科研产出
青花菜花蕾转录组测序分析及蜡粉合成相关基因挖掘
《南方农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：【目的】对青花菜花蕾进行转录组测序分析，并挖掘与蜡粉合成相关基因，为探明青花菜花球表面蜡粉形成的分子机制提供理论参考。【方法】分别提取野生型和蜡粉缺失型青花菜花球总RNA，采用Illumina HiSeqTM 2500平台进行转录组测序，获得高质量Clean reads，采用Trinity进行序列组装后获得青花菜Unigene库，将获得的Unigene序列与Nr、Nt、KEGG、Pfam、KOG/COG、Swiss-Prot和GO数据库比对，获得基因功能注释信息；使用DESeq2进行差异表达分析。【结果】共获得44.68 Gb Clean data,De novo组装得到41244条Unigenes,N50长度为1847 bp。从所获得的Unigenes中筛选出8685个差异表达基因（DEGs）（上调基因5747个，下调基因2938个），共有8038个基因被注释到不同数据库，其中，5220个基因注释到Pfam数据库；2066个基因注释到COG数据库，3866个基因注释到KOG数据库；2580个差异表达基因被注释到75个转录因子家族中，注释最多的是MYB家族（235个）；GO数据库中6095个差异表达基因注释到细胞组分、分子功能和生物学过程三大类的52个功能分类；KEGG数据库中，1671个差异表达基因富集到138条代谢通路，其中13个差异表达基因与脂肪酸合成有关，7个差异表达基因与蜡粉生物合成途径有关。【结论】转录因子MYB家族在调控青花菜蜡粉合成中发挥重要作用。蜡粉合成过程中相关酶基因的差异表达是调控青花菜蜡粉合成的关键，尤其是野生型和蜡粉缺失突变体中特异性表达的差异表达基因，可作为后续研究青花菜花球表面蜡粉形成分子机制的对象。
关键词： 青花菜 花蕾 蜡粉缺失突变体 转录组 基因功能注释
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小麦隐性核不育保持系表达载体的构建及拟南芥遗传转化
《麦类作物学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：利用小麦杂种优势能够创制稳定的雄性不育系。相比于细胞质雄性不育系和光温敏雄性不育系,细胞核雄性不育具有育性稳定、易恢复、不受环境影响等特点。小麦隐性核不育基因ms1的克隆以及杂交制种技术（hybrid seed production technology,SPT）的开发,为雄性不育的保持和杂种优势利用奠定了基础。本研究将小麦花粉育性恢复基因Ms1、花粉致死基因ZmAA1、红色荧光蛋白基因DsRed2及其特异性启动子和终止子连接到表达载体pGEII上,转化野生型拟南芥,得到6株转基因拟南芥。通过荧光显微镜观察拟南芥种子,发现野生型拟南芥种子表面平滑,不能发出红色荧光;而转基因种子表面呈现颗粒状,能够发出红色荧光。这说明表达载体构建成功,并能够在拟南芥中成功表达。这为创制人工小麦隐性核不育系奠定了理论和材料基础。
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Pib、Pi9、Pi2、Pi54和 Pish 在粳稻品种(系)中的分布及对穗颈瘟的抗性
《西南农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：[目的]探明抗稻瘟病基因Pib、Pi9、Pi2、Pi54和Pish在粳稻品种(系)中的分布情况及不同基因型对稻瘟病的抗性水平.[方法]利用该5个基因的分子标记及人工接种稻瘟病的方法对93份材料进行研究.[结果]包含3个、2个和1个抗性基因的材料分别为19份(占20.4%)、25份(占26.9%)和28份(占30.1%),但这5个抗性基因在93份材料中均有分布.携带抗性基因Pib、Pi9、Pi2、Pi54和 Pish 的材料分别为49份(52.7%)、16份(17.2%)、8份(8.6%)、31 份(33.3%)、31 份(33.3%),抗性基因Pib的检出率最高;抗性较好的6个基因型或基因组合分别是Pi9、Pi54、Pib+Pi9、Pib+Pi2、Pib+Pish和Pi9+Pi54,但检出率均很低.[结论]本研究进行的抗稻瘟病基因检测和抗病性评价结果为稻瘟病抗性育种提供了可靠的理论依据.
关键词： 水稻;稻瘟病;抗性基因;分子标记
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美国薄壳山核桃细菌性叶枯病研究进展
《江苏农业科学 》 2022 北大核心
摘要：薄壳山核桃是高档干果树种,不仅经济效益高,也是优良的行道树和庭荫树,适于河流沿岸、湖泊周围及平原地区"四旁"绿化,具有极大的应用研究价值.薄壳山核桃细菌性叶枯病是由木质部难养菌引起的,可导致病株严重落叶、坚果质量和果仁质量下降,造成巨大的产量损失.本文从薄壳山核桃细菌性叶枯病的病原概述、病症表现及检测手段等方面进行综述,以期对该病害有更全面的了解,并且针对今后检测技术、防治措施及抗病品种培育等研究方向提出合理化建议,旨在为我国薄壳山核桃成熟果园病害防治研究提供参考.
关键词： 美国山核桃 木质部难养菌 酶联免疫法 荧光定量PCR 细菌性叶枯病
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苋菜AtrADH2基因克隆及表达分析
《中国农业大学学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：ADH基因在甜菜色素合成酪过程氨酸途径中发挥着重要作用,为探究苋菜酪氨酸途径的关键基因AtrADH2在苋菜中的功能,本研究以'苏苋1号''苏苋2号'苋菜品种为试验材料,利用RT-PCR技术等研究方法克隆获得1个AtrADH2基因(GenBank登录号:MT982371).结果表明:1)苋菜AtrADH2基因的ORF长为1 197 bp,编码398个氨基酸;2)AtrADH2蛋白属于NADB_Rossmann超级家族,含有1个NADB保守结构域;3)系统进化树分析表明,AtrADH2蛋白与甜菜BvADHα蛋白亲缘关系最近;4)'苏苋1号'中甜菜色素含量受到光周期的影响;与其它组织部位相比,叶中的甜菜色素含量最高;与幼苗期相比,开花期叶和茎的甜菜色素含量均有所下降;5)qRT-PCR分析表明,AtrADH2基因表达趋势与AtrCYP76AD1、AtrDODA和AtrMYB1基因表达趋势相反.综上,AtrADH2基因可能对苋菜甜菜色素合成具有负调控作用,为进一步研究AtrADH2基因的功能提供了参考依据.
关键词： 苋菜;AtrADH2基因;甜菜色素;光周期;表达分析
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中国稻渔种养系统水稻产量差及影响因素的整合分析
《江苏农业科学 》 2022 北大核心
摘要：为了揭示稻渔种养系统生产潜力和制定高产高效栽培措施提供科学依据.从中国知网和web of science等2个数据库,分别以稻渔(包括稻虾、稻鱼、稻蟹、稻鳖、稻鳅)、施肥、产量、种植密度、种植方式、rice-fish、rice-crayfish、rice-crab、rice-turtle、rice-loach、yield、variety、seeding density、planting pattern、fertilizer and China等为关键词检索,共收集目标文献108篇.总结稻渔系统水稻的产量潜力和产量差,通过分析品种、施肥量、种植密度、种植方式和饲料氮磷残留对稻渔系统水稻产量的影响,阐明稻渔种养系统水稻产量差的影响因素及缩小产量差的途径.结果表明,当前我国稻渔系统产量潜力较大,稻虾、稻鱼、稻蟹、稻鳖、稻鳅模式水稻高产纪录分别为9.64、9.46、10.47、9.14、9.62 t/hm2,总样本平均产量分别实现了潜力产量的79%、75%、76%、74%、78%,其中水稻品种、种植密度和施肥量是产量差的主要限制因素.稻虾模式氮磷钾最优施肥量分别为86.2、69.2、66.5 kg/hm2,稻鱼模式分别为151.3、45.7、108.0 kg/hm2;杂交稻的稻虾、稻鱼、稻鳖和稻鳅模式水稻产量比常规稻增加3.9%~50.6%;籼稻产量在稻虾、稻鱼、稻鳖和稻鳅模式下比粳稻增加4.6%~25.6%.稻虾、稻鱼、稻蟹和稻鳅系统水稻的适宜种植密度分别为32.2万、30.2万、24.7万、45.1万株/hm2;另外,一定量饲料氮磷残留可提高水稻产量.我国稻虾、稻鱼、稻蟹、稻鳖、稻鳅模式下水稻的增产潜力分别为2.07、2.39、2.50、2.37、2.15 t/hm2.适宜的品种、施肥量、播种密度和饲料氮磷残留量可以缩小产量差,其中品种以籼稻和杂交稻为宜;优化施肥量可以使稻虾和稻鱼模式下水稻分别增产5.5%、5.1%;优化种植密度则使水稻增产4.8%~15.5%.
关键词： 稻渔种养;产量差;品种;施肥;种植密度;生育期;饲料养分残留
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外源水杨酸和氯化钙对糯玉米花期高温胁迫下光合特性及产量的调控效应
《江苏农业科学 》 2022 北大核心
摘要：研究外源调节剂调控高温胁迫对糯玉米生长发育的影响,可为未来全球气候变暖背景下糯玉米丰产稳产提供理论依据.选取2个耐热性不同的糯玉米品种苏玉糯2号(耐热能力较强)和苏玉糯11(高温敏感)为试验材料,于花期喷施外源调节剂水杨酸(SA)、氯化钙(CaCl2),研究不同外源调节剂对花期高温胁迫下糯玉米光合荧光指数、光合同化物积累、产量和产量构成因素的调控效应.结果表明,高温胁迫下,喷施SA、CaCl2均提高了叶片的最大光化学效率(Fv/Fm)、PSⅡ潜在活性(Fv/Fo)、光合性能指数(PIabs)、电子传递的量子产额(φEo)和电子受体的量子产额(φRo);喷施SA、CaCl2显著提高叶片的叶绿素a、叶绿素b和叶绿素a+b含量;2种外源调节剂不同程度地提高了高温胁迫下糯玉米干物质积累量及产量.比较2种调节剂发现,SA、CaCl2均能缓解高温胁迫对糯玉米生长发育造成的影响,而CaCl2处理对缓解高温胁迫的效果更佳.本研究结果可为缓解糯玉米高温热害损伤和抗逆栽培提供理论基础与技术支撑.
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灭菌唑与氰烯菌酯复配对水稻恶苗病菌的抑制活性
《农药学学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：采用菌丝生长速率法,测定了灭菌唑对水稻恶苗病菌的毒力,测得灭菌唑对10株水稻恶苗病菌的EC50值范围为0.0664~0.766 1 μg/mL.采用有效成分质量浓度分别为60、120和240μg/mL的25g/L灭菌唑种子处理悬浮剂处理水稻种子后,对水稻发芽率、株高、鲜重均无影响.表明灭菌唑对水稻恶苗病菌具有较好的抑制活性,且对水稻安全,可用于水稻恶苗病的化学防控.氰烯菌酯对10株水稻恶苗病菌的EC50值范围为0.0076~0.2629 μg/mL.将氰烯菌酯和灭菌唑分别按质量比4∶1、3∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶3和1∶4复配,测定了复配药剂对水稻恶苗病菌的联合毒力,所得增效系数在0.5~1.5之间,均为相加作用.研究表明,将氰烯菌酯与灭菌唑复配后施用,不仅能显著降低单剂的使用剂量,且能降低氰烯菌酯对病原菌群体的选择压力,延缓抗药性的发生和发展速度,保障病害防效和水稻生产安全.
关键词： 水稻恶苗病菌 灭菌唑 氰烯菌酯 联合毒力 安全 增效系数
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胞内劳森氏菌间接ELISA抗体检测方法的建立及应用
《中国预防兽医学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为建立胞内劳森氏菌(LI)抗体的间接ELISA检测方法,本研究构建了含有LI外膜蛋白基因的重组质粒pET32-LI1022并进行原核表达.结果显示LI1022基因在BL21(DE3)宿主菌内以可溶性表达重组LI1022蛋白(rLI1022),western blot结果显示rLI1022具有较好的反应原性,可作为建立间接ELISA检测方法的包被抗原.进一步经Ni柱纯化获得纯化rLI1102,以其为包被抗原,对ELISA条件进行优化,结果显示纯化的rLI1022以4.69 ng/孔4℃过夜包被最佳;血清最佳反应条件为1∶100稀释,37℃作用1h;羊抗猪IgG-HRP最佳反应条件为1∶10 000稀释,37℃作用1h;25℃TMB底物显色15 min.对建立的间接ELISA方法的特异性、敏感性、重复性进行分析,结果显示包被抗原与PRRSV、PRV、FMDV、PEDV等阳性血清均无交叉反应,仅可特异性检测LI抗体;当LI阳性血清稀释倍数为1∶400时仍为阳性,表明该方法敏感性较好;批内、批间重复性试验变异系数均小于10%.与国外商品化ELISA检测试剂盒对比,二者的符合率达94.44%;利用所建立的间接ELISA方法对江苏部分地区319份临床猪血清样品进行检测,其中LI阳性检出率为87.77%,表明LI在江苏猪群中普遍存在.本研究首次建立了检测LI的间接ELISA方法,为临床LI血清流行病学调查提供了可行技术手段.
关键词： 胞内劳森氏菌 间接ELISA 抗体检测 LI1022重组蛋白
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防治水稻恶苗病拮抗细菌的筛选、鉴定和评价
《江苏农业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：本研究从植物根际土壤中分离获得菌落形态各异的细菌分离株432株,以引起水稻恶苗病的藤仓镰刀菌菌群为指示菌,通过孢子萌发和平板对峙试验筛选获得对孢子和菌丝都具有显著抑制作用的细菌6株.生防相关特征分析结果显示,菌株LSRS26、JTGSL12和JTGSM1对水稻恶苗病病菌的抑菌效果、生物膜形成能力、群集游动能力和产抑菌物质方面的作用较为优秀.分子鉴定结果表明,菌株LSRS26、JTRSM1、JTGSL12和AHGHL2是Bacillus amyloliquefaciens(解淀粉芽孢杆菌),菌株JTGSM22和JTLM2是Paenibacillus jamilae(杰米拉类芽孢杆菌).水稻促生试验结果显示,当浸种菌液浓度(OD600)=0.1时,菌株LSRS26和JTRSM1对水稻出芽具有促进作用;当浸种菌液浓度(OD600)=0.1时,菌株JTGSL12对水稻植株鲜质量和株高的促进效果最为显著.盆栽防效试验结果显示,当浸种菌液浓度(OD600)=1.0时,3株芽孢杆菌对水稻恶苗病都表现出不同程度的防治作用,防效为58.00%~72.00%,其中JTGSL12的防效最高,为71.62%.本研究通过筛选获得3株优秀的生防菌,为防治水稻恶苗病的生物农药种子处理剂的创制积累了菌株资源.
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