鲤生长激素酵母工程菌的分泌表达和产物纯化

李英华; 白俊杰; 简清; 叶星; 李新辉; 罗建仁; 梁旭方; 《中国水产科学 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：取本室构建的鲤生长激素毕赤酵母工程菌GS115 (pPICZαA -GH) ,甲醇诱导 ,SDS -PAGE检测 ,证明重组鲤生长激素 (RecombinantCarpGrowthHormone ,rcGH)在酵母中得到分泌表达。重组酵母菌生长曲线显示 ,细胞从培养第 8小时进入对数生长期 ,至 32hOD660 升至峰值 11.5 ,此后OD660 缓慢下降。在以 10 0 %甲醛按 0 .5 %添加量诱导至 72h、pH为 6 .0时 ,rcGH表达量最高。凝胶扫描分析 ,分泌表达的rcGH占上清总蛋白的 36 .4 1% ,表达量为 30 0～ 4 0 0mg/L发酵液。经离子交换层析法纯化表达产物 ,纯度可达 95 %。纯化的rcGH注射奥尼罗非鱼 ,结果表明具有明显的促生长作用

关键词： 毕赤酵母 鲤生长激素 分泌表达 纯化 促生长

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ISSR-PCR技术在对虾中的应用初步研究

王伟继; 孔杰; 《海洋水产研究 》 2002 CSCD

摘要：采用 ISSR(Inter Simple Sequence Repeats)技术对中国对虾 (Penaeus chinensis)进行了 PCR扩增。优化了 PCR反应体系和反应参数 ,对 PCR产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染检测。从 10 0条 ISSR引物中筛选了 4 0条有清晰产物的引物 ,每条引物检测到的位点数从 1到 19不等 ,平均每条引物可检测到位点数为 7.7个。实验发现 :中国对虾简单重复序列区主要由两碱基循环组成。通过分析 ISSR- PCR技术本身的原理 ,探讨了该技术相对于同工酶检测和 RAPD技术在遗传多样性分析中的优势所在 ,以及该技术用于遗传标识的确认和遗传图谱构建方面的前景

关键词： ISSR-PCR 中国对虾(Fenneropenaeuschinensis) 遗传多样性

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动物病毒细胞受体研究及应用

梁艳; 黄倢; 俞勇; 徐怀恕; 《海洋水产研究 》 2002 CSCD

摘要：细胞受体是介导病毒入侵的决定因素。本文阐述动物病毒与细胞受体间的关系 ,一般来说二者之间是一对一 ,但也有多个病毒共用一个受体或一个病毒有多个受体的情况。病毒与受体的相互作用启动了病毒的生命循环 ,包括结合和进入的过程 ;一些寻找病毒受体的直接观察法及分子生物法。介绍了一些已经确定的病毒受体及其在对虾病毒病研究中的应用

关键词： 动物病毒 细胞受体 对虾

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Ti人工授精和孵化

万瑞景; 蒙子宁; 《水产学报 》 2002 北大核心 CSCD

关键词： Ti 孵化 胚胎发育 人工授精 水温 盐度 亲鱼 生物学

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对虾WSSV人工感染螯虾及其检测

莫照兰; 雷质文; 杨冰; 黄倢; 张培军; 《海洋科学 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：用对虾白斑综合症病毒(WSSV)人工感染淡水克氏原螯虾(Procambarusclarkii) ,感染组螯虾3～6d内全部死亡。核酸探针点杂交两次检测感染螯虾的鳃、胃、血淋巴 ,阳性检出率分别为92% (92% ) ,89 % (86 % ) ,81 % (75 % ) ,对照为11 % (3% ) ,5 % (5 % ) ,0(0) ;光镜下可观察到感染螯虾的胃、鳃组织的靶细胞核肿大、嗜酸性着染 ,电镜下病变组织细胞核可见形态大小与WSSV一致的病毒粒子 ;病毒核酸原位杂交两次检测感染螯虾的胃、鳃 ,阳性检出率均为100 % ,对照阳性检出率均为0。结果表明 :对虾WSSV可感染淡水克氏原螯虾 ,病毒核酸原位杂交是一种敏感特异的病毒检测方法

关键词： WSSV 人工感染 克氏原螯虾 核酸探针点杂交 核酸原位杂交

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数据库技术在海洋生物资源与生物栖息环境数据管理中的应用

李小恕; 李继龙; 贾静; 王立华; 葛常水; 黄其泉; 《上海水产大学学报 》 2002 CSCD

摘要：讨论了如何建立和管理符合地理信息系统需要的海洋生物资源与生物栖息环境数据库。数据库采用Access开发平台,开发操作界面清晰明了,开发的功能有数据录入、导入、导出、查询、修改、汇总统计、打印等,系统界面用户可视化,清晰、直观地显示查询结果,其适用范围是针对海上勘测海洋生物资源与生物栖息环境的专业数据管理,能胜任数据库的日常维护与管理。同时介绍了数据库技术在数据管理中的作用。数据库在日后的海洋渔业资源与环境的研究、评价中必将得到广泛的应用。

关键词： 数据库技术 海洋生物资源 数据管理系统

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东海北部和黄海南部Ti鱼卵和仔稚幼鱼数量、分布及其与环境条件的关系

万瑞景; 黄大吉; 《水产学报 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：1999年夏季Ti鱼卵和仔稚幼鱼主要分布于黄海南部,122°00′-123°45′E,34°00′-35°15′N与122°15′E以西海域分别为Ti鱼卵与Ti鱼仔稚幼鱼的密集分布中心,其表层水温和盐度分别为25.5-26.9℃和27.11-31.81与26.4-27.0℃和31.31-32.05.Ti鱼卵和仔稚幼鱼分布的最适表层水温分别为25.5-26.4℃和25.9-27.0℃;全长为20mm以上的Ti鱼稚鱼已初步形成广盐性分布的习性,Ti鱼卵和仔稚幼鱼的分布对盐度的要求并不非常严格,水温是影响鱼卵和仔稚幼鱼分布的主要原因之一.Ti鱼卵和仔稚幼鱼的分布与叶绿素a的分布也有密切的关系.Ti鱼卵和仔稚幼鱼的密集分布中心正是叶绿素a的高值区,随着季节的变化,黄海南部Ti鱼产卵场由青岛外海逐渐向深水区转移,黄海南部Ti鱼活卵所占的比例为45.76%,胚胎发育状况良好.

关键词： 东海北部 黄海南部 Ti鱼卵 区域分布 仔稚幼鱼 数量 环境条件

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人工感染白斑综合征病毒的克氏原螯虾的病理学试验

雷质文; 黄倢; 莫照兰; 《中国兽医科技 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：用从发病中国对虾体内提取的白斑综合征病毒 (WSSV )人工感染克氏原螯虾 ,被感染克氏原螯虾均发病死亡。光学显微镜下观察病螯虾的组织切片 ,发现其胃、鳃等的上皮组织以及结缔组织的细胞核明显肿大和嗜伊红染色 ;电镜观察超薄组织切片 ,发现病螯虾的胃部、鳃部组织的细胞核内有大量的杆状病毒样病毒粒子 ,该病毒粒子有囊膜 ;斑点杂交检测发病螯虾 ,阳性率为 10 0 % ;人工感染克氏原螯虾的角化上皮、胃上皮、肝胰腺上皮、疏松结缔组织、肌肉、造血组织和鳃 ,经原位杂交检测呈阳性。

关键词： 人工感染 克氏原螯虾 白斑综合征病毒 病理学特征

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海水工厂化养鱼水处理系统工程的研究——工艺流程、综合气浮、接触氧化池

宋德敬; 薛正锐; 陈庆生; 王秉心; 《海洋水产研究 》 2002 CSCD

摘要：对海水工厂化养殖牙鲆、大菱鲆的循环水处理系统工程进行了研究。对循环水系统各环节的设备性能及水质指标进行了测试和研究 ,确定了工艺流程及系统设施设备。对水处理系统各单元分别进行了设计计算。为我国海水工厂化养鱼走向产业化打下了良好的基础

关键词： 海水 工厂化养鱼 水处理 设施设备

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对虾白斑综合症病毒重组cDNA克隆的构建与分析

宋晓玲; 黄倢; Kathy F.LTang; 杨冰; Donald V.Lightner; 《水生生物学报 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：取经人工注射感染了对虾白斑综合症病毒 40— 45h的凡纳对虾鳃组织 ,分离mRNA ,以mRNA为模板合成双链cDNA ,并克隆于PUC质粒的NotI/SalI位点 ,构建了 1 0 0 0余株对虾感染后期鳃细胞的重组cDNA克隆。重组质粒经PCR鉴定插入片段 ,DNA斑点杂交分析目的片段 ,测定了 2 0株对虾白斑综合症病毒的重组cDNA克隆的末端DNA序列 ,并对其进行了包含存在的开放阅读框架、启动区上游序列、编码产物的特性等分析。结果显示 :PCR产物在0 3— 1 6kb之间 ;大于 1kb的克隆中有 31 8%的克隆为白斑综合症病毒的重组cDNA克隆。已测序的不包含同源序列的 1 3株克隆中含有 1 4个开放阅读框 ,其中 1 1个上游可检出启动子基序 ,4个可检出启动子调制元件。ORF转译产物的特性基序分析显示 :有 2个ORFs可检出锌指基序 ,3个ORFs可检出亮氨酸拉链基序 ,2个ORFs可检出NTP结合基序 ,未检出核定位信号基序。

关键词： 白斑综合症病毒 cDNA克隆 构建 分析

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