科研产出
西瓜种质资源鉴定评价及其DNA指纹图谱构建
《分子植物育种 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：本研究对上海市农业科学院园艺研究所西瓜育种团队创制的16份西瓜新种质的主要农艺性状及其抗枯萎病性进行了鉴定评价。结果表明,16份西瓜种质资源均表现较强的耐低温弱光性,其中,WBY-1-1、WBY-2-3、WYY-3-2和WBY-2-1等属于特早熟高品质黄瓤小果型西瓜新种质;WJ-80-1、W15-7-11和W16-1-7等属于早熟高品质红瓤中果型西瓜新种质,其余9份都属于中晚熟优质红瓤大果型西瓜新种质。抗病性鉴定结果,V13-9-3、V13-9-7、W958-3-6、W98-3-6及W98-1-4等5份种质表现苗期和成株期高抗西瓜枯萎病,W968-1、W968-2、W99-1-3及W958-3-1等4份种质表现苗期中抗枯萎病,成株期高抗枯萎病,其它7份种质苗期及成株期均表现感病。同时,利用16对西瓜核心SSR荧光标记引物,采用毛细管电泳,构建了16份种质资源的DNA指纹图谱,为新种质的开发应用及保护提供了可靠的物质和技术支撑。
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双孢蘑菇萎锈灵抗性基因定点突变的载体构建与遗传转化
《菌物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为建立更为安全、有效的双孢蘑菇遗传转化体系,构建了双孢蘑菇琥珀酸脱氢酶的铁硫蛋白亚基Agsdi1突变（His突变为Leu）表达载体pAgsdi1,并通过农杆菌介导方法转化双孢蘑菇W192,经萎锈灵筛选以及PCR扩增和MnlⅠ酶切验证后获得了转化菌株。验证结果表明,点突变的铁硫蛋白亚基Agsdi1可以作为双孢蘑菇有效的抗性标记基因。因其并未引入新的外源基因,是一种比潮霉素抗性基因更为安全的筛选标记,将可用于双孢蘑菇等食用菌的遗传转化。
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香菇单单杂交过程中核迁移和细胞质遗传规律
《食用菌学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：通过香菇（Lentinula edodes）L808P65、EFISAAS5053P1和YAASM363P1原生质体单核菌丝体两两单单杂交,观察杂交过程中的菌落形态变化,利用ITS和rrnL部分序列分别鉴定双核菌丝体的细胞核和细胞质来源,以明确单单杂交过程中核迁移路径和细胞质遗传规律。结果表明:双亲菌落接触部位存在一条明显比周围菌丝体稀疏的分界线,3个亲本菌落的扩大速度从快到慢依次为EFISAAS5053P1、L808P65和YAASM363P1,双亲菌落接触区域的分界线均向菌落扩大速度慢的亲本菌落弯曲,有的甚至在分界线两端生长出两个与亲本菌落存在分界线的扇形菌落;细胞核迁移起始于分界线,双亲的细胞核互相向对方菌落迁移,不同培养皿中核迁移速度最快的区域不同;除位于分界线上的双核菌丝体外,左边亲本菌落的双核菌丝体细胞质来源于左边亲本菌落,右边亲本菌落的双核菌丝体细胞质来源于右边亲本菌落。
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不同施肥方式对设施黄瓜产量及水肥利用效率的影响
《上海农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为提高设施黄瓜产量和水肥利用效率,以黄瓜‘碧玉’为试材,通过设置全营养滴灌施肥区（TFNPK）、滴灌施肥无氮区（TFPK）、滴灌施肥无磷区（TFNK）、滴灌施肥无钾区（TFNP）、全营养沟灌冲施对照区（TCNPK）等不同施肥方式,调查各处理地上部茎、叶、果实的累积生物量及氮、磷、钾养分含量,明确滴灌施肥技术对提高肥料氮、磷、钾养分利用率的效果。结果表明:滴灌施肥技术有利于黄瓜植株地上部各器官的均衡生长,显著提高黄瓜产量,全营养滴灌施肥处理下每667 m2黄瓜产量为4 921.8 kg,比常规冲施对照提高6.90%;缺少氮、磷、钾任一元素均会降低黄瓜产量,其中缺氮对黄瓜产量影响最大,缺磷其次,缺钾影响最小,全营养滴灌施肥处理氮、磷、钾吸收量分别比常规冲施（对照）提高10.44%、14.45%和14.54%。滴灌施肥可显著提高黄瓜产量和水肥利用效率,滴灌施肥的氮、磷、钾利用率较常规冲施（对照）分别提高了7.51%、10.66%和15.40%。
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猪流行性腹泻病毒S2蛋白间接ELISA检测方法的建立与应用
《中国兽医科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：本研究基于猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV） S2截短蛋白,建立了特异性Ig G抗体的间接ELISA检测方法,用于临床PEDV特异性抗体水平的监测。前期筛选了富含中和表位的S2截短基因,体外表达后作为ELISA包被抗原,用于捕获PEDV Ig G抗体,以山羊抗猪HRP-Ig G作为二抗,通过条件优化,建立了检测猪血清中PEDV Ig G抗体的间接ELISA方法。最佳反应条件为:S2抗原蛋白的最佳包被浓度为2μg/m L,临床血清样品和酶标二抗的最佳稀释倍数分别为1∶400和1∶20 000。该方法的批内和批间重复变异系数（CV）分别为1.81%～8.52%和1.18%～7.41%,重复性较好;该方法检测猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪瘟病毒（CSFV）及牛病毒性腹泻病毒（BVDV）的阳性血清时结果均为阴性,特异性较强。该方法与商品化PEDV抗体检测试剂盒相比较,阳性符合率为95.18%,阴性符合率为91.43%,说明该方法可用于临床血清抗体筛查。进一步利用此方法对324份猪的临床血清样品进行检测,发现PEDV抗体阳性血清占62.96%,与临床现状基本吻合。上述结果表明,该方法适用于临床猪群中PEDV Ig G抗体水平普查,为PEDV的疫病防控及灭活疫苗评价提供了有效的技术支持。
关键词： 猪流行性腹泻病毒 间接ELISA S2截短蛋白 IgG
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白粉病菌对不同甜瓜品种幼苗生理生化指标的影响
《分子植物育种 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为研究甜瓜白粉病菌对不同甜瓜品种生理指标的影响,本研究以高抗甜瓜白粉病品种‘16-6’、中抗甜瓜白粉病品种‘04-38’和高感甜瓜白粉病品种‘15B-42’幼苗为材料,测定病原菌接种1、3、5、7、920d后甜瓜幼苗叶片中抗氧化防御性功能酶活性、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、可溶性蛋白、叶绿素以及光合指标的变化。结果表明,接种白粉病菌后,除了超氧化物歧化酶（SOD）活性,3个甜瓜品种幼苗叶片中过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、抗坏血酸过氧化物酶（APX）、多酚氧化酶（PPO）以及苯丙氨酸解氨酶（PAL）205个防御性酶的活性以及MDA含量均呈先升高后降低的变化趋势,且整体升高幅度表现为抗病品种大于感病品种;3个甜瓜品种幼苗叶片的可溶性蛋白和叶绿素含量以及净光合速率（net20photosynthetic20rate,Pn）、气孔导度（stomatal20conductance,Gs）、胞间CO2浓度（intercellular20CO220concentration,Ci）、蒸腾速率（transpiration20ratio20Tr）和气孔限制值（stomatal20limitation20value,Ls）205个光合指标均有不同程度的下降,且抗病甜瓜品种的下降幅度明显小于感病品种。
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冬虫夏草菌染色体数量的初步研究
《应用昆虫学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【目的】冬虫夏草Ophiocordyceps sinensis是一种重要的食药用真菌,仅分布在青藏高原及其周边高海拔地区,具有独特的生存环境、生物学特性以及显著扩张的基因组。本研究旨在确定冬虫夏草菌的染色体数量,为该物种的基因组测序、进化、遗传和分子生物学研究奠定基础,也为其他虫草菌染色体计数研究提供参考。【方法】二、三代测序辅以Hi-C组装,结合显微观察研究冬虫夏草的染色体数量。选择已组装获得基因组完成图的冬虫夏草1229菌株,首先利用昆虫细胞培养液培养获得芽生孢子,芽生孢子经秋水仙素和溶壁酶处理,获得细胞有丝分裂中期分散的染色体,DAPI荧光染色后使用激光共聚焦显微镜观察计数,结合基因组组装和显微观察的结果确定冬虫夏草染色体数量。【结果】二、三代测序辅以Hi-C组装,得到6条包含两端端粒的完整染色体,染色体之间显示出较强的端粒互作;显微观察结果也支持冬虫夏草1229菌株的染色体数量为6条。【结论】冬虫夏草菌的基因组包含6条染色体,芽生孢子是观察冬虫夏草菌染色体的理想材料。
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