的耕层构造。
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植物乳杆菌Sc52联合牛蒡低聚果糖对2型糖尿病模型小鼠的治疗作用
《食品科学 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：目的:研究植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)Sc52和牛蒡低聚果糖(burdock fructooligosaccharide,BFO)联合使用对2型糖尿病小鼠的治疗作用。方法:高脂饲料结合链脲佐菌素(streptozocin,STZ)建立2型糖尿病小鼠模型,分成6组,各组连续4周接受不同处理,实验结束后测定小鼠空腹血糖含量、血糖曲线下面积,血清中脂质、胰岛素和炎症因子水平等相关生化指标;分析小鼠粪便中短链脂肪酸含量及主要菌群数量。结果:Sc52+BFO组合能够抑制小鼠血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、内毒素(endotoxin,ET)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平的升高,明显提升血清中高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、胰岛素(insulin,INS)水平;Sc52+BFO组合还能提高小鼠肠道中乙酸、丙酸、丁酸含量,降低乳酸含量;促进小鼠肠道中乳杆菌、双歧杆菌的生长,抑制肠球菌、肠杆菌、产气荚膜梭菌等有害微生物的生长,且Sc52+BFO组合治疗糖尿病的效果优于单独使用BFO和Sc52。结论:植物乳杆菌Sc52和BFO联合使用能够调节小鼠肠道菌群平衡、降低血糖血脂含量、抑制炎症因子表达,提高2型糖尿病小鼠胰岛素水平。
关键词： 植物乳杆菌 牛蒡低聚果糖 2型糖尿病 肠道菌群 肥胖
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