科研产出
稻曲病菌交配型基因MAT1-2-1和MAT1-2-8的特性分析
《植物病理学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：有性生殖在真菌的生活史和进化过程中具有重要作用,而交配型基因是控制有性生殖的关键因子。前期研究发现稻曲病菌（Villosiclava virens）MAT1-2型菌株中包含MAT1-2-1和MAT1-2-8两个交配型基因,但是它们如何调控稻曲病菌有性生殖依然不清楚。本文研究了它们在不同侵染和生长发育时期的表达模式和编码的蛋白结构特性。研究表明MAT1-2-1在侵染不同阶段一直下调表达;而MAT1-2-8在侵染早期（5 dpi）上调表达,在侵染后期下调表达。与营养菌丝阶段比较,MAT1-2-1和MAT1-2-8在有性发育过程菌核形成、菌核萌发、子座原基形成和子座成熟4个阶段的表达量都是下降的,在菌核形成阶段表达量最低。生物信息学分析显示MAT1-2-1和MAT1-2-8具有磷酸化位点,为非分泌蛋白,无明显的跨膜结构域。蛋白同源比对分析表明MAT1-2-1与香柱菌（Epichlo3 typhina）的MAT1-2-1同源性最高,而MAT1-2-8与绿僵菌（Metarhizium）的MBR08192蛋白同源性最高。进一步研究发现MAT1-2-1和MAT1-2-8能够互作,并分别主要定位在细胞核和细胞基质中。通过质谱技术鉴定到MAT1-2-1的一些候选互作蛋白,如假定Ran交换因子Prp20/Pim1（KDB12229.1）、假定rRNA处理蛋白Ebp2（KDB12923.1）及组蛋白H1（KDB12711.1）等。因此,以上结果为研究稻曲病菌交配型基因MAT1-2-1和MAT1-2-8调控有性生殖的生物学功能奠定了基础。
关键词： 稻曲病菌 交配型基因 表达模式 生物信息学分析 互作蛋白
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基于流式细胞术和K-mer分析的银缕梅属(Parrotia C.A.Mey.)植物基因组大小测定
《植物遗传资源学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：金缕梅科（Hamamelidaceae）银缕梅属（Parrotia C. A. Mey.）仅包含银缕梅（Parrotia subaequalis（H. T. Chang）R.M. Hao&H. T. Wei）和波斯铁木（Parrotia persica（DC.）C. A. Mey.）两种落叶阔叶乔木,其中银缕梅是我国华东地区特有的Ⅰ级濒危珍稀保护植物,属东亚第三纪孑遗成分;其姊妹种波斯铁木则间断分布于伊朗北部,属北极第三纪孑遗植物类群。本研究首次利用流式细胞术和K-mer分析方法对银缕梅属两姊妹种的基因组大小进行了测定,建立和优化了以萝卜（Raphanus sativus L.‘Saxa’）为内标、WPB（Woody plant buffer）为细胞核解离液的两种植物单倍体基因组的DNA含量（DNA C值）流式测定的适宜体系,旨在为金缕梅科银缕梅属植物的全基因组测序、基因组学研究、种质资源开发和利用以及物种保育等提供前期基础数据参考;同时也可为金缕梅科其他属、种的基因组大小测定提供借鉴。主要研究结果如下:（1）通过流式测定银缕梅基因组大小约为971.45±13.91 Mb,波斯铁木基因组大小约为890.52±24.69 Mb;（2）K-mer分析估测银缕梅基因组大小为951.70 Mb,杂合率为1.740%,重复序列比例为77.50%;波斯铁木基因组大小为858.50 Mb,杂合率为0.695%,重复序列占74.30%;（3）银缕梅属于高杂合和高重复基因组,波斯铁木则属于微杂合和高重复基因组。本研究的结果为银缕梅属植物后续基于DNA三代高通量测序技术的全基因组测序、组装及去冗余处理等工作提供了重要的数据参考。
关键词： 银缕梅 波斯铁木 基因组大小 流式细胞术 K-mer分析 基因组去冗余
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蚕豆VfGASA1基因的异源过表达延迟拟南芥开花
《江苏农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：GASA（Gibberellic acid-stimulated in Arabidopsis）蛋白是一类受赤霉素调控的小分子蛋白质,参与植物生长发育的多条途径。本研究在蚕豆（Vicia faba）中同源克隆了VfGASA1基因,该基因的开放阅读框全长为363 bp,编码1个包含120个氨基酸残基的蛋白质,VfGASA1在蚕豆叶片和嫩荚中高表达,亚细胞定位结果显示,VfGASA1是一个定位于质外体的分泌蛋白。异源过表达VfGASA1导致转基因拟南芥开花延迟、莲座叶数量增多,外施赤霉素能够恢复这一现象。实时荧光定量结果显示,转基因拟南芥植株中FT基因显著下调,而DELLA基因中的GAI基因显著上调,说明VfGASA1可能是通过间接抑制DELLA蛋白的表达从而调控植物开花。本研究结果为蚕豆的开花调控育种提供了理论依据。
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不同秸秆材料与制备工艺下生物炭性质及对土壤重金属的钝化效应
《生态与农村环境学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：以芦苇、玉米秸秆为原材料,采用正交实验设计方法制备不同处理生物炭,并将其应用到重金属污染土壤修复中,以寻求最佳的生物炭制备工艺并探讨其对土壤中Cd和Pb的钝化效果。结果表明,对生物炭制备影响最大的因素是炭化温度,温度升高会使炭产率下降,pH和灰分含量增加,比表面积在一定范围内也会大幅增加;其他因素如原料含水率、升温速率和炭化时间对生物炭制备的影响均低于炭化温度;所制备的芦苇秸秆生物炭（LWC）和玉米秸秆生物炭（YMC）产率相近,YMC的pH和灰分含量高于LWC,而LWC比表面积高于YMC。综合考虑因素最佳水平并兼顾效率,得出LWC和YMC最适宜制备条件均为含水率25%,升温速率20℃·min-1,炭化温度600℃,炭化时间0.5 h。与对照相比,添加LWC和YMC的土壤pH值均有所升高;随着培养时间延长,生物炭对土壤中Cd和Pb的钝化效率也逐渐提高,35 d时有效态Cd和Pb含量最高降低51.7%和44.9%,并且LWC的效果好于YMC。研究结果可为工程化制备生物炭提供一定的技术参考,并且为重金属污染土壤修复提供理论依据。
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琉璃苣BoD6D载体的构建及转化
《生物技术通报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：运用植物基因工程手段构建琉璃苣BoD6D转化载体,为提高油料作物油份中γ-亚麻酸含量奠定基础。以琉璃苣基因组DNA为模板克隆BoD6D,构建酵母表达载体并转化酿酒酵母,对酵母进行诱导表达,提取脂肪酸后进行甲酯化反应,利用气相色谱分析脂肪酸含量;同时构建植物双元表达载体,经农杆菌介导通过蘸花法转化拟南芥,最后对转基因拟南芥通过抗性筛选及PCR进行鉴定。结果表明,BoD6D编码区不含有内含子,可以直接用于后续的功能研究;成功构建了酿酒酵母表达载体pYES2-BoD6D,气相色谱检测结果表明BoD6D在酵母中能够成功的将亚油酸催化生成γ-亚麻酸;成功构建了植物双元表达载体pBI121-BoD6D,卡那霉素抗性筛选和PCR鉴定结果表明已经成功获得BoD6D的拟南芥转化植株。通过以琉璃苣基因组DNA为模板比较方便的获得有功能的BoD6D用于转基因植物研究。
关键词： 琉璃苣 BoD6D γ-亚麻酸 酵母表达载体 植物表达载体
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近红外高光谱成像结合特征波长筛选识别小麦赤霉病瘪粒
《江苏农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为实现小麦赤霉病瘪粒快速识别,本研究使用主成分分析（Principal component analysis, PCA）结合最大类间方差法（Otsu）对小麦高光谱图像进行背景分割,以赤霉病瘪粒识别正确率为评价指标,探究判别分析方法与竞争性自适应权重取样法（Competitive adaptive reweighted sampling, CARS）的最佳组合方式。结果显示,基于全谱段构建的偏最小二乘判别分析（Partial least squares discrimination analysis, PLS-DA）和支持向量机判别分析（Support vector machine discriminant analysis, SVM-DA）模型预测精度相同,外部验证集健康籽粒和赤霉病瘪粒识别正确率分别为95.2%和100.0%;基于CARS筛选的8个特征波长构建的CARS-PLS-DA模型外部验证集健康籽粒和赤霉病瘪粒识别正确率均为100.0%,预测精度高于CARS-SVM-DA模型,可有效实现赤霉病瘪粒的快速识别。研究结果将为谷物仓储和加工过程中赤霉病瘪粒高通量快速识别提供理论依据和技术支撑。
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枇杷花多酚对脂肪酶的抑制作用
《江苏农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：以枇杷花为原料,提取枇杷花多酚,并通过大孔树脂AB-8纯化,得到枇杷花多酚提取物,然后从抑制率、抑制机理、抑制类型和荧光淬灭效应几个方面探究枇杷花多酚对脂肪酶的抑制作用。结果表明,枇杷花多酚对脂肪酶具有很好的抑制效果,半抑制质量浓度为（66.1±6.36）μg/ml,以可逆混合性方式抑制脂肪酶的活性。枇杷花多酚能与脂肪酶生成复合物,结合位点数为1。
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苏北地区奶牛场无乳链球菌分离株毒力分析
《江苏农业科学 》 2021 北大核心
摘要：奶牛乳腺炎导致奶牛产奶量下降和乳制品质量降低,是奶牛养殖业重要的经济性疾病,在全球范围内造成巨大经济损失。选取苏北奶牛场3株代表性无乳链球菌分离株,SAG-FX17分离自临床型乳腺炎、CM31分离自隐性乳腺炎和CM41b分离自隐性发展为临床型乳腺炎奶牛乳汁,研究比较3株细菌生长特性、毒力因子分布、形成生物被膜能力及其对奶牛乳腺上皮细胞的黏附、侵袭和胞内存活能力。试验结果表明,3株分离株血清型均为Ⅰa型,2b型菌毛,gapC基因和cylE基因阳性,但仅SAG-FX17的α相关蛋白家族为Alp1型,其他2株为未定型。研究发现SAG-FX17与奶牛乳腺上皮细胞（Mac-T）共孵育时生成生物被膜能力明显增强,且该菌对Mac-T细胞黏附率为52.5%,显著高于CM31和CM41b。侵袭试验结果表明,3株细菌侵袭到细菌内部的能力很低,但侵袭到细胞内的细菌具有一定存活能力,侵入细胞4 h 3株分离株SAG-FX17、CM31、CM41b存活率分别为24%、18%、86.7%。综上所述,无乳链球菌在奶牛乳腺上皮细胞表面形成生物被膜及其在胞内存活能力是影响细菌致病性的重要因素。
关键词： 无乳链球菌 毒力因子:生物被膜 黏附 胞内存活能力 奶牛场 苏北地区
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侵染江苏猕猴桃的北方根结线虫(Meloidogyne hapla)形态学描述和分子特征分析
《江苏农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：根结线虫病长期以来对猕猴桃安全生产造成了严重威胁。调查发现江苏省连云港市部分猕猴桃种植园根结线虫病发生普遍,组织切片可见根部出现根结线虫诱导的特异的巨细胞。形态学观察和分子检测结果显示,尽管与其他群体存在一定差异,但仍确定本次分离自猕猴桃的根结线虫（种群编号:CN43）为北方根结线虫（Meloidogyne hapla）。基于内转录间隔区（ITS）和COⅡ-16S序列构建的遗传进化树显示,CN43分离群体与已知的北方根结线虫位于同一进化分支,而与其他种类的根结线虫明显区分开来。以ITS序列构建的中接网络将34个北方根结线虫分离群体划分为10个单倍型,其中CN43属于最大的单倍型群组;然而,单倍型分析不能确定各分离群体在地理分布上的关联性。综上,本研究首次报道了北方根结线虫在中国猕猴桃上的侵染和发生,其分离群体的形态学描述和分子特征分析可为揭示猕猴桃根结线虫的种群多样性和种间变异提供参考。
关键词： 猕猴桃 根结线虫 北方根结线虫 内转录间隔区（ITS） COⅡ 进化分析
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盐城市农业科技园区建设情况调研及发展对策
《江苏农业科学 》 2021 北大核心
摘要：农业科技园区是促进产业融合发展、支撑农民创业、推进农业现代化建设的重要载体,建设高水平现代农业科技园区是实现广大农民共同富裕的必由之路。通过实地察看、调研走访等形式,对江苏盐城市农业科技园区主导产业、企业集群、产学研合作、科技应用服务等发展情况进行专题调研和分析,发现其在园区规划布局、管理服务、创新主体、示范引领作用和资源整合力度等方面存在问题,从优化园区发展布局、完善科技服务体系、提升企业创新能力、强化示范带动、发挥创新引领作用、集聚创新资源等5方面提出对策建议,以期为盐城市农业科技园区建设及地级市农业产业化发展提供参考依据。
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