科研产出
重离子辐照对小麦籽粒蛋白及加工品质的影响
《南方农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]探明重离子辐照对小麦籽粒蛋白及加工品质的影响,为小麦优质育种提供新思路和理论依据.[方法]以适宜江苏淮北地区种植的中强筋小麦品种连麦12和中筋小麦品种淮麦20为供试材料,设0(CK)、30、60和90 Gy 4个不同辐照剂量水平,分析不同处理下小麦籽粒蛋白质含量、磨粉品质、面团粉质特性和拉伸特性的变化规律.[结果]重离子辐照对小麦籽粒加工品质产生一定的负效应,随着辐照剂量的增加,连麦12和淮麦20籽粒总蛋白及各蛋白组分含量均明显降低,以总蛋白和谷蛋白含量下降较明显,同时湿面筋含量、容重、沉降值、硬度、粉质参数和拉伸参数也不断降低,在90 Gy辐照剂量下,小麦加工品质指标均降至最低值,连麦12和淮麦20籽粒总蛋白含量、湿面筋含量、稳定时间和拉伸面积分别为13.49%、31.1%、6.8 min、61 cm2和13.19%、28.1%、3.9 min、25 cm2.重离子辐照对小麦品质的影响在2个品种间存在一定差异,30 Gy辐照剂量下,连麦12籽粒总蛋白含量降幅为2.14%,高于淮麦20(1.43%),而磨粉品质降幅小于淮麦20;当辐照剂量增至60 Gy,连麦12籽粒总蛋白含量和磨粉品质较淮麦20下降明显.在30~90 Gy辐照剂量下,淮麦20面团粉质参数和拉伸参数降幅均高于连麦12,其中在90 Gy辐照剂量下,淮麦20面团吸水率、稳定时间、粉质质量指数、最大拉伸阻力、拉伸面积和延伸性降幅分别达5.18%、30.36%、44.29%、35.51%、45.65%和26.53%.[结论]重离子辐照对小麦诱变群体籽粒品质存在一定的负效应,且随辐照剂量的增加,负效应越大,低剂量重离子辐照对淮麦20磨粉品质影响较大,而中高剂量重离子辐照对连麦12磨粉品质影响较大,淮麦20面团流变学特性对重离子的敏感度相对较高.
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早熟砂梨‘苏翠1号’与其亲本‘翠冠’‘华酥’成熟果实差异代谢产物及差异基因比较分析
《园艺学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：‘苏翠1号’梨因其极早熟、汁多味甜、肉质细脆而深受广大消费者喜欢。为了解‘苏翠1号’成熟果实主要代谢产物及代谢通路相关基因表达情况，探究其果实优异性状形成的物质和分子基础，对‘苏翠1号’及其亲本‘翠冠’和‘华酥’成熟果实样本进行代谢组和转录组测序分析。代谢组分析发现，3个品种间，前25个差异代谢产物主要包括有机酸、碳水化合物、氨基酸、甘油磷酸脂、脂肪酸和绿原酸。HPLC测定表明，蔗糖含量在‘苏翠1号’中最高，葡萄糖含量在‘翠冠’中最高，果糖含量在‘苏翠1号’和‘翠冠’中相似，略高于‘华酥’，山梨醇含量在‘苏翠1号’和‘华酥’中均显著低于‘翠冠’；苹果酸含量在‘苏翠1号’中最高，柠檬酸含量在‘华酥’中最高，‘苏翠1号’和‘华酥’总酸含量相近，均高于‘翠冠’。氨基酸含量分析表明，‘苏翠1号’的氨基酸总含量及天冬氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸含量显著高于‘翠冠’和‘华酥’。转录组GO和KEGG分析表明，相较于‘翠冠’和‘华酥’，‘苏翠1号’有机底物分解过程、脂质代谢、有机酸生物合成、羧酸生物合成、多糖代谢等生物学过程及代谢途径显著富集。进一步挖掘差异基因发现，糖代谢中的SPS、山梨醇代谢中的S6PDH、SDH,TCA循环中的FUM1、ICDH、PDH、OGDHL，氨基酸代谢途径中的GAT、GLSN、LASPO、SAMS，以及脂肪酸代谢中的DGK1、ACCA、KASC2、ADH、PLDA等基因在‘苏翠1号’中显著高表达。这些基因可能与‘苏翠1号’更活跃的蔗糖、山梨醇、氨基酸、甘油磷酯代谢及TCA循环有关。
关键词： 砂梨 果实品质 差异代谢产物 差异基因 qRT-PCR
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超高温预处理对畜禽粪便持水特征和后续堆肥腐熟进程的影响
《生态与农村环境学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为探讨超高温预处理对畜禽粪便持水特征及后续堆肥腐熟进程的影响机制，以常规堆肥为对照，采用干燥法测定不同时间（2、4和6 h）高温（90℃）预处理后鸡粪和猪粪的水分分布特征，并对后续堆肥过程的脱水率和腐熟周期进行监测。结果表明：经过不同时间高温预处理后，猪粪和鸡粪中结合水（毛细管水+吸附水+内部结合水）含量均显著（P<0.05）低于对照。其中，猪粪和鸡粪经过高温预处理4 h的毛细管水占结合水的比例分别为72.0%和68.0%,显著（P<0.05）高于各自对照，而吸附水占结合水的比例分别为25.9%和30.9%,显著（P<0.05）低于各自对照。与对照相比，超高温预处理4 h可使后续堆肥过程提前升温、提高堆体温度并延长高温期，种子发芽指数达到80.1%。此外，经超高温预处理，后续堆肥的脱水率显著（P<0.05）高于对照，且脱水率与种子发芽指数呈极显著（P<0.01）正相关。因此，超高温预处理促进了畜禽粪便中高结合能形态水分向低结合能形态水分的转化，有助于提升后续堆肥过程的脱水效率，有利于缩短堆肥腐熟时间，为畜禽粪便的脱水技术研究提供新的方法和思路。
关键词： 超高温预处理 畜禽粪便堆肥 水分特征 脱水效率 腐熟效果
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芽胞杆菌工程菌株B9BD产表面活性素发酵培养基优化
《中国生物防治学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：生物农药“纹曲宁”的主要活性成分—枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis Bs916可产生多种脂肽类抗生素。前期研究发现，degU和bmyA基因的突变株B9?degU?bmyA（B9BD）可以高效合成表面活性素（Surfactin）。本研究通过对培养基主要成分的单因素筛选并利用Design expert软件优化了工程菌株B9BD高效发酵产生Surfactin的培养基组分。通过Plackett-Burman试验、中心组合试验（CCD）和响应曲面法（RSM）优化了发酵Surfactin的最优培养基配方：葡萄糖24.27 g/L，黄豆粉29.05 g/L，牛肉浸膏3 g/L,NH4NO3 4 g/L,L-亮氨酸2.36 g/L,KH2PO4 3 g/L,Na Cl 3 g/L,Fe SO4 0.02 g/L。在优化培养基中，B9BD产生Surfactin的量高达到（934.25±32.67）mg/L，是其在LB培养基产量的5.6倍。以上研究结果将为Surfactin的高效发酵和应用提供理论基础和技术支撑。
关键词： 枯草芽胞杆菌 表面活性素 Plackett-Burman试验 中心组合试验 响应曲面法
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非洲猪瘟病毒P30蛋白单克隆抗体制备、鉴定及阻断ELISA方法的建立
《中国农业科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[背景]非洲猪瘟(ASF)于2018年8月在中国首次出现,对养猪业造成了巨大危害,损失惨重.目前尚无安全有效的疫苗用来预防ASF,于是建立快速特异的检测方法对于防控ASF提供了有效的手段.[目的]制备非洲猪瘟病毒(ASFV)特异性单克隆抗体,建立ASF快速特异性的检测方法.为ASF的检测和防控提供借鉴技术手段.[方法]构建表达载体pET-28a-P30,通过原核表达系统获得ASFV P30重组蛋白,以纯化的P30蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,经过细胞融合和细胞亚克隆制备出ASFV P30蛋白特异性杂交瘤细胞株;对P30蛋白进行截短表达,利用Western Blot和间接酶联免疫吸附试验(iELISA)鉴定单克隆抗体所对应的抗原表位;并利用制备的单克隆抗体建立非洲猪瘟阻断ELISA抗体检测方法.[结果]通过双酶切和PCR验证,结果显示构建出重组载体pET-28a-P30,经测序其序列未发生突变;IPTG诱导后,P30重组蛋白主要表达在包涵体中,分子量约为33 kD.纯化的P30蛋白与弗氏佐剂1:1混合免疫小鼠,3次免疫后,小鼠血清效价达到1:102 400,说明表达的蛋白具有良好的免疫原性.经细胞融合和亚克隆,获得8株P30蛋白特异性杂交瘤细胞,Western Blot和间接免疫荧光试验(IFA)检测获得的8株单抗均具有良好的反应性.叠加试验显示8株单克隆抗体均针对相同的抗原位点;截短表达P30蛋白不同片段,选取制备的2-12B单克隆抗体与不同的截短P30蛋白反应,显示单克隆抗体的抗原表位区为187-194aa.利用2-12B单克隆抗体并经过条件优化,成功建立了 ASF阻断ELISA抗体检测方法,检测了 190份临床样品,并与商品化非洲猪瘟ELISA抗体检测试剂盒进行对比,两方法阳性符合率为90.91%,总符合率为96.32%.[结论]本研究成功获得ASFV P30蛋白,经过iELISA、Western Blot和IFA筛选出反应性良好的特异性单克隆抗体8株,抗原识别表位区为187-194aa.并利用制备的单克隆抗体建立了特异性高,敏感性好的ASFV阻断ELISA抗体检测方法,为ASF的检测及其防控提供了手段和支撑.
关键词： 非洲猪瘟病毒 P30蛋白 单克隆抗体 抗原表位 阻断ELISA
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2种鹅星状病毒一步法双重RT-PCR检测方法的建立与应用
《江苏农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为建立能同时快速鉴别新型鹅星状病毒和鹅星状病毒变异株的检测方法，根据新型鹅星状病毒的ORF2基因和鹅星状病毒变异株的ORF1a基因的保守区域序列，设计并合成2对特异性引物。通过优化反应体系及反应条件，建立了能同时检测2种鹅星状病毒的一步法双重RT-PCR检测方法。该方法可同时扩增出新型鹅星状病毒658 bp和鹅星状病毒变异株381 bp的特异性条带，对坦布苏病毒、鹅细小病毒、鹅副黏病毒、H9N2亚型禽流感病毒、大肠杆菌和沙门菌的扩增结果均为阴性，具有良好的特异性。对新型鹅星状病毒和鹅星状病毒变异株重组质粒的最低检测量分别是1μl 1.71×10~3拷贝和1μl 1.70×10~3拷贝，敏感性良好，并且具有良好的重复性。应用该方法对临床采集的雏鹅泄殖腔拭子进行检测，结果显示，124份样品中新型鹅星状病毒阳性率为45.16%,鹅星状病毒变异株阳性率为28.23%,2种鹅星状病毒均为阳性的占11.29%,与单一RT-PCR方法检测结果符合率为100.00%。本研究建立的一步法双重RT-PCR检测方法快速简便，特异性强、灵敏度高，可用于临床样品的鉴别诊断，该方法的建立对2种鹅星状病毒病的流行病学调查和有效防控以及混合感染的致病性研究具有重要意义。
关键词： 新型鹅星状病毒 鹅星状病毒变异株 一步法双重RT-PCR
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甘薯叶片中多酚成分及其抗菌活性研究
《食品安全质量检测学报 》 2022 北大核心
摘要：目的 提取分离纯化甘薯叶片中多酚的成分,并研究其抗菌活性。方法 采用Sephadex LH-20羟丙基葡聚糖凝胶柱色谱、液相色谱等方法,分离纯化甘薯叶片乙酸乙酯和正丁醇部位的多酚成分,根据波谱数据和文献对其结构进行鉴定;采用平板稀释法测定不同化合物对3种病原菌最小抗菌浓度;采用肉汤二倍稀释法测量不同化合物对3种病原菌的抑制率,并计算半数抗菌浓度。结果 从甘薯叶提取物中分离并鉴定出3个酚酸类单体化合物、2个黄酮类单体化合物,分别为咖啡酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸甲酯、3,4-二咖啡酰奎宁酸甲酯、槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷和山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷。5种化合物均具有不同程度的抗菌活性,其中咖啡酸对肺炎克雷伯菌抑制作用明显;山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对金黄色葡萄球菌抑制作用明显; 3,4-二咖啡酰奎宁酸甲酯和槲皮素-3-O-β-吡喃葡萄糖苷对鲍曼不动杆菌抑制作用明显。结论 多酚成分是甘薯叶片抗菌作用的有效成分之一,具有作为天然抗菌剂应用于食品和医药领域的潜力。
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载叶黄素的鹰嘴豆分离蛋白-甜菊苷复合体系的稳定性
《江苏农业科学 》 2022 北大核心
摘要：为了提高叶黄素在功能食品及饮料应用中的稳定性,利用鹰嘴豆分离蛋白和甜菊苷为材料制备载叶黄素的复合体系,研究pH值、盐离子浓度、冻融处理、人工模拟胃肠液对鹰嘴豆分离蛋白-甜菊苷-叶黄素复合体系和鹰嘴豆分离蛋白-叶黄素复合体系稳定性的影响,以及复合体系在不同贮藏条件中的稳定性.结果表明,载叶黄素的鹰嘴豆分离蛋白-甜菊苷三元复合体系的耐盐性及耐酸性均高于载叶黄素的鹰嘴豆分离蛋白二元复合体系,且该三元复合体系在中碱性及低盐条件下的稳定性较好.冻融处理会破坏复合纳米颗粒结构,进而使体系失稳.贮藏温度对复合体系色泽的影响大于光照,复合体系适宜在4℃避光条件下贮藏.载叶黄素的鹰嘴豆分离蛋白-甜菊苷三元复合体系在胃肠液中的稳定性高于载叶黄素的鹰嘴豆分离蛋白二元复合体系,三元复合体系能更有效负载叶黄素而不被胃肠液中的消化酶降解.
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光照和湿度对西兰花硫苷代谢及生物活性物质的影响
《食品与发酵工业 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为探索可有效提升鲜切西兰花生物活性成分的光照及湿度条件,首先在超市货架低温[(13±1)℃]条件下,研究了不同光照[光密度5~8、25~35、75~85μmol/(m2.s)]联合不同湿度(50% ~60%、70% ~80%、90% ~100%)条件对鲜切西兰花的保鲜效果.通过分析表型、感官评分、色泽、总硫代葡萄糖苷(硫苷)和总异硫氰酸酯(isothiocyanate,ITC)的含量,筛选出光密度25~35μmol/(m2.s)协同湿度70% ~80%条件可有效提升西兰花品质.然后,以此条件处理鲜切西兰花,以超市实际销售环境[光密度:5~8μmol/(m2.s);湿度:50% ~60%]为对照组,研究光照和湿度对西兰花硫苷代谢及生物活性物质的影响.结果表明,光密度25~35μmol/(m2.s)协同湿度70% ~80%条件可有效保持鲜切西兰花中主要的硫苷物质含量,同时保持较高的黑芥子酶活性和ITC含量;此外,该条件下的西兰花花球中总酚、花色苷、叶绿素及类胡萝卜素含量较高.因此,光密度25~35μmol/(m2.s)协同湿度70% ~80%条件可有效保持鲜切西兰花品质,并维持其组织硫苷等生物活性物质含量,为其贮藏和销售提供理论及技术支持.
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