科研产出
孔雀石绿及其代谢物在斑点叉尾体内及养殖环境中的消解规律
《淡水渔业 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：研究了以全池泼洒的投药方式,孔雀石绿(MG)(池塘中MG的理论浓度为1 mg/L)及其主要代谢物隐性孔雀石绿(LMG)在斑点叉尾(Ietalurus punetaus)肌肉和皮肤以及养殖水体和底泥中的残留消除规律。采用高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)分析MG及其代谢物LMG在斑点叉尾体内及环境中的浓度水平。结果显示:肌肉、皮肤中MG于用药后第1天最高浓度分别为:(42.77±5.26)μg/kg和(6.36±0.11)μg/kg,消除半衰期T1/2分别为57.76 d、31.51 d;皮肤和肌肉中LMG分别在用药后第3天和第1天达到最高(502.27±20.43)μg/kg和(125.26±12.76)μg/kg,消除半衰期T1/2分别为33.01 d、38.51 d。这表明MG在斑点叉尾体内会迅速转化为LMG,且LMG残留在皮肤中的浓度大于肌肉中的浓度。养殖环境底泥中同时存在MG和LMG,以LMG为主,并且LMG呈现蓄积的趋势,在第360天出现最高浓度(5.92±1.23)μg/kg;水体中MG最高浓度出现在第1天,为(46.44±7.39)μg/L,随后急剧降至1μg/L左右,水体中几乎不存在LMG。
关键词： 斑点叉尾(Ietalurus punetaus) 孔雀石绿(MG) 养殖环境 消除 残留
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主养草鱼高密度池塘溶氧收支平衡的研究
《水生生物学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：采用原位生态学的方法测定广东省中山市9口主养草鱼高密度池塘中浮游植物光合作用产氧量、水柱呼吸耗氧量、底泥呼吸耗氧量和鱼呼吸耗氧量,并用数学模型计算增氧机增氧量及用差减法计算大气扩散作用引起的得氧或失氧,对高密度养殖池塘中溶氧收支平衡状况进行了研究。结果显示:在水深为1.5—2.0 m的主养草鱼高密度池塘中,光合作用产氧量随着水深的增加而显著降低(P<0.05),底层出现负值呈现氧债现象。水呼吸耗氧量在表层、中层和底层之间没有显著差异(P>0.05)。表层水光合作用产氧量显著大于水呼吸耗氧量(P<0.05),而中层和底层水光合作用产氧量却显著小于水呼吸耗氧量(P<0.05)。在主养草鱼高密度池塘溶氧的收入中,浮游植物光合作用产氧量、增氧机增氧量和大气扩散溶入氧量分别占总溶氧来源的44.7%、42.3%和13.0%,机械增氧作用已接近光合作用,成为溶氧来源的主要贡献者;在池塘溶氧的支出中,水呼吸、鱼呼吸和底泥呼吸耗氧量分别占总耗氧量的45.9%、45.0%和9.1%,鱼呼吸耗氧与水呼吸耗氧相当,成为水体中氧气的主要消耗者。结果表明在草鱼高密度养殖过程中,合理使用机械增氧是池塘溶氧管理的有效措施。
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生物净化系统对精养鱼池内部水循环的影响
《江苏农业科学 》 2013 北大核心
摘要：为在养殖期间不换水的情况下保持较好的水质条件,采用种植水生植物、吊挂滤食性贝类和生物刷、引进高分子纳米增氧管的方法来净化精养池塘水质,试验中设计2个试验池和1个对照池,3个鱼池的大小、放养鱼类、放养比例和总放养量均保持一致。结果显示,在2个月的试验期间,试验池(尤其1号试验池)的水质明显好于对照池,悬浮固体总量、化学耗氧量、亚硝态氮含量、硝态氮含量、总氮含量、总磷含量和磷酸盐含量明显较低,水体透明度明显较高,而且2个试验池的溶氧量在整个试验期间都能保持在5 mg/L以上。
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传染性造血器官坏死病毒糖蛋白原核表达及免疫原性分析
《病毒学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为了建立传染性造血器官坏死病毒的免疫学检测方法,本研究以IHNV-Sn分离株基因组提取物为模板,利用RT-PCR方法扩增出其表面糖蛋白(glycoprotein,G)的基因序列(1527bp)。将该基因克隆到pET27b(+)表达载体中构建出重组质粒pET27b-G,通过大肠杆菌BL21(DE3)表达菌株获得高效表达。SDS-PAGE电泳分析显示表达蛋白约55kD,大部分以包涵体的形式表达。利用尿素变性复性处理后获得高纯度的纯化蛋白,制备兔抗血清。间接ELISA结果显示,所制备的兔抗血清能够与重组糖蛋白和IHNV-Sn病毒株表面糖蛋白发生特异性反应,与重组蛋白的反应效价为1∶20 000;间接免疫荧光结果显示,该兔抗血清可与IHNV-Sn分离株和IHNV参考毒株产生特异性的荧光,以上结果说明本研究所表达的IHNV糖蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性,该研究为IHNV检测方法的建立及疫苗的研制提供了基础材料和理论依据。
关键词： 传染性造血器官坏死病病毒 病毒表面糖蛋白 原核表达
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预处理对真鳕鱼皮明胶得率及凝胶强度的影响
《食品研究与开发 》 2013 北大核心
摘要：以真鳕鱼皮为原料,探讨不同预处理对鱼皮明胶得率、凝胶强度及分子量分布的影响。结果表明,盐酸处理或盐酸-氢氧化钠结合处理鱼皮所制备的明胶其得率分别为10.46%和10.68%(以湿鱼皮计),凝胶强度分别为169.6 Bloom g和182.7 Bloom g,超过国家药用明胶和食用明胶的最低凝胶强度标准要求;仅用氢氧化钠处理鱼皮所制备的明胶其得率、凝胶强度分别为8.38%和53.0 Bloom g,只符合国家食用明胶的最低凝胶强度标准要求。SDSPAGE凝胶电泳结果表明:3种方法处理鱼皮所制备的明胶中均含有两条明显的α链,α链含量高的明胶有更好的凝胶强度特性。
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全氟辛烷磺酸对真鲷鳃抗氧化酶和组织损伤的影响
《生态与农村环境学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为了探讨全氟辛烷磺酸(PFOS)对真鲷(Pagrosomus major)的毒性及致毒机理,采用半静态毒性试验方法研究PFOS对真鲷的96 h急性毒性,并分析低浓度(0.1 mg.L-1)、中浓度(1.0 mg.L-1)和高浓度(2.0 mg.L-1)PFOS胁迫对真鲷鳃组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性,脂质过氧化物(MDA)含量以及组织损伤的影响。结果表明,PFOS对真鲷的96 h半致死浓度〔ρ(LC50)〕为22.56 mg.L-1。在PFOS胁迫阶段,低浓度组真鲷鳃组织SOD活性呈现先受诱导后受抑制的趋势,而中、高浓度组受到显著抑制(P<0.05),胁迫15 d时高浓度组抑制率为14.86%;各浓度组CAT活性的变化趋势呈"U"型,7和15 d时高浓度组诱导率分别为40.53%和62.32%;低浓度组POD活性在胁迫1 d时呈受诱导效应,之后下降至对照组水平(P>0.05),中、高浓度组则呈现先受抑制后受诱导的趋势,胁迫15 d时高浓度组诱导率为63.05%;MDA含量变化没有表现出明显的规律性。在净水恢复结束时,各浓度组真鲷鳃组织SOD活性恢复到对照组水平,而CAT、POD活性和MDA含量与对照组相比仍有显著差异(P<0.05)。在PFOS胁迫下真鲷鳃组织出现鳃丝上皮脱落与鳃丝融合现象,病变程度随着暴露浓度的增加和暴露时间的延长而加深。可见,PFOS可对真鲷鳃组织产生多个层面的毒性效应。
关键词： 真鲷 全氟辛烷磺酸(PFOS) 鳃 抗氧化酶 组织损伤
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大麻哈鱼卵黄囊期仔鱼异速生长及其生态学意义
《水生生物学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：运用实验生态学的方法,对大麻哈鱼(Oncorhynchus keta Walbaum)卵黄囊期仔鱼的异速生长及器官优先发育在早期生存和环境适应上的生态学意义进行了研究。结果表明,大麻哈鱼卵黄囊期仔鱼的感觉、摄食,呼吸和游泳等器官快速分化,许多关键器官均存在异速生长现象。在身体各部分中,头部和尾部为正异速生长,躯干部为负异速生长,体高有先增大后减小的趋势;在头部器官中,眼径、口宽、吻长和眼后头长均为正异速生长;在游泳器官中,胸鳍、腹鳍、背鳍、臀鳍、背鳍基、臀鳍基和尾鳍均为正异速生长,脂鳍为负异速生长,其中,腹鳍在全长25.31 mm、12日龄出现生长拐点,但拐点前后均为正异速生长。大麻哈鱼卵黄囊期仔鱼感觉、摄食,呼吸和游泳等器官的快速发育,使出膜后的仔鱼在最短的时间内获得了与早期生存密切相关的各种能力,对适应复杂多变的外界环境具有重要的生态学意义。
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草鱼呼肠孤病毒GCRV-GD108株VP5蛋白功能及免疫原性分析
《水产学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：在前期研究中分离到一株草鱼呼肠孤病毒,GCRV-GD108,并获得其全基因组序列。该病毒株的M5基因编码VP5蛋白,该蛋白与哺乳动物正呼肠孤病毒μ2蛋白具有较高的同源性及相似的NTPase结合保守区域,推测VP5蛋白也同样具有NTPase活性。为检测VP5蛋白是否具有NTPase活性及其是否具有免疫保护作用,采用已构建的原核表达载体表达VP5重组蛋白,通过孔雀绿钼酸铵法检测纯化后的重组蛋白的NTPase活性。采用DNAstar软件预测M5基因编码蛋白的抗原性,综合蛋白亲水性、表面可及性与表面抗原性三项指标,预测编码蛋白可形成抗原表位的氨基酸区域数多达86个,提示VP5蛋白具有较强的免疫原性。用重组蛋白VP5免疫健康草鱼,通过人工攻毒实验检测VP5蛋白的免疫保护作用。结果显示,VP5重组蛋白具有NTPase活性,且其NTPase活性依赖于Mg2+或Na+/K+,而Ca2+的存在可能抑制其活性;VP5蛋白可诱导草鱼产生高水平的抗体滴度,并显著提高IgM mRNA的表达水平,但未能为草鱼提供抗GCRV感染的保护。研究首次证实GCRV-GD108株VP5蛋白具有NTPase活性,但不能为草鱼提供免疫保护作用。
关键词： 草鱼呼肠孤病毒GCRV-GD108株 重组VP5蛋白 核苷三磷酸酶 活性 免疫原性
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建鲤内参基因β-actin的实时荧光定量PCR方法的建立
《浙江农业学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：β-actin在真核细胞的生理过程中起着重要的作用,其表达范围广、表达量恒定,常作为内参基因应用于real time PCR中。本文通过RT-PCR克隆出建鲤(Cyprinus carpio var.jian)β-actin的部分cDNA序列,其长度为424 bp,翻译成138个氨基酸,计算的蛋白质分子量为15.4 ku。氨基酸同源性分析显示,建鲤β-actin与斑马鱼(Danio rerio)相似性最高,为99.3%。与其他鱼的相似性也较高,为97.8%～98.6%。同时也克隆出了建鲤β-actin相应的DNA序列,其长度为590 bp。cDNA和DNA的序列比对显示克隆出的建鲤β-actin含有2个内含子,设计一对跨越内含子的引物,采用SYBR GreenⅠ染料建立了real time PCR方法。以肝脏cDNA为标准品,建立了标准曲线,并进行了溶解曲线分析。结果表明,所建立的方法具有特异性强、相关系数高、线性范围广等优点,可应用于建鲤的功能基因表达研究。
关键词： 建鲤 内参基因 β-actin 实时荧光定量PCR
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坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)16S-23S rDNA间区的克隆及多态性分析
《海洋与湖沼 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：采用16S和23SrDNA保守区设计的引物对两株坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)16S-23SrDNA间区(Intergenic spacer region,ISR)进行了PCR扩增,并克隆到pMD18-T载体上进行测序;利用生物信息学进行了16S-23SrDNA间区序列及其内所含tRNA基因的分析.2株坚强芽孢杆菌共得到11条16S-23SrDNA间区特征区带(包括300、400、500和600bp等)序列,ISR类型包括ISR0、ISRG、ISRIA和ISRGLV四种,其中ISR0、ISRG和ISRIA可能在坚强芽孢杆菌中普遍存在.相同类型的ISR序列具有较高的相似性(达52.2%-100.0%),而不同类型的ISR序列间差异较大.此外,ISR序列在靠近16S和23S区域存在不同长度的保守区域,可能成为针对坚强芽孢杆菌特异性检测的引物和探针的靶区,这也为坚强芽孢杆菌新的检测方法的建立奠定了基础.坚强芽孢杆菌的16S-23SrDNA间区序列及其多态性分析均为首次报道.
关键词： 坚强芽孢杆菌 16S-23SrDNA间区 tRNA基因 多态性分析
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